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题名枸杞提取物对视神经挤压损伤后小鼠视网膜的保护作用
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作者
李洪英
谷景义
黎永桁
陈建苏
唐仕波
苏国辉
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机构
暨南大学基础医学与公共卫生学院
爱尔眼科医院集团股份有限公司湖南省院士专家工作站
长沙爱尔眼科研究所
暨南大学粤港澳中枢神经再生研究院
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出处
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
北大核心
2024年第6期559-572,共14页
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基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(81501091)。
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文摘
目的:探讨来自宁夏的枸杞提取物(Lycium Barbarum extracts,LBE)对视神经挤压损伤(optic nerve crush,ONC)后小鼠视网膜结构和功能的保护作用。方法:首先比较健康组、2 d模型组和7 d模型组中闪光视网膜电图(flash electroretiongram,fERG)和视网膜结构的改变;然后比较腹腔注射磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)组及不同剂量的LBE对造模7 d的ONC小鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活的影响;最后利用LBE最佳保护作用的剂量,与PBS对照组比较,进一步研究LBE对ONC手术7 d小鼠视网膜fERG和结构的影响。RGCs计数利用视网膜平铺片进行免疫荧光染色(immunofluorescence,IF)标记,视网膜冰冻切片用于IF染色标记双极细胞、视锥细胞、突触小泡蛋白(synaptophysin,SYN)和突触后致密蛋白95(postsynaptic density protein 95,PSD95),二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)标记视网膜产生的活性氧化产物(reactive oxygen species,ROS)。用ImageJ软件计数RGCs、双极细胞和视锥细胞的数目,测量双极细胞突起在内丛层(inner plexiform layer,IPL)所占荧光阳性面积百分比(percentage of the fluorescence-positive area,PP)、SYN在IPL和外丛层(outer plexiform layer,OPL)的免疫反应荧光强度(fluorescence intensity,FI)和PSD95在OPL的FI及PP,计算ROS反应后的红色FI。结果:与正常组和ONC-2 d组相比,ONC-7 d后存活的RGCs数目、双极细胞突起在IPL所占PP、双极细胞数目、视锥细胞数目、SYN在IPL和OPL的FI强度减少(P<0.05);PSD95在OPL层PP减少(P<0.05);fERG显示a波和b波的波幅在暗适应(P<0.01)和明适应下(P<0.05)减少,二者的潜伏期没有明显变化(P>0.05);DHE染色显示ROS在术后明显增加(P<0.01)。与对照组相比,上述不同剂量的LBE经腹腔注射到小鼠体内,均可使RGCs存活增加(P<0.01),其中1.0 mg/kg LBE组存活的RGCs均数最大(P<0.01);此外,1.0 mg/kg LBE腹腔注射可以增加双极细胞突起所占IPL层PP和细胞数目(P<0.05)、视锥细胞数目(P<0.01)、SYN在IPL(P<0.01)及在OPL(P<0.05)的FI、PSD95在OPL表达的FI及PP(P<0.05)、a波和b波暗适应(P<0.05)和明适应时(P<0.01)的幅值,降低ROS产生(P<0.05)。结论:LBE对小鼠ONC后视网膜的结构和功能具有保护作用,其保护作用可能与其抑制视网膜的氧化应激反应有关。
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关键词
枸杞提取物
视神经损伤
视网膜
氧化应激
闪光视网膜电图
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Keywords
Lycium Barbarum extracts
optic nerve injury
retina
oxidative stress
flash electroretiongram
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分类号
R774.6
[医药卫生—眼科]
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