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细胞外囊泡表征检测方法的对比
1
作者
李莎莎
余飞
刘万卉
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第8期1093-1101,共9页
细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)是细胞主动分泌的具有磷脂双分子层结构的囊泡,天然携带母细胞来源的各种内容物,保留母细胞的生物学特征,可以反映其分泌时的母细胞状态。为了解EVs的生物发生及其在机体内的生物学功能,科学家...
细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)是细胞主动分泌的具有磷脂双分子层结构的囊泡,天然携带母细胞来源的各种内容物,保留母细胞的生物学特征,可以反映其分泌时的母细胞状态。为了解EVs的生物发生及其在机体内的生物学功能,科学家们做了许多尝试,但直接检测EVs有一定的困难,目前的检测技术通常以EVs内容物作为检测对象,实现间接表征的目的。通过分析体液中的EVs,可以实现疾病诊断的目的,对EVs进行详细表征可以推动精准医学的发展。EVs属于内源性物质,可作为递送药物的载体,具有增加药效、降低药物毒理作用和辅助药物通过生物屏障的优势。目前,作为药物或者递送药物的载体应用尚存在的问题,包括(1)EVs内容物的表征,以便使用更明确定义的EVs;(2)开发适合的检测方法来监测体内的EVs,以确定和优化EVs的剂量、给药途径及潜在毒性;(3)确定EVs膜组成的种类及数量。EVs直径为纳米级别,内容物含量少,但临床应用价值大。应用中选择合适的分析技术将能够对EVs类型进行全面表征,并进一步推进对EVs生物学的理解,开发基于EVs的新型诊断和治疗方法,促进其临床转化。本综述介绍了EVs研究中分析技术的原理、应用及优缺点,重点是EVs和EVs中蛋白质的表征检测技术。
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关键词
细胞外囊泡
检测原理
浓度检测
新兴技术
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职称材料
基于代谢组学研究二苯乙烯苷在对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤中的保护作用
被引量:
2
2
作者
高岩
李均童
+2 位作者
吴青林
李林
张兰
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2021年第2期161-166,共6页
目的:通过非靶向代谢组学等研究方法探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene glucoside,TSG)对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)造成急性肝损伤的保护作用。方法:采用随机分组方式将SPF级C57BL/6小鼠分为APAP模型组和TSG干预组,每组15只...
目的:通过非靶向代谢组学等研究方法探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene glucoside,TSG)对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)造成急性肝损伤的保护作用。方法:采用随机分组方式将SPF级C57BL/6小鼠分为APAP模型组和TSG干预组,每组15只。灌胃给予小鼠TSG连续7 d后,一次性腹腔注射APAP进行造模,6 h后取肝脏组织。结果:H&E染色、MDA和SOD检测表明单次APAP注射会造成肝脏损伤,TSG干预会降低肝脏受损程度。代谢产物检测结果显示,与APAP模型组相比,TSG组的ABC转运体、胆碱代谢、中心碳代谢、半乳糖、丙氨酸类氨基酸代谢等变化显著。结论:TSG通过改善脂质过氧化和能量代谢紊乱等过程抵御APAP导致的急性肝损伤。
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关键词
二苯乙烯苷
对乙酰氨基酚
代谢组学
急性肝损伤
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职称材料
Ocotillol及其差向异构体的合成与形成机制
被引量:
1
3
作者
王文智
徐阳荣
+2 位作者
李新利
杨静静
孟庆国
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期282-287,共6页
以20(S)-原人参三醇[20(S)-PPT]为原料,采用两条路线合成ocotillol(3)及其差向异构体(4),并探讨其形成机制。路线1:以m-CPBA氧化20(S)-PPT,制备化合物3和4,收率分别为44.1%和28.6%;路线2:20(S)-PPT经乙酰化、mCPBA氧化和皂化反应,制备...
以20(S)-原人参三醇[20(S)-PPT]为原料,采用两条路线合成ocotillol(3)及其差向异构体(4),并探讨其形成机制。路线1:以m-CPBA氧化20(S)-PPT,制备化合物3和4,收率分别为44.1%和28.6%;路线2:20(S)-PPT经乙酰化、mCPBA氧化和皂化反应,制备化合物3和4,收率分别为16.4%和16.2%。化合物3和4的形成机制推断如下:1)20(S)-PPT的分子内氢键导致C24(25)双键两侧的化学环境不同,两侧被氧化的概率不等,进而得到不等量的化合物3和4;2)20(S)-PPT被乙酰化后,不能形成分子内氢键,C24(25)双键平面两侧的化学环境近乎相同,经m-CPBA氧化反应、分子内SN2反应和皂化反应,最终得到几乎等物质量的化合物3和4。
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关键词
ocotillol
差向异构体
合成
形成机制
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职称材料
基于光谱分析的姜黄素碱性自氧化及其产物的抗氧化活性
4
作者
杨昕
张迪
+3 位作者
宋立敏
许茜
许卉
刘珂
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期1549-1555,共7页
在室温及弱碱性条件下进行姜黄素自氧化反应,应用柱色谱分离、紫外吸收光谱(UV)、红外光谱(IR)、核磁共振波谱(NMR)和质谱(MS)等分析技术,分离并鉴定了主要自氧化产物的化学结构.针对反应进程,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-D...
在室温及弱碱性条件下进行姜黄素自氧化反应,应用柱色谱分离、紫外吸收光谱(UV)、红外光谱(IR)、核磁共振波谱(NMR)和质谱(MS)等分析技术,分离并鉴定了主要自氧化产物的化学结构.针对反应进程,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)分析技术,从底物消除和产物生成2个方面进行了定性及定量研究.以抗坏血酸作阳性对照,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O_2^(-·))体系,定量比较了产物和姜黄素的体外抗氧化活性.结果表明,姜黄素在室温及弱碱性条件下的降解消除以自氧化反应为主,姜黄素消除过程和自氧化产物生成过程均符合一级动力学特征.自氧化产物具有双环乙酰丙酮的骨架结构,并显示有DPPH·,·OH和O_2^(-·)等自由基清除活性,但作用强度均显著低于姜黄素,因此在姜黄素应用过程中应严格控制pH条件,避免发生自氧化反应.
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关键词
姜黄素
自氧化反应
双环乙酰丙酮
抗氧化活性
光谱分析
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职称材料
连翘苷对脂多糖诱导肝脏星状细胞活化的抑制作用
被引量:
12
5
作者
李佳行
杨胜乾
+3 位作者
刘娟娟
罗明明
陈杰
李晓辉
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期342-349,共8页
目的探讨连翘苷对脂多糖诱导肝脏星状细胞活化的抑制作用及其机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,实验分4组:空白对照组、脂多糖(1μg/mL)处理组、1μmol/L连翘苷加脂多糖处理组和10μmol/L连翘苷加脂多糖处理组。采用MTT法检测HSC...
目的探讨连翘苷对脂多糖诱导肝脏星状细胞活化的抑制作用及其机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,实验分4组:空白对照组、脂多糖(1μg/mL)处理组、1μmol/L连翘苷加脂多糖处理组和10μmol/L连翘苷加脂多糖处理组。采用MTT法检测HSC-T6细胞的增殖;Transwell实验分析细胞的迁移;流式细胞仪检测细胞内的ROS水平;ELISA法检测细胞上清中促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的浓度;Western blot分析细胞内α-SMA、NF-κB p65蛋白表达或蛋白磷酸化水平。结果浓度为1100μmol/L连翘苷对HSC-T6细胞的增殖无明显影响。脂多糖可明显促进HSC-T6细胞增殖及迁移,1μmol/L和10μmol/L连翘苷均可显著抑制脂多糖诱导的细胞增殖及迁移,分别降低16.13%、17.14%,48.99%、58.86%。脂多糖处理HSC-T6细胞能明显增加细胞内α-SMA蛋白的表达,而10μmol/L连翘苷处理后,细胞内α-SMA的表达量减少27.33%。1μmol/L和10μmol/L连翘苷对脂多糖诱导细胞内ROS含量(30.03%、51.26%)、促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β(25.16%、39.51%,36.57%、43.75%,58.99%、73.01%)的分泌和NF-κB p65蛋白的磷酸化水平(13.90%、24.96%)也具有显著抑制作用。相关性分析表明:连翘苷处理肝星状细胞后,其降低NF-κB p65磷酸化蛋白表达和对ROS、炎症因子(IL-1β、TNF-α)的作用与其抑制肝星状细胞活化标志物α-SMA蛋白表达的作用呈正相关。结论天然产物连翘苷能够显著抑制脂多糖诱导肝星状细胞的活化,其机制可能与其下调NF-κB信号途径介导的炎症反应有关。
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关键词
连翘苷
脂多糖
肝星状细胞
&alpha
-SMA
炎症反应
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职称材料
题名
细胞外囊泡表征检测方法的对比
1
作者
李莎莎
余飞
刘万卉
机构
烟台
大学
药学院
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第8期1093-1101,共9页
文摘
细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)是细胞主动分泌的具有磷脂双分子层结构的囊泡,天然携带母细胞来源的各种内容物,保留母细胞的生物学特征,可以反映其分泌时的母细胞状态。为了解EVs的生物发生及其在机体内的生物学功能,科学家们做了许多尝试,但直接检测EVs有一定的困难,目前的检测技术通常以EVs内容物作为检测对象,实现间接表征的目的。通过分析体液中的EVs,可以实现疾病诊断的目的,对EVs进行详细表征可以推动精准医学的发展。EVs属于内源性物质,可作为递送药物的载体,具有增加药效、降低药物毒理作用和辅助药物通过生物屏障的优势。目前,作为药物或者递送药物的载体应用尚存在的问题,包括(1)EVs内容物的表征,以便使用更明确定义的EVs;(2)开发适合的检测方法来监测体内的EVs,以确定和优化EVs的剂量、给药途径及潜在毒性;(3)确定EVs膜组成的种类及数量。EVs直径为纳米级别,内容物含量少,但临床应用价值大。应用中选择合适的分析技术将能够对EVs类型进行全面表征,并进一步推进对EVs生物学的理解,开发基于EVs的新型诊断和治疗方法,促进其临床转化。本综述介绍了EVs研究中分析技术的原理、应用及优缺点,重点是EVs和EVs中蛋白质的表征检测技术。
关键词
细胞外囊泡
检测原理
浓度检测
新兴技术
Keywords
extracellular vesicles(EVs)
detection principle
concentration detection
emerging technologies
分类号
Q74 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
基于代谢组学研究二苯乙烯苷在对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤中的保护作用
被引量:
2
2
作者
高岩
李均童
吴青林
李林
张兰
机构
首都医科
大学
宣武医院药学部
药物
研究室
中国医学科学院北京协和医学院
药物
研究所
烟台大学分子药理和药物评价教育部重点实验室
广州中医药
大学
科技创新中心
出处
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2021年第2期161-166,共6页
基金
北京市医院管理中心“登峰”计划专项经费资助(DFL20190803)
首都科技领军人才培养工程(Z191100006119017)
北京市博士后工作经费资助项目(2020-ZZ-001)。
文摘
目的:通过非靶向代谢组学等研究方法探讨二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene glucoside,TSG)对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)造成急性肝损伤的保护作用。方法:采用随机分组方式将SPF级C57BL/6小鼠分为APAP模型组和TSG干预组,每组15只。灌胃给予小鼠TSG连续7 d后,一次性腹腔注射APAP进行造模,6 h后取肝脏组织。结果:H&E染色、MDA和SOD检测表明单次APAP注射会造成肝脏损伤,TSG干预会降低肝脏受损程度。代谢产物检测结果显示,与APAP模型组相比,TSG组的ABC转运体、胆碱代谢、中心碳代谢、半乳糖、丙氨酸类氨基酸代谢等变化显著。结论:TSG通过改善脂质过氧化和能量代谢紊乱等过程抵御APAP导致的急性肝损伤。
关键词
二苯乙烯苷
对乙酰氨基酚
代谢组学
急性肝损伤
Keywords
tetrahydroxy stilbene glycoside
acetaminophen
metabonomics
acute liver injury
分类号
R965.2 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
Ocotillol及其差向异构体的合成与形成机制
被引量:
1
3
作者
王文智
徐阳荣
李新利
杨静静
孟庆国
机构
烟台
大学
新型制剂与生物技术
药物
研究山东省高校协同创新中心
烟台大学分子药理和药物评价教育部重点实验室
出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期282-287,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81473104)
山东省自然科学基金资助项目(No.ZR2012HM036)~~
文摘
以20(S)-原人参三醇[20(S)-PPT]为原料,采用两条路线合成ocotillol(3)及其差向异构体(4),并探讨其形成机制。路线1:以m-CPBA氧化20(S)-PPT,制备化合物3和4,收率分别为44.1%和28.6%;路线2:20(S)-PPT经乙酰化、mCPBA氧化和皂化反应,制备化合物3和4,收率分别为16.4%和16.2%。化合物3和4的形成机制推断如下:1)20(S)-PPT的分子内氢键导致C24(25)双键两侧的化学环境不同,两侧被氧化的概率不等,进而得到不等量的化合物3和4;2)20(S)-PPT被乙酰化后,不能形成分子内氢键,C24(25)双键平面两侧的化学环境近乎相同,经m-CPBA氧化反应、分子内SN2反应和皂化反应,最终得到几乎等物质量的化合物3和4。
关键词
ocotillol
差向异构体
合成
形成机制
Keywords
ocotillol
epimer
synthesis
formation mechanism
分类号
R914 [医药卫生—药物化学]
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职称材料
题名
基于光谱分析的姜黄素碱性自氧化及其产物的抗氧化活性
4
作者
杨昕
张迪
宋立敏
许茜
许卉
刘珂
机构
烟台
大学
化学与化工学院
烟台
大学
药学院
烟台大学分子药理和药物评价教育部重点实验室
烟台
大学
新型制剂与生物技术
药物
研究山东省高校协同创新中心
苏州雷纳
药物
研发有限公司
出处
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第9期1549-1555,共7页
基金
国家十二五"重大新药创制"科技重大专项课题(批准号:2014ZX09301306-006)
烟台大学2017年研究生科技创新基金(批准号:YDYB1725)资助~~
文摘
在室温及弱碱性条件下进行姜黄素自氧化反应,应用柱色谱分离、紫外吸收光谱(UV)、红外光谱(IR)、核磁共振波谱(NMR)和质谱(MS)等分析技术,分离并鉴定了主要自氧化产物的化学结构.针对反应进程,采用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)分析技术,从底物消除和产物生成2个方面进行了定性及定量研究.以抗坏血酸作阳性对照,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O_2^(-·))体系,定量比较了产物和姜黄素的体外抗氧化活性.结果表明,姜黄素在室温及弱碱性条件下的降解消除以自氧化反应为主,姜黄素消除过程和自氧化产物生成过程均符合一级动力学特征.自氧化产物具有双环乙酰丙酮的骨架结构,并显示有DPPH·,·OH和O_2^(-·)等自由基清除活性,但作用强度均显著低于姜黄素,因此在姜黄素应用过程中应严格控制pH条件,避免发生自氧化反应.
关键词
姜黄素
自氧化反应
双环乙酰丙酮
抗氧化活性
光谱分析
Keywords
Curcumin
Alkaline autoxidation
Bicyclopentadiones
Antioxidant activity
Spectral analysis
分类号
O657 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
连翘苷对脂多糖诱导肝脏星状细胞活化的抑制作用
被引量:
12
5
作者
李佳行
杨胜乾
刘娟娟
罗明明
陈杰
李晓辉
机构
陆军军医
大学
(第三军医
大学
)药学与检验医学系
药物
研究所
烟台大学分子药理和药物评价教育部重点实验室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期342-349,共8页
基金
国家自然科学基金面上项目(81473210)
烟台大学分子药理和药物评价教育部重点实验室开放课题(P201902)~~
文摘
目的探讨连翘苷对脂多糖诱导肝脏星状细胞活化的抑制作用及其机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,实验分4组:空白对照组、脂多糖(1μg/mL)处理组、1μmol/L连翘苷加脂多糖处理组和10μmol/L连翘苷加脂多糖处理组。采用MTT法检测HSC-T6细胞的增殖;Transwell实验分析细胞的迁移;流式细胞仪检测细胞内的ROS水平;ELISA法检测细胞上清中促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的浓度;Western blot分析细胞内α-SMA、NF-κB p65蛋白表达或蛋白磷酸化水平。结果浓度为1100μmol/L连翘苷对HSC-T6细胞的增殖无明显影响。脂多糖可明显促进HSC-T6细胞增殖及迁移,1μmol/L和10μmol/L连翘苷均可显著抑制脂多糖诱导的细胞增殖及迁移,分别降低16.13%、17.14%,48.99%、58.86%。脂多糖处理HSC-T6细胞能明显增加细胞内α-SMA蛋白的表达,而10μmol/L连翘苷处理后,细胞内α-SMA的表达量减少27.33%。1μmol/L和10μmol/L连翘苷对脂多糖诱导细胞内ROS含量(30.03%、51.26%)、促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β(25.16%、39.51%,36.57%、43.75%,58.99%、73.01%)的分泌和NF-κB p65蛋白的磷酸化水平(13.90%、24.96%)也具有显著抑制作用。相关性分析表明:连翘苷处理肝星状细胞后,其降低NF-κB p65磷酸化蛋白表达和对ROS、炎症因子(IL-1β、TNF-α)的作用与其抑制肝星状细胞活化标志物α-SMA蛋白表达的作用呈正相关。结论天然产物连翘苷能够显著抑制脂多糖诱导肝星状细胞的活化,其机制可能与其下调NF-κB信号途径介导的炎症反应有关。
关键词
连翘苷
脂多糖
肝星状细胞
&alpha
-SMA
炎症反应
Keywords
phillyrin
lipopolysaccharide
hepatic stellate cells
&alpha
-smooth muscle actin
inflammatory response分类号:R282.71
R285.5
R575.2
分类号
R282.71 [医药卫生—中药学]
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细胞外囊泡表征检测方法的对比
李莎莎
余飞
刘万卉
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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职称材料
2
基于代谢组学研究二苯乙烯苷在对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤中的保护作用
高岩
李均童
吴青林
李林
张兰
《中国临床药理学与治疗学》
CAS
CSCD
2021
2
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职称材料
3
Ocotillol及其差向异构体的合成与形成机制
王文智
徐阳荣
李新利
杨静静
孟庆国
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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职称材料
4
基于光谱分析的姜黄素碱性自氧化及其产物的抗氧化活性
杨昕
张迪
宋立敏
许茜
许卉
刘珂
《高等学校化学学报》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017
0
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职称材料
5
连翘苷对脂多糖诱导肝脏星状细胞活化的抑制作用
李佳行
杨胜乾
刘娟娟
罗明明
陈杰
李晓辉
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
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