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HSV-1糖蛋白B和糖蛋白D重组抗原表位串联疫苗的构建及免疫保护作用研究
1
作者
刘雨轩
董晓鸣
+2 位作者
杨吉琨
张劲松
王静
《国际眼科杂志》
2025年第4期530-536,共7页
目的:构建1型单纯疱疹病毒(HSV-1)糖蛋白B(gB)和糖蛋白D(gD)重组抗原表位核酸疫苗,并进一步研究该疫苗在动物模型中的免疫保护作用及组织表达。方法:筛选HSV-1的gB、gD表位基因进行串联,构建重组蛋白编码基因X,并转入原核表达载体PET28(...
目的:构建1型单纯疱疹病毒(HSV-1)糖蛋白B(gB)和糖蛋白D(gD)重组抗原表位核酸疫苗,并进一步研究该疫苗在动物模型中的免疫保护作用及组织表达。方法:筛选HSV-1的gB、gD表位基因进行串联,构建重组蛋白编码基因X,并转入原核表达载体PET28(a),利用重组蛋白制备单克隆抗体,免疫新西兰大白兔心脏采血分离血清检测纯化蛋白的免疫原性及血清中的多克隆抗体并获取血清抗体效价。构建真核表达载体pcDNA3.1-X,并采取肌肉注射的方式对4-6 wk BALB/c雌性小鼠进行3针免疫程序,ELISA实验法检测血清中抗体及免疫相关的细胞因子,免疫组化检测小鼠眼球、三叉神经节和脑组织中蛋白X的表达。结果:重组蛋白X免疫大兔后,在兔血清中检测到目的多克隆抗体,血清抗体的效价为1∶3200。小鼠免疫真核重组质粒pcDNA3.1-X后,血清中检测到了实验组的HSV-1 IgM抗体含量为12.13±0.85 ng/L,显著高于载体对照组(0.49±0.44 ng/L)(t=21.07,P<0.001)。实验组细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的含量分别为11.63±0.60、22.65±1.47、85.75±14.12、114.90±6.39 ng/L,均显著高于载体对照组和空白对照组(均P<0.05)。免疫组织化学染色法表明实验组眼球、三叉神经节和脑组织中均发现目的蛋白X的表达。结论:本研究成功构建了HSV-1 gB和gD串联表位核酸疫苗,能够诱导机体产生较强的免疫应答,并能在眼球、三叉神经节和脑组织中稳定表达,具有较强的免疫原性,为HSV-1重组抗原表位串联疫苗的研制提供了基础数据。
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关键词
1型单纯疱疹病毒(HSV-1)
核酸疫苗
糖蛋白B
糖蛋白D
抗体
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职称材料
题名
HSV-1糖蛋白B和糖蛋白D重组抗原表位串联疫苗的构建及免疫保护作用研究
1
作者
刘雨轩
董晓鸣
杨吉琨
张劲松
王静
机构
爱尔集团眼科医院集团白内障与人工晶状体研究所
沈阳
爱尔
眼科
精准医疗
研究所
辽宁
爱尔
眼科
医院
沈阳
爱尔
卓越
眼科
医院
中南大学
爱尔
眼科
学院
出处
《国际眼科杂志》
2025年第4期530-536,共7页
基金
湖南省自然科学基金项目(No.2021JJ40003)
湖南省湘江公益基金项目(No.KY24003)
+2 种基金
沈阳市科学技术计划公共卫生研发专项(No.21-173-9-12)
沈阳市青年科技创新人才支持计划项目(No.RC210388)
爱尔眼科医院集团临床研究所科研基金项目(No.AR2202D1)。
文摘
目的:构建1型单纯疱疹病毒(HSV-1)糖蛋白B(gB)和糖蛋白D(gD)重组抗原表位核酸疫苗,并进一步研究该疫苗在动物模型中的免疫保护作用及组织表达。方法:筛选HSV-1的gB、gD表位基因进行串联,构建重组蛋白编码基因X,并转入原核表达载体PET28(a),利用重组蛋白制备单克隆抗体,免疫新西兰大白兔心脏采血分离血清检测纯化蛋白的免疫原性及血清中的多克隆抗体并获取血清抗体效价。构建真核表达载体pcDNA3.1-X,并采取肌肉注射的方式对4-6 wk BALB/c雌性小鼠进行3针免疫程序,ELISA实验法检测血清中抗体及免疫相关的细胞因子,免疫组化检测小鼠眼球、三叉神经节和脑组织中蛋白X的表达。结果:重组蛋白X免疫大兔后,在兔血清中检测到目的多克隆抗体,血清抗体的效价为1∶3200。小鼠免疫真核重组质粒pcDNA3.1-X后,血清中检测到了实验组的HSV-1 IgM抗体含量为12.13±0.85 ng/L,显著高于载体对照组(0.49±0.44 ng/L)(t=21.07,P<0.001)。实验组细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的含量分别为11.63±0.60、22.65±1.47、85.75±14.12、114.90±6.39 ng/L,均显著高于载体对照组和空白对照组(均P<0.05)。免疫组织化学染色法表明实验组眼球、三叉神经节和脑组织中均发现目的蛋白X的表达。结论:本研究成功构建了HSV-1 gB和gD串联表位核酸疫苗,能够诱导机体产生较强的免疫应答,并能在眼球、三叉神经节和脑组织中稳定表达,具有较强的免疫原性,为HSV-1重组抗原表位串联疫苗的研制提供了基础数据。
关键词
1型单纯疱疹病毒(HSV-1)
核酸疫苗
糖蛋白B
糖蛋白D
抗体
Keywords
herpes simplex virus type 1(HSV-1)
nucleic acid vaccine
glycoprotein B
glycoprotein D
antibody
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
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1
HSV-1糖蛋白B和糖蛋白D重组抗原表位串联疫苗的构建及免疫保护作用研究
刘雨轩
董晓鸣
杨吉琨
张劲松
王静
《国际眼科杂志》
2025
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