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环状RNA_PLEKHM3通过miR-320/KLF4轴调控宫颈癌细胞上皮间质转化
被引量:
2
1
作者
张亚男
崔莹
+1 位作者
王天娇
杜忠蕾
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024年第3期403-412,共10页
目的探讨环状RNA含普列克底物蛋白同源域的家族M3成员(PLEKHM3)(circRNA_PLEKHM3)通过调控微小RNA-320(miR-320)/畸变样因子4(KLF4)轴在宫颈癌细胞上皮间质转化(EMT)行为中的作用与机制。方法采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测宫颈癌细胞H...
目的探讨环状RNA含普列克底物蛋白同源域的家族M3成员(PLEKHM3)(circRNA_PLEKHM3)通过调控微小RNA-320(miR-320)/畸变样因子4(KLF4)轴在宫颈癌细胞上皮间质转化(EMT)行为中的作用与机制。方法采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测宫颈癌细胞Hela和CaSki中circRNA_PLEKHM3的表达水平;RNA荧光原位杂交检测circRNA_PLEKHM3在人宫颈癌上皮细胞CaSki中的定位;双荧光素酶报告基因实验检测circRNA_PLEKHM3和miR-320的靶向关系,以及miR-320和KLF4的靶向关系;对CaSki细胞过表达circRNA_PLEKHM3;另外设置三组,分别为在过表达circRNA_PLEKHM3的基础上过表达miR-320、沉默KLF4,以及在过表达miR-320的基础上沉默KLF4。qRT-PCR检测CaSki中miR-320的表达水平;Western blot检测CaSki细胞中KLF4和EMT标志物上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达;Transwell实验检测细胞迁移数和侵袭细胞数。结果circRNA_PLEKHM3在Hela和CaSki中的表达均降低(P<0.05),其主要定位在细胞质中;双荧光素酶报告基因实验显示miR-320和circRNA_PLEKHM3存在靶向关系,KLF4和miR-320存在靶向关系;过表达circRNA_PLEKHM3抑制miR-320和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9的蛋白表达,上调E-cadherin的蛋白表达,减少细胞迁移和侵袭数(P<0.05);在过表达circRNA_PLEKHM3的基础上过表达miR-320或沉默KLF4均能够促进miR-320和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达,上调E-cadherin蛋白的表达,减少迁移和侵袭细胞数(P<0.05);然而在过表达miR-320的基础上沉默KLF4,KLF4和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达受到抑制,E-cadherin蛋白的表达上调,细胞迁移和侵袭数减少(P<0.05)。结论circRNA_PLEKHM3过表达可能通过miR-320/KLF4轴调控宫颈癌细胞的EMT。
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关键词
cirRNA_PLEKHM3
miRNA-320
畸变样因子4
宫颈癌细胞
上皮间质转化
迁移
侵袭
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职称材料
卵巢癌患者大网膜切除的临床病理分析
被引量:
2
2
作者
缪智辉
殷平
+1 位作者
王玉梅
张际菲
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第11期871-872,共2页
关键词
卵巢癌
大网膜切除
肿瘤细胞减灭术
肿瘤转移
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职称材料
和厚朴酚抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制
被引量:
8
3
作者
陈佳权
赵欢
+2 位作者
武晓萌
尹洪丽
艾恒玲
《中成药》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期214-218,共5页
目的探讨和厚朴酚抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法采用MTT法、Transwell法,检测和厚朴酚(5、10、15μg/mL)治疗的宫颈癌细胞的抑制率和迁移侵袭。将pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-THBS2组(转染pcDNA-THBS2)、honokiol+pcDNA组...
目的探讨和厚朴酚抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法采用MTT法、Transwell法,检测和厚朴酚(5、10、15μg/mL)治疗的宫颈癌细胞的抑制率和迁移侵袭。将pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-THBS2组(转染pcDNA-THBS2)、honokiol+pcDNA组(转染pcDNA并用honokiol处理)、honokiol+pcDNA-FAK组(转染pcDNAFAK并用honokiol处理),转染至siha细胞,Western blot检测细胞中THBS2、MMP-9的蛋白表达。结果与对照组比较,和厚朴酚(5、10、15μg/mL)治疗的siha细胞中细胞增殖、迁移和侵袭均明显降低,MMP-9、THBS2表达均明显升高;过表达THBS2具有与和厚朴酚相同的抑制siha细胞增殖、迁移和侵袭的作用;和厚朴酚、过表达THBS2均可明显的下调siha细胞中的FAK信号通路中FAK的表达,失活FAK信号通路,且过表达FAK可逆转和厚朴酚联合THBS2对siha细胞的增殖、迁移和侵袭抑制作用。结论和厚朴酚可抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与上调THBS2失活FAK信号通路有关,将可为和厚朴酚用于治疗宫颈癌奠定理论基础。
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关键词
和厚朴酚
THBS2
FAK信号通路
宫颈癌
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职称材料
miR-136-5p靶向MIEN1对宫颈癌细胞侵袭和迁移的调节及机制研究
被引量:
9
4
作者
姚慧欣
王钧峰
+2 位作者
吴金涛
李会影
孙喆
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期362-368,共7页
目的探究miR-136-5p通过靶向作用迁移侵袭增强因子(MIEN1),对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法收集宫颈癌石蜡包埋组织块及癌旁组织20例,RT-PCR检测MIEN1和miR-136-5p基因表达水平并分析MIEN1和miR-136-5p基因表达的相关...
目的探究miR-136-5p通过靶向作用迁移侵袭增强因子(MIEN1),对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法收集宫颈癌石蜡包埋组织块及癌旁组织20例,RT-PCR检测MIEN1和miR-136-5p基因表达水平并分析MIEN1和miR-136-5p基因表达的相关性。荧光素酶报告基因实验检测miR-136-5p和MIEN1的相互作用。宫颈癌细胞SiHa分为SiHa、miR-136-5p mimic、pC-MIEN1和pC-MIEN1+miR-136-5p组,转染相应的miRNA或载体,划痕法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blotting检测MIEN1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、Twist、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果与正常组织比较,宫颈癌组织中MIEN1基因表达明显升高(2.27±0.67,P<0.01),miR-136-5p表达明显降低(0.35±0.13,P<0.01),且MIEN1和miR-136-5p表达水平呈负相关(r=-0.771,P<0.01)。在荧光素酶报告实验中,与MIEN1 WT+mimic NC组比较,MIEN1 WT+miR-136-5p mimic组荧光素酶活性明显降低(0.34±0.05,P<0.01)。在细胞实验中,与SiHa组比较,miR-136-5p mimic组MIEN1(0.22±0.03)、N-cadherin(0.13±0.03)、Twist(0.19±0.03)、MMP-9(0.14±0.03)、NF-κB p65(0.28±0.04)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.15±0.03)明显降低,E-cadherin(0.82±0.09)蛋白表达明显升高(P<0.01),并且细胞迁移[(23.0±5.1)%]和侵袭能力(42±5)明显降低(P<0.01);pC-MIEN1组MIEN1(1.06±0.09)、N-cadherin(0.59±0.07)、Twist(0.76±0.08)、MMP-9(0.72±0.08)、NF-κB p65(1.48±0.13)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.56±0.06)明显升高,E-cadherin(0.17±0.03)蛋白表达明显降低(P<0.01),并且,细胞迁移[(81.5±9.0)%]和侵袭能力(228±19)明显升高(P<0.01);与pC-MIEN1组比较,pC-MIEN1+miR-136-5p组MIEN1(0.53±0.06)、N-cadherin(0.31±0.04)、Twist(0.36±0.05)、MMP-9(0.40±0.06)、NF-κB p65(0.89±0.11)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.33±0.06)明显降低(P<0.01),E-cadherin(0.67±0.09)蛋白表达明显升高(P<0.01),并且细胞迁移[(52.0±7.5)%]和侵袭能力(97±11)明显降低(P<0.01)。结论miR-136-5p可通过靶向作用于MIEN1抑制宫颈癌细胞的侵袭和迁移,其机制可能与抑制AKT/NF-κB信号通路有关。
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关键词
宫颈癌
miR-136-5p
迁移侵袭增强因子1
迁移
侵袭
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职称材料
题名
环状RNA_PLEKHM3通过miR-320/KLF4轴调控宫颈癌细胞上皮间质转化
被引量:
2
1
作者
张亚男
崔莹
王天娇
杜忠蕾
机构
牡丹江
医学院
附属
红旗
医院
妇产科
妇科病区
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024年第3期403-412,共10页
基金
黑龙江省卫生健康委科研项目(编号:2020-408)。
文摘
目的探讨环状RNA含普列克底物蛋白同源域的家族M3成员(PLEKHM3)(circRNA_PLEKHM3)通过调控微小RNA-320(miR-320)/畸变样因子4(KLF4)轴在宫颈癌细胞上皮间质转化(EMT)行为中的作用与机制。方法采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测宫颈癌细胞Hela和CaSki中circRNA_PLEKHM3的表达水平;RNA荧光原位杂交检测circRNA_PLEKHM3在人宫颈癌上皮细胞CaSki中的定位;双荧光素酶报告基因实验检测circRNA_PLEKHM3和miR-320的靶向关系,以及miR-320和KLF4的靶向关系;对CaSki细胞过表达circRNA_PLEKHM3;另外设置三组,分别为在过表达circRNA_PLEKHM3的基础上过表达miR-320、沉默KLF4,以及在过表达miR-320的基础上沉默KLF4。qRT-PCR检测CaSki中miR-320的表达水平;Western blot检测CaSki细胞中KLF4和EMT标志物上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达;Transwell实验检测细胞迁移数和侵袭细胞数。结果circRNA_PLEKHM3在Hela和CaSki中的表达均降低(P<0.05),其主要定位在细胞质中;双荧光素酶报告基因实验显示miR-320和circRNA_PLEKHM3存在靶向关系,KLF4和miR-320存在靶向关系;过表达circRNA_PLEKHM3抑制miR-320和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9的蛋白表达,上调E-cadherin的蛋白表达,减少细胞迁移和侵袭数(P<0.05);在过表达circRNA_PLEKHM3的基础上过表达miR-320或沉默KLF4均能够促进miR-320和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达,上调E-cadherin蛋白的表达,减少迁移和侵袭细胞数(P<0.05);然而在过表达miR-320的基础上沉默KLF4,KLF4和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达受到抑制,E-cadherin蛋白的表达上调,细胞迁移和侵袭数减少(P<0.05)。结论circRNA_PLEKHM3过表达可能通过miR-320/KLF4轴调控宫颈癌细胞的EMT。
关键词
cirRNA_PLEKHM3
miRNA-320
畸变样因子4
宫颈癌细胞
上皮间质转化
迁移
侵袭
Keywords
circular RNA_PLEKHM3
miRNA-320
krüppel-like factor 4
cervical cancer cells
epithelial-mesenchymal transition
migration
invasion
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
卵巢癌患者大网膜切除的临床病理分析
被引量:
2
2
作者
缪智辉
殷平
王玉梅
张际菲
机构
牡丹江医学院附属医院妇产科
牡丹江
医学院
病理教研室
出处
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第11期871-872,共2页
关键词
卵巢癌
大网膜切除
肿瘤细胞减灭术
肿瘤转移
分类号
R737.31 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
和厚朴酚抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制
被引量:
8
3
作者
陈佳权
赵欢
武晓萌
尹洪丽
艾恒玲
机构
牡丹江
医学院
附属
第二
医院
妇产科
牡丹江
医学院
附属
第二
医院
药剂科
上海市徐汇区中心
医院
妇科
出处
《中成药》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期214-218,共5页
基金
牡丹江市科学技术计划项目合同书(Z2017s0048)。
文摘
目的探讨和厚朴酚抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法采用MTT法、Transwell法,检测和厚朴酚(5、10、15μg/mL)治疗的宫颈癌细胞的抑制率和迁移侵袭。将pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-THBS2组(转染pcDNA-THBS2)、honokiol+pcDNA组(转染pcDNA并用honokiol处理)、honokiol+pcDNA-FAK组(转染pcDNAFAK并用honokiol处理),转染至siha细胞,Western blot检测细胞中THBS2、MMP-9的蛋白表达。结果与对照组比较,和厚朴酚(5、10、15μg/mL)治疗的siha细胞中细胞增殖、迁移和侵袭均明显降低,MMP-9、THBS2表达均明显升高;过表达THBS2具有与和厚朴酚相同的抑制siha细胞增殖、迁移和侵袭的作用;和厚朴酚、过表达THBS2均可明显的下调siha细胞中的FAK信号通路中FAK的表达,失活FAK信号通路,且过表达FAK可逆转和厚朴酚联合THBS2对siha细胞的增殖、迁移和侵袭抑制作用。结论和厚朴酚可抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与上调THBS2失活FAK信号通路有关,将可为和厚朴酚用于治疗宫颈癌奠定理论基础。
关键词
和厚朴酚
THBS2
FAK信号通路
宫颈癌
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
miR-136-5p靶向MIEN1对宫颈癌细胞侵袭和迁移的调节及机制研究
被引量:
9
4
作者
姚慧欣
王钧峰
吴金涛
李会影
孙喆
机构
牡丹江
医学院
附属
红旗
医院
医务科
牡丹江
医学院
附属
红旗
医院
骨外科
牡丹江
医学院
附属
红旗
医院
妇产科
牡丹江
医学院
附属
红旗
医院
医疗保险科
出处
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期362-368,共7页
基金
黑龙江省卫生计生委科研课题(No.2018335)。
文摘
目的探究miR-136-5p通过靶向作用迁移侵袭增强因子(MIEN1),对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法收集宫颈癌石蜡包埋组织块及癌旁组织20例,RT-PCR检测MIEN1和miR-136-5p基因表达水平并分析MIEN1和miR-136-5p基因表达的相关性。荧光素酶报告基因实验检测miR-136-5p和MIEN1的相互作用。宫颈癌细胞SiHa分为SiHa、miR-136-5p mimic、pC-MIEN1和pC-MIEN1+miR-136-5p组,转染相应的miRNA或载体,划痕法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blotting检测MIEN1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、Twist、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果与正常组织比较,宫颈癌组织中MIEN1基因表达明显升高(2.27±0.67,P<0.01),miR-136-5p表达明显降低(0.35±0.13,P<0.01),且MIEN1和miR-136-5p表达水平呈负相关(r=-0.771,P<0.01)。在荧光素酶报告实验中,与MIEN1 WT+mimic NC组比较,MIEN1 WT+miR-136-5p mimic组荧光素酶活性明显降低(0.34±0.05,P<0.01)。在细胞实验中,与SiHa组比较,miR-136-5p mimic组MIEN1(0.22±0.03)、N-cadherin(0.13±0.03)、Twist(0.19±0.03)、MMP-9(0.14±0.03)、NF-κB p65(0.28±0.04)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.15±0.03)明显降低,E-cadherin(0.82±0.09)蛋白表达明显升高(P<0.01),并且细胞迁移[(23.0±5.1)%]和侵袭能力(42±5)明显降低(P<0.01);pC-MIEN1组MIEN1(1.06±0.09)、N-cadherin(0.59±0.07)、Twist(0.76±0.08)、MMP-9(0.72±0.08)、NF-κB p65(1.48±0.13)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.56±0.06)明显升高,E-cadherin(0.17±0.03)蛋白表达明显降低(P<0.01),并且,细胞迁移[(81.5±9.0)%]和侵袭能力(228±19)明显升高(P<0.01);与pC-MIEN1组比较,pC-MIEN1+miR-136-5p组MIEN1(0.53±0.06)、N-cadherin(0.31±0.04)、Twist(0.36±0.05)、MMP-9(0.40±0.06)、NF-κB p65(0.89±0.11)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.33±0.06)明显降低(P<0.01),E-cadherin(0.67±0.09)蛋白表达明显升高(P<0.01),并且细胞迁移[(52.0±7.5)%]和侵袭能力(97±11)明显降低(P<0.01)。结论miR-136-5p可通过靶向作用于MIEN1抑制宫颈癌细胞的侵袭和迁移,其机制可能与抑制AKT/NF-κB信号通路有关。
关键词
宫颈癌
miR-136-5p
迁移侵袭增强因子1
迁移
侵袭
Keywords
cervical cancer
miR-136-5p
migration and invasion enhancer 1
migration
invasion
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
环状RNA_PLEKHM3通过miR-320/KLF4轴调控宫颈癌细胞上皮间质转化
张亚男
崔莹
王天娇
杜忠蕾
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2024
2
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职称材料
2
卵巢癌患者大网膜切除的临床病理分析
缪智辉
殷平
王玉梅
张际菲
《中国肿瘤临床》
CAS
CSCD
北大核心
2001
2
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职称材料
3
和厚朴酚抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制
陈佳权
赵欢
武晓萌
尹洪丽
艾恒玲
《中成药》
CAS
CSCD
北大核心
2021
8
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4
miR-136-5p靶向MIEN1对宫颈癌细胞侵袭和迁移的调节及机制研究
姚慧欣
王钧峰
吴金涛
李会影
孙喆
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2020
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