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类NADC30与类NADC34 PRRSV双重qPCR检测方法的建立与应用
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作者 马明洋 余文轩 +7 位作者 安川叶 张晶晶 杨紫烨 殷笑妍 杜叶 朱瑞冰 韩冬梅 刘冠慧 《中国动物检疫》 CAS 2024年第12期89-94,共6页
近年来,类NADC3O和类NADC34猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)给养猪业带来了严重经济损失。为实现类NADC30和类NADC34 PRRSV的同时检测,针对PRRSV经典毒株、高致病性毒株、类NADC30毒株和类NADC34毒株ORF5基因的明显差异区域序列,设计引... 近年来,类NADC3O和类NADC34猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)给养猪业带来了严重经济损失。为实现类NADC30和类NADC34 PRRSV的同时检测,针对PRRSV经典毒株、高致病性毒株、类NADC30毒株和类NADC34毒株ORF5基因的明显差异区域序列,设计引物与探针,经优化引物和探针浓度及退火温度,建立了类NADC30和类NADC34 PRRSV双重qPCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评估,比较该方法与文献报道方法对临床样本检测结果的一致性。结果显示:本研究建立的双重qPCR方法仅对类NADC30和类NADC34 PRRSV核酸扩增呈阳性,而对其他常见猪病病原均无扩增,且类NADC30与类NADC34 PRRSV检测方法之间无交叉反应;对类NADC30和类NADC34 PRRSV核酸的最低检测限分别为1和10 copies/uL,组内及组间试验变异系数均小于2%;该方法与文献报道方法对类NADC30和类NADC34 PRRSV检测结果的符合率分别为89.5%和92.9%。结果表明,本研究建立的双重qPCR方法特异性好、灵敏度高、稳定性佳,能够有效区分类NADC30和类NADC34 PRRSV,为猪繁殖与呼吸综合征诊断和流行病学调查提供了技术支撑。 展开更多
关键词 类NADC30 PRRSV 类NADC34 PRRSV 双重qPCR 建立及应用
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