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miR-136-5p靶向MIEN1对宫颈癌细胞侵袭和迁移的调节及机制研究
被引量：
9
1
作者
姚慧欣
王钧峰
+2 位作者
吴金涛
李会影
孙喆
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期362-368,共7页
目的探究miR-136-5p通过靶向作用迁移侵袭增强因子(MIEN1),对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法收集宫颈癌石蜡包埋组织块及癌旁组织20例,RT-PCR检测MIEN1和miR-136-5p基因表达水平并分析MIEN1和miR-136-5p基因表达的相关...
目的探究miR-136-5p通过靶向作用迁移侵袭增强因子(MIEN1),对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法收集宫颈癌石蜡包埋组织块及癌旁组织20例,RT-PCR检测MIEN1和miR-136-5p基因表达水平并分析MIEN1和miR-136-5p基因表达的相关性。荧光素酶报告基因实验检测miR-136-5p和MIEN1的相互作用。宫颈癌细胞SiHa分为SiHa、miR-136-5p mimic、pC-MIEN1和pC-MIEN1+miR-136-5p组,转染相应的miRNA或载体,划痕法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blotting检测MIEN1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、Twist、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果与正常组织比较,宫颈癌组织中MIEN1基因表达明显升高(2.27±0.67,P<0.01),miR-136-5p表达明显降低(0.35±0.13,P<0.01),且MIEN1和miR-136-5p表达水平呈负相关(r=-0.771,P<0.01)。在荧光素酶报告实验中,与MIEN1 WT+mimic NC组比较,MIEN1 WT+miR-136-5p mimic组荧光素酶活性明显降低(0.34±0.05,P<0.01)。在细胞实验中,与SiHa组比较,miR-136-5p mimic组MIEN1(0.22±0.03)、N-cadherin(0.13±0.03)、Twist(0.19±0.03)、MMP-9(0.14±0.03)、NF-κB p65(0.28±0.04)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.15±0.03)明显降低,E-cadherin(0.82±0.09)蛋白表达明显升高(P<0.01),并且细胞迁移[(23.0±5.1)%]和侵袭能力(42±5)明显降低(P<0.01);pC-MIEN1组MIEN1(1.06±0.09)、N-cadherin(0.59±0.07)、Twist(0.76±0.08)、MMP-9(0.72±0.08)、NF-κB p65(1.48±0.13)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.56±0.06)明显升高,E-cadherin(0.17±0.03)蛋白表达明显降低(P<0.01),并且,细胞迁移[(81.5±9.0)%]和侵袭能力(228±19)明显升高(P<0.01);与pC-MIEN1组比较,pC-MIEN1+miR-136-5p组MIEN1(0.53±0.06)、N-cadherin(0.31±0.04)、Twist(0.36±0.05)、MMP-9(0.40±0.06)、NF-κB p65(0.89±0.11)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.33±0.06)明显降低(P<0.01),E-cadherin(0.67±0.09)蛋白表达明显升高(P<0.01),并且细胞迁移[(52.0±7.5)%]和侵袭能力(97±11)明显降低(P<0.01)。结论miR-136-5p可通过靶向作用于MIEN1抑制宫颈癌细胞的侵袭和迁移,其机制可能与抑制AKT/NF-κB信号通路有关。
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关键词
宫颈癌
miR-136-5p
迁移侵袭增强因子1
迁移
侵袭
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职称材料
题名
miR-136-5p靶向MIEN1对宫颈癌细胞侵袭和迁移的调节及机制研究
被引量：
9
1
作者
姚慧欣
王钧峰
吴金涛
李会影
孙喆
机构
牡丹江
医学院
附属
红旗
医院
医务
科
牡丹江
医学院
附属
红旗
医院
骨外
科
牡丹江
医学院
附属
红旗
医院
妇产
科
牡丹江医学院附属红旗医院医疗保险科
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期362-368,共7页
基金
黑龙江省卫生计生委科研课题(No.2018335)。
文摘
目的探究miR-136-5p通过靶向作用迁移侵袭增强因子(MIEN1),对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法收集宫颈癌石蜡包埋组织块及癌旁组织20例,RT-PCR检测MIEN1和miR-136-5p基因表达水平并分析MIEN1和miR-136-5p基因表达的相关性。荧光素酶报告基因实验检测miR-136-5p和MIEN1的相互作用。宫颈癌细胞SiHa分为SiHa、miR-136-5p mimic、pC-MIEN1和pC-MIEN1+miR-136-5p组,转染相应的miRNA或载体,划痕法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blotting检测MIEN1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、Twist、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果与正常组织比较,宫颈癌组织中MIEN1基因表达明显升高(2.27±0.67,P<0.01),miR-136-5p表达明显降低(0.35±0.13,P<0.01),且MIEN1和miR-136-5p表达水平呈负相关(r=-0.771,P<0.01)。在荧光素酶报告实验中,与MIEN1 WT+mimic NC组比较,MIEN1 WT+miR-136-5p mimic组荧光素酶活性明显降低(0.34±0.05,P<0.01)。在细胞实验中,与SiHa组比较,miR-136-5p mimic组MIEN1(0.22±0.03)、N-cadherin(0.13±0.03)、Twist(0.19±0.03)、MMP-9(0.14±0.03)、NF-κB p65(0.28±0.04)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.15±0.03)明显降低,E-cadherin(0.82±0.09)蛋白表达明显升高(P<0.01),并且细胞迁移[(23.0±5.1)%]和侵袭能力(42±5)明显降低(P<0.01);pC-MIEN1组MIEN1(1.06±0.09)、N-cadherin(0.59±0.07)、Twist(0.76±0.08)、MMP-9(0.72±0.08)、NF-κB p65(1.48±0.13)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.56±0.06)明显升高,E-cadherin(0.17±0.03)蛋白表达明显降低(P<0.01),并且,细胞迁移[(81.5±9.0)%]和侵袭能力(228±19)明显升高(P<0.01);与pC-MIEN1组比较,pC-MIEN1+miR-136-5p组MIEN1(0.53±0.06)、N-cadherin(0.31±0.04)、Twist(0.36±0.05)、MMP-9(0.40±0.06)、NF-κB p65(0.89±0.11)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.33±0.06)明显降低(P<0.01),E-cadherin(0.67±0.09)蛋白表达明显升高(P<0.01),并且细胞迁移[(52.0±7.5)%]和侵袭能力(97±11)明显降低(P<0.01)。结论miR-136-5p可通过靶向作用于MIEN1抑制宫颈癌细胞的侵袭和迁移,其机制可能与抑制AKT/NF-κB信号通路有关。
关键词
宫颈癌
miR-136-5p
迁移侵袭增强因子1
迁移
侵袭
Keywords
cervical cancer
miR-136-5p
migration and invasion enhancer 1
migration
invasion
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-136-5p靶向MIEN1对宫颈癌细胞侵袭和迁移的调节及机制研究
姚慧欣
王钧峰
吴金涛
李会影
孙喆
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2020
9
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