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环状RNA_PLEKHM3通过miR-320/KLF4轴调控宫颈癌细胞上皮间质转化 被引量:2
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作者 张亚男 崔莹 +1 位作者 王天娇 杜忠蕾 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期403-412,共10页
目的探讨环状RNA含普列克底物蛋白同源域的家族M3成员(PLEKHM3)(circRNA_PLEKHM3)通过调控微小RNA-320(miR-320)/畸变样因子4(KLF4)轴在宫颈癌细胞上皮间质转化(EMT)行为中的作用与机制。方法采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测宫颈癌细胞H... 目的探讨环状RNA含普列克底物蛋白同源域的家族M3成员(PLEKHM3)(circRNA_PLEKHM3)通过调控微小RNA-320(miR-320)/畸变样因子4(KLF4)轴在宫颈癌细胞上皮间质转化(EMT)行为中的作用与机制。方法采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测宫颈癌细胞Hela和CaSki中circRNA_PLEKHM3的表达水平;RNA荧光原位杂交检测circRNA_PLEKHM3在人宫颈癌上皮细胞CaSki中的定位;双荧光素酶报告基因实验检测circRNA_PLEKHM3和miR-320的靶向关系,以及miR-320和KLF4的靶向关系;对CaSki细胞过表达circRNA_PLEKHM3;另外设置三组,分别为在过表达circRNA_PLEKHM3的基础上过表达miR-320、沉默KLF4,以及在过表达miR-320的基础上沉默KLF4。qRT-PCR检测CaSki中miR-320的表达水平;Western blot检测CaSki细胞中KLF4和EMT标志物上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达;Transwell实验检测细胞迁移数和侵袭细胞数。结果circRNA_PLEKHM3在Hela和CaSki中的表达均降低(P<0.05),其主要定位在细胞质中;双荧光素酶报告基因实验显示miR-320和circRNA_PLEKHM3存在靶向关系,KLF4和miR-320存在靶向关系;过表达circRNA_PLEKHM3抑制miR-320和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9的蛋白表达,上调E-cadherin的蛋白表达,减少细胞迁移和侵袭数(P<0.05);在过表达circRNA_PLEKHM3的基础上过表达miR-320或沉默KLF4均能够促进miR-320和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达,上调E-cadherin蛋白的表达,减少迁移和侵袭细胞数(P<0.05);然而在过表达miR-320的基础上沉默KLF4,KLF4和N-cadherin、Vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达受到抑制,E-cadherin蛋白的表达上调,细胞迁移和侵袭数减少(P<0.05)。结论circRNA_PLEKHM3过表达可能通过miR-320/KLF4轴调控宫颈癌细胞的EMT。 展开更多
关键词 cirRNA_PLEKHM3 miRNA-320 畸变样因子4 宫颈癌细胞 上皮间质转化 迁移 侵袭
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卵巢癌患者大网膜切除的临床病理分析 被引量:2
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作者 缪智辉 殷平 +1 位作者 王玉梅 张际菲 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期871-872,共2页
关键词 卵巢癌 大网膜切除 肿瘤细胞减灭术 肿瘤转移
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和厚朴酚抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制 被引量:8
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作者 陈佳权 赵欢 +2 位作者 武晓萌 尹洪丽 艾恒玲 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期214-218,共5页
目的探讨和厚朴酚抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法采用MTT法、Transwell法,检测和厚朴酚(5、10、15μg/mL)治疗的宫颈癌细胞的抑制率和迁移侵袭。将pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-THBS2组(转染pcDNA-THBS2)、honokiol+pcDNA组... 目的探讨和厚朴酚抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制。方法采用MTT法、Transwell法,检测和厚朴酚(5、10、15μg/mL)治疗的宫颈癌细胞的抑制率和迁移侵袭。将pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-THBS2组(转染pcDNA-THBS2)、honokiol+pcDNA组(转染pcDNA并用honokiol处理)、honokiol+pcDNA-FAK组(转染pcDNAFAK并用honokiol处理),转染至siha细胞,Western blot检测细胞中THBS2、MMP-9的蛋白表达。结果与对照组比较,和厚朴酚(5、10、15μg/mL)治疗的siha细胞中细胞增殖、迁移和侵袭均明显降低,MMP-9、THBS2表达均明显升高;过表达THBS2具有与和厚朴酚相同的抑制siha细胞增殖、迁移和侵袭的作用;和厚朴酚、过表达THBS2均可明显的下调siha细胞中的FAK信号通路中FAK的表达,失活FAK信号通路,且过表达FAK可逆转和厚朴酚联合THBS2对siha细胞的增殖、迁移和侵袭抑制作用。结论和厚朴酚可抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与上调THBS2失活FAK信号通路有关,将可为和厚朴酚用于治疗宫颈癌奠定理论基础。 展开更多
关键词 和厚朴酚 THBS2 FAK信号通路 宫颈癌
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miR-136-5p靶向MIEN1对宫颈癌细胞侵袭和迁移的调节及机制研究 被引量:9
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作者 姚慧欣 王钧峰 +2 位作者 吴金涛 李会影 孙喆 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期362-368,共7页
目的探究miR-136-5p通过靶向作用迁移侵袭增强因子(MIEN1),对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法收集宫颈癌石蜡包埋组织块及癌旁组织20例,RT-PCR检测MIEN1和miR-136-5p基因表达水平并分析MIEN1和miR-136-5p基因表达的相关... 目的探究miR-136-5p通过靶向作用迁移侵袭增强因子(MIEN1),对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法收集宫颈癌石蜡包埋组织块及癌旁组织20例,RT-PCR检测MIEN1和miR-136-5p基因表达水平并分析MIEN1和miR-136-5p基因表达的相关性。荧光素酶报告基因实验检测miR-136-5p和MIEN1的相互作用。宫颈癌细胞SiHa分为SiHa、miR-136-5p mimic、pC-MIEN1和pC-MIEN1+miR-136-5p组,转染相应的miRNA或载体,划痕法检测细胞迁移,Transwell法检测细胞侵袭,Western blotting检测MIEN1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、Twist、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果与正常组织比较,宫颈癌组织中MIEN1基因表达明显升高(2.27±0.67,P<0.01),miR-136-5p表达明显降低(0.35±0.13,P<0.01),且MIEN1和miR-136-5p表达水平呈负相关(r=-0.771,P<0.01)。在荧光素酶报告实验中,与MIEN1 WT+mimic NC组比较,MIEN1 WT+miR-136-5p mimic组荧光素酶活性明显降低(0.34±0.05,P<0.01)。在细胞实验中,与SiHa组比较,miR-136-5p mimic组MIEN1(0.22±0.03)、N-cadherin(0.13±0.03)、Twist(0.19±0.03)、MMP-9(0.14±0.03)、NF-κB p65(0.28±0.04)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.15±0.03)明显降低,E-cadherin(0.82±0.09)蛋白表达明显升高(P<0.01),并且细胞迁移[(23.0±5.1)%]和侵袭能力(42±5)明显降低(P<0.01);pC-MIEN1组MIEN1(1.06±0.09)、N-cadherin(0.59±0.07)、Twist(0.76±0.08)、MMP-9(0.72±0.08)、NF-κB p65(1.48±0.13)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.56±0.06)明显升高,E-cadherin(0.17±0.03)蛋白表达明显降低(P<0.01),并且,细胞迁移[(81.5±9.0)%]和侵袭能力(228±19)明显升高(P<0.01);与pC-MIEN1组比较,pC-MIEN1+miR-136-5p组MIEN1(0.53±0.06)、N-cadherin(0.31±0.04)、Twist(0.36±0.05)、MMP-9(0.40±0.06)、NF-κB p65(0.89±0.11)蛋白表达水平及p-AKT/AKT比率(0.33±0.06)明显降低(P<0.01),E-cadherin(0.67±0.09)蛋白表达明显升高(P<0.01),并且细胞迁移[(52.0±7.5)%]和侵袭能力(97±11)明显降低(P<0.01)。结论miR-136-5p可通过靶向作用于MIEN1抑制宫颈癌细胞的侵袭和迁移,其机制可能与抑制AKT/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 miR-136-5p 迁移侵袭增强因子1 迁移 侵袭
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