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静态压力对大鼠视网膜微血管内皮细胞内皮素-1和NO表达的影响被引量：6: 1; 作者郭斌王应利 +2 位作者牛超惠延年范钦华《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第2期140-144,共5页; 目的观察静态压力变化对大鼠视网膜微血管内皮细胞(RMECs)形态、增生活性及分泌血管活性物质内皮素-1(ET-1)和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法体外培养并鉴定大鼠RMECs,分为A(1.33kPa)、B(2.67kPa)、C(5.33kPa)和D(10.67kPa)组和未加压... 展开更多; 关键词视网膜微血管内皮细胞内皮素-1 一氧化氮静态压力青光眼; 在线阅读下载PDF 职称材料

糖基化终产物诱导视网膜微血管内皮细胞VEGF和ZO-1 mRNA合成的变化被引量：2: 2; 作者郭斌王应利 +2 位作者牛超惠延年范钦华《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第1期21-26,共6页; 目的观察糖基化终产物(advanced glycosylation end products,AGEs)作用下,大鼠视网膜微血管内皮细胞(rat retinal microvascular endothelial cells,rRMEC)的增生和活力的变化,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VE... 展开更多; 关键词视网膜微血管内皮细胞糖基化终产物血管内皮生长因子紧密连接蛋白-1 大鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

周细胞对缺氧诱导下视网膜微血管内皮细胞增生的影响: 3; 作者王应利郭斌 +3 位作者惠延年郭纯刚李冬凌宇《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第12期1144-1149,共6页; 目的探讨视网膜微血管内皮细胞(RMECs)与共培养的周细胞(PCs)及PCs条件培养液(PCM)对常氧和缺氧条件下RMECs增生的影响。方法传代培养大鼠RMECs和PCs,采用兔抗鼠Ⅷ因子多克隆抗体和小鼠抗大鼠CD31单克隆抗体免疫组织化学法鉴定RMECs,PC... 展开更多; 关键词周细胞视网膜微血管内皮细胞共培养增生缺氧; 在线阅读下载PDF 职称材料

Brn-2在人脉络膜黑色素瘤细胞系中的表达及其对MART-1基因启动子活性的影响: 4; 作者王应利周玉梅 +2 位作者陶俊靳扬扬陈冉《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第9期837-841,共5页; 目的探讨黑色素抗原转录子Brn-2在人脉络膜黑色素瘤细胞系中的表达及其对T细胞可识别抗原-1(melanoma antigen recognized by T cells 1,MART-1)启动子活性的影响。方法采用RT-PCR和Western blot检测人脉络膜黑色素瘤细胞系92-1、92-2、... 展开更多; 关键词 Brn-2 MART-1基因启动子脉络膜黑色素瘤细胞系; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名静态压力对大鼠视网膜微血管内皮细胞内皮素-1和NO表达的影响被引量：6: 1; 作者郭斌王应利牛超惠延年范钦华; 机构南京市八一医院眼科北京市煤炭总医院眼科河南省眼科研究所西安市西京医院眼科; 出处《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第2期140-144,共5页; 文摘目的观察静态压力变化对大鼠视网膜微血管内皮细胞(RMECs)形态、增生活性及分泌血管活性物质内皮素-1(ET-1)和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法体外培养并鉴定大鼠RMECs,分为A(1.33kPa)、B(2.67kPa)、C(5.33kPa)和D(10.67kPa)组和未加压对照组。用倒置相差显微镜观察细胞形态的变化,常规方法进行细胞计数,锥虫蓝染色检测活细胞比例。用Griess硝酸还原酶法检测NO代谢产物NO2-/NO3-的含量,放射免疫法检测培养细胞的ET-1蛋白表达;用RT-PCR法半定量研究RMECs中ET-1、eNOS、iNOSmRNA的表达。结果B、C、D组RMECs细胞核膨大,胞体拉长,可见少量悬浮细胞;静态压力促进RMECs增生(F=12.205,P<0.01),C组和D组细胞数量高于对照组、A组和B组(P<0.01);静态压力升高造成各组细胞损伤,拒染率降低(F=11.180,P<0.01),B、C、D组细胞拒染率低于对照组(P<0.05)。B、C、D组ET-1浓度较对照组增加(P<0.01)。C组和D组RMECs培养液中NO2-/NO3-浓度高于对照组(P<0.01)。B、C、D组RMECs中ET-1mRNA表达较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01);C组和D组RMECs中eNOSmRNA和iNOSmRNA表达较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论高静态压力可直接导致RMECs的结构损伤,高静态压力下RMECs合成ET-1、NO增多可能是高眼压眼底病变的机制之一。; 关键词视网膜微血管内皮细胞内皮素-1 一氧化氮静态压力青光眼; Keywords retinal microvascular endothelial cell endothelin-1 nitric oxide static pressure glaucoma; 分类号 R774.1 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名糖基化终产物诱导视网膜微血管内皮细胞VEGF和ZO-1 mRNA合成的变化被引量：2: 2; 作者郭斌王应利牛超惠延年范钦华; 机构解放军第北京市煤炭总医院眼科河南省眼科研究所第四军医大学西京医院眼科; 出处《眼科新进展》 CAS 北大核心 2009年第1期21-26,共6页; 文摘目的观察糖基化终产物(advanced glycosylation end products,AGEs)作用下,大鼠视网膜微血管内皮细胞(rat retinal microvascular endothelial cells,rRMEC)的增生和活力的变化,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)合成和紧密链接蛋白-1(zonula occludens protein-1,ZO-1)mRNA合成的变化。方法采用免疫磁珠法分离培养rRMEC,0mg·L-1、10mg·L-1、100mg·L-1和600mg·L-1糖基化牛血清白蛋白(AGE-bovine serum albumin,AGE-BSA)作用rRMEC,观察4d内细胞增生变化,并采用台盼蓝染色法测定细胞活力。不同浓度的AGE-BSA(0mg·L-1、10mg·L-1、50mg·L-1、100mg·L-1、200mg·L-1、400mg·L-1、600mg·L-1)作用12h,100mg·L-1的AGE-BSA作用不同时间(0h、2h、4h、6h、12h、24h)后,采用RT-PCR和Elisa测定rRMEC中VEGFmRNA、ZO-1mRNA和上清中VEGF含量。结果rRMEC在0mg·L-1、10mg·L-1和100mg·L-1AGE-BSA环境中可以继续增生,600mg·L-1细胞增生可能受到抑制,造成rRMEC活力降低。在浓度为10～400mg·L-1AGE-BSA作用12h时,VEGFmRNA合成增强,上清液中VEGF蛋白表达升高;在100mg·L-1AGE-BSA作用2～24h,VEGFmRNA合成首先升高,后降低并趋于稳定;作用后各组均高于作用前(P<0.01),上清液中VEGF蛋白表达随时间延长逐渐增加。随AGE-BSA浓度的增加,ZO-1mRNA逐渐降低;随AGE-BSA作用时间的延长,ZO-1mRNA逐渐降低。结论在一定范围内,VEGFmRNA和ZO-1mRNA合成呈AGE-BSA剂量和时间依赖性。VEGF可能是促进rRMECZO-1mRNA合成降低的重要因素之一。; 关键词视网膜微血管内皮细胞糖基化终产物血管内皮生长因子紧密连接蛋白-1 大鼠; Keywords retinal-microvascular endothelial cells advanced glycosylation end products vascular endothelial growth factor zonula occludens protein-1 rat; 分类号 Q959.836 [生物学—动物学] R774.1 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名周细胞对缺氧诱导下视网膜微血管内皮细胞增生的影响: 3; 作者王应利郭斌惠延年郭纯刚李冬凌宇; 机构煤炭总医院眼科解放军第第四军医大学西京医院眼科; 出处《眼科研究》 CSCD 北大核心 2010年第12期1144-1149,共6页; 文摘目的探讨视网膜微血管内皮细胞(RMECs)与共培养的周细胞(PCs)及PCs条件培养液(PCM)对常氧和缺氧条件下RMECs增生的影响。方法传代培养大鼠RMECs和PCs,采用兔抗鼠Ⅷ因子多克隆抗体和小鼠抗大鼠CD31单克隆抗体免疫组织化学法鉴定RMECs,PCs采用小鼠抗大鼠desmin多克隆抗体和兔抗鼠抗血小板衍生生长因子受体-β(PDGFR-β)进行免疫荧光双标鉴定。Millicell小室建立PCs和RMECs共培养系统,PCs培养近融合期后制备PCM,向共培养系统或PCM中加入终浓度为200μmol/L的CoCl2诱导形成细胞化学缺氧模型,观察常氧和缺氧条件下PCs和PCM对RMECs增生的影响。使用MTT法、3H-TdR掺入法检测RMECs在不同培养条件下的增生数量,并用流式细胞仪检测RMECs在不同细胞周期的细胞率。结果近融合期的RMECs呈类纺锤状、单层生长,可见明显的接触抑制,Ⅷ因子和CD31均阳性表达。PCs形状不规则,细胞重叠生长无接触抑制,PDGFR-β和desmin抗体双标阳性。缺氧3～9d缺氧RMECs单独培养组较常氧RMECs单独培养组各时间点的RMECs均明显增生,缺氧6d时增生达高峰(P<0.01),细胞生长抑制率(GIR)为-24.9%。缺氧共培养组较缺氧RMECs单独培养组RMECs增生下降(P<0.05)。缺氧3、6、9d时常氧共培养组较常氧RMECs单独培养组RMECs数目均明显下降(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。缺氧6d时S期RMECs数量明显增加,占各期细胞总数的(43.9±0.8)%;常氧或缺氧共培养组,PCs均可抑制RMECs的增生,S期细胞分别占各期细胞总数的(3.6±0.1)%、(15.1±0.9)%(P<0.05,P<0.01)。常氧PCM组RMECs的吸光度(A)值和3H-TdR掺入量4～24h均低于对照组(P<0.05)。结论缺氧和常氧条件下RMECs和PCs共培养时PCs均可抑制RMECs的增生,常氧条件下PCM可抑制RMECs的增生。; 关键词周细胞视网膜微血管内皮细胞共培养增生缺氧; Keywords pericyte retinal microvascular endothelial cell co-culture proliferation hypoxia; 分类号 R774.1 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Brn-2在人脉络膜黑色素瘤细胞系中的表达及其对MART-1基因启动子活性的影响: 4; 作者王应利周玉梅陶俊靳扬扬陈冉; 机构煤炭总医院眼科; 出处《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第9期837-841,共5页; 文摘目的探讨黑色素抗原转录子Brn-2在人脉络膜黑色素瘤细胞系中的表达及其对T细胞可识别抗原-1(melanoma antigen recognized by T cells 1,MART-1)启动子活性的影响。方法采用RT-PCR和Western blot检测人脉络膜黑色素瘤细胞系92-1、92-2、Me1285和Ocm3细胞中Brn-2的mRNA和蛋白表达水平。将含不同长度MART-1基因启动子序列和荧光素酶报告基因的表达质粒p GL3-Luc构建成融合表达载体p GL3-p286-Luc及p GL3-p2956-Luc,与p EV-Brn-2融合表达质粒共转染脉络膜黑色素瘤细胞系细胞。分别测量四种细胞系中p286组、p2956组、p286+Brn-2组、p2956+Brn-2组细胞荧光素酶表达变化,并观察Brn-2对上述细胞MART-1基因启动子活性的影响。结果人脉络膜黑色素瘤细胞系92-1、92-2、Me1285、Ocm3细胞系均可检测到Brn-2 mRNA和蛋白的表达,Brn-2蛋白电泳带大致在相对分子质量47 000处。p GL3-p2956-Luc及p GL3-p286-Luc重组质粒经Apa I和Nhe I双酶切可切出2956 bp和286 bp 2个条带,p EV-Brn-2重组质粒经EcoRI和Bam HI双酶切可切出1329 bp条带。p EV-Brn-2重组质粒分别对人脉络膜黑色素瘤细胞系Ocm3、Mel285、92-2、92-1进行磷酸钙法转染,Western blot检测可见四种细胞系均表达Brn-2蛋白。缺乏Brn-2时,所有细胞的MART-1的p286均显示出活性,MART-1阳性细胞系(92-1、92-2、Ocm3)p286活性高于阴性细胞系(Mel285)。p2956活性不同细胞系表现不同,92-1、92-2中较高,Ocm3中其活性与细胞密度相关,MART-1阴性细胞系中p2956近乎无活性。共转染Brn-2后明显下调92-1、92-2、Ocm3中启动子p286及p2956活性(P<0.05);阴性细胞系Mel285中,Brn-2对启动子活性无影响(P>0.05)。结论 Brn-2表达于人脉络膜黑色素瘤细胞,并下调阳性细胞系MART-1启动子活性。; 关键词 Brn-2 MART-1基因启动子脉络膜黑色素瘤细胞系; Keywords Brn-2 MART-1 gene promoter uveal melanoma cell lines; 分类号 R773.4 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	静态压力对大鼠视网膜微血管内皮细胞内皮素-1和NO表达的影响	郭斌王应利牛超惠延年范钦华	《眼科研究》 CSCD 北大核心	2010	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	糖基化终产物诱导视网膜微血管内皮细胞VEGF和ZO-1 mRNA合成的变化	郭斌王应利牛超惠延年范钦华	《眼科新进展》 CAS 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	周细胞对缺氧诱导下视网膜微血管内皮细胞增生的影响	王应利郭斌惠延年郭纯刚李冬凌宇	《眼科研究》 CSCD 北大核心	2010	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	Brn-2在人脉络膜黑色素瘤细胞系中的表达及其对MART-1基因启动子活性的影响	王应利周玉梅陶俊靳扬扬陈冉	《眼科新进展》 CAS 北大核心	2018	0	在线阅读下载PDF 职称材料