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miR-129-5p靶向调节果蝇形态同系物2基因抑制喉鳞癌细胞增殖和诱导凋亡的体外研究
被引量:
2
1
作者
许雨洲
孙占伟
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2019年第12期668-673,共6页
目的探讨miR-129-5p对喉鳞癌细胞增殖、凋亡的调控机制。方法运用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantification polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测人支气管上皮细胞HBE、喉鳞状细胞癌细胞HN4、TU177中miR...
目的探讨miR-129-5p对喉鳞癌细胞增殖、凋亡的调控机制。方法运用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantification polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测人支气管上皮细胞HBE、喉鳞状细胞癌细胞HN4、TU177中miR-129-5p、DIAPH2的表达;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-129-5p组(转染miR-129-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-129-5p组(转染anti-miR-129-5p)、si-NC组(转染si-NC)、si-DIAPH2(果蝇形态同系物2,Drosophila Homologue of Diaphanous2,DIAPH2)组(转染si-DIAPH2)、miR-129-5p+pc DNA组(共转染miR-129-5p和pc DNA)、miR-129-5p+pc DNA-DIAPH2组(共转染miR-129-5p和pc DNA-DIAPH2),用脂质体法转染HN4、TU177细胞;Western blot检测细胞中DIAPH2、细胞周期蛋白依赖激酶1(cyclinD1)、剪切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、剪切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(cleaved-caspase-9)的蛋白表达;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞中miR-129-5p与DIAPH2的结合力。结果与人支气管上皮HBE相比,喉鳞癌细胞HN4、TU177中miR-129-5p表达均显著降低,DIAPH2表达显著升高(P<0.05);过表达miR-129-5p、敲减DIAPH2均可显著抑制HN4、TU177细胞增殖、促进凋亡、下调cyclinD1、上调cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-9;miR-129-5p可抑制野生型DIAPH2细胞的荧光活性,并负向调控DIAPH2的表达;过表达DIAPH2可逆转miR-129-5p对Hep-2细胞的增殖抑制和凋亡促进作用。结论 miR-129-5p可抑制喉鳞状细胞癌的增殖,促进凋亡,其机制可能与靶向DIAPH2相关,将可为miR-129-5p靶向治疗喉鳞状细胞癌提供新的依据。
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关键词
癌
鳞状细胞
细胞增殖
细胞凋亡
体外研究
miR-129-5p
果蝇形态同系物2
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题名
miR-129-5p靶向调节果蝇形态同系物2基因抑制喉鳞癌细胞增殖和诱导凋亡的体外研究
被引量:
2
1
作者
许雨洲
孙占伟
机构
焦作市五官医院耳鼻咽喉头颈外科
河南省人民
医院
耳
鼻
咽喉
头颈
外科
出处
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2019年第12期668-673,共6页
文摘
目的探讨miR-129-5p对喉鳞癌细胞增殖、凋亡的调控机制。方法运用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantification polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测人支气管上皮细胞HBE、喉鳞状细胞癌细胞HN4、TU177中miR-129-5p、DIAPH2的表达;将miR-NC组(转染miR-NC)、miR-129-5p组(转染miR-129-5p mimics)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-129-5p组(转染anti-miR-129-5p)、si-NC组(转染si-NC)、si-DIAPH2(果蝇形态同系物2,Drosophila Homologue of Diaphanous2,DIAPH2)组(转染si-DIAPH2)、miR-129-5p+pc DNA组(共转染miR-129-5p和pc DNA)、miR-129-5p+pc DNA-DIAPH2组(共转染miR-129-5p和pc DNA-DIAPH2),用脂质体法转染HN4、TU177细胞;Western blot检测细胞中DIAPH2、细胞周期蛋白依赖激酶1(cyclinD1)、剪切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、剪切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(cleaved-caspase-9)的蛋白表达;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞中miR-129-5p与DIAPH2的结合力。结果与人支气管上皮HBE相比,喉鳞癌细胞HN4、TU177中miR-129-5p表达均显著降低,DIAPH2表达显著升高(P<0.05);过表达miR-129-5p、敲减DIAPH2均可显著抑制HN4、TU177细胞增殖、促进凋亡、下调cyclinD1、上调cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-9;miR-129-5p可抑制野生型DIAPH2细胞的荧光活性,并负向调控DIAPH2的表达;过表达DIAPH2可逆转miR-129-5p对Hep-2细胞的增殖抑制和凋亡促进作用。结论 miR-129-5p可抑制喉鳞状细胞癌的增殖,促进凋亡,其机制可能与靶向DIAPH2相关,将可为miR-129-5p靶向治疗喉鳞状细胞癌提供新的依据。
关键词
癌
鳞状细胞
细胞增殖
细胞凋亡
体外研究
miR-129-5p
果蝇形态同系物2
Keywords
Carcinoma,Squamous Cell
Cell Proliferation
Apoptosis
In Vitro
miR-129-5p
Drosophila Homologue of Diaphanous2
分类号
R739.65 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
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1
miR-129-5p靶向调节果蝇形态同系物2基因抑制喉鳞癌细胞增殖和诱导凋亡的体外研究
许雨洲
孙占伟
《中国耳鼻咽喉头颈外科》
CSCD
2019
2
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