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膀胱尿路上皮癌中LRG1和TGF-β1的表达及临床病理意义 被引量:4
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作者 陈龙 张倩 +5 位作者 徐春明 蔡菁菁 张红霞 刘雨清 孙永红 丁小娣 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期687-691,共5页
目的探讨富亮氨酸α2糖蛋白1(leucine-rich alpha-2-glycoprotein 1,LRG1)及转化生长因子beta 1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)在膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)组织中的表达及意义。方法采用免疫组... 目的探讨富亮氨酸α2糖蛋白1(leucine-rich alpha-2-glycoprotein 1,LRG1)及转化生长因子beta 1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)在膀胱尿路上皮癌(bladder urothelial carcinoma,BUC)组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测LRG1、TGF-β1及Ki-67在64例BUC组织及25例癌旁组织中的表达,分析LRG1、TGF-β1在各组间表达的差异及相关性。结果LRG1在BUC组织中强阳性27例(42.19%),癌旁组织中强阳性仅2例(8.00%),两组相比差异有统计学意义(P<0.05);TGF-β1在BUC组织中阳性49例(76.56%),在癌旁组织中阳性10例(40.00%),差异有统计学意义(P<0.05);相关性分析显示,LRG1与TGF-β1表达呈正相关(r^(2)=0.6582,P<0.05);LRG1、TGF-β1表达均与BUC病理学分级、浸润深度及Ki-67增殖指数相关(P<0.05)。结论LRG1、TGF-β1在BUC中表达均明显增高,两者表达均与肿瘤病理分级、浸润深度、细胞增殖指数密切相关,两者可能存在上下游调节关系。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 尿路上皮癌 LRG1 TGF-Β1 免疫组织化学
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IgG、Gab2、PTEN在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义 被引量:7
2
作者 张绪美 张燕 陈敏 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第9期1460-1462,1467,共4页
目的探讨IgG、Gab2、PTEN在人脑胶质瘤中的表达及其与患者预后的关系。方法采用免疫组化SP二步法检测IgG、Gab2、PTEN在55例胶质瘤和20例正常脑组织中的表达,原位杂交检测IgG m RNA在胶质瘤组织中的表达。结果胶质瘤组织中有IgG蛋白及Ig... 目的探讨IgG、Gab2、PTEN在人脑胶质瘤中的表达及其与患者预后的关系。方法采用免疫组化SP二步法检测IgG、Gab2、PTEN在55例胶质瘤和20例正常脑组织中的表达,原位杂交检测IgG m RNA在胶质瘤组织中的表达。结果胶质瘤组织中有IgG蛋白及IgG m RNA表达,Ig G、Gab2、PTEN的表达阳性率在正常脑组织与胶质瘤组差异均有显著性(5.0%vs.69.0%,5.0%vs.52.7%,85.0%vs.25.5%,均P<0.05),胶质瘤中IgG与Gab2的表达呈正相关(r=0.312 4,P<0.05),IgG与PTEN表达呈负相关(r=-0.422,P<0.05)。结论胶质瘤中IgG、Gab2高表达,PTEN低表达可能在胶质瘤的发生发展中起一定作用。 展开更多
关键词 胶质瘤 IGG Gab2 PTEN 免疫组化 原位杂交
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Wnt-1和β-catenin在宫颈鳞状上皮癌变过程中的表达和意义 被引量:6
3
作者 王美红 张绪美 张式暖 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第23期4344-4346,共3页
目的:探讨Wnt-1和β-catenin在宫颈正常鳞状上皮、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈浸润性鳞状细胞癌(SCC)中的表达及意义,寻找早期诊断SCC的生物学指标。方法:采用免疫组织化学方法(SP法)检测Wnt-1和β-catenin蛋白在20例宫颈正常鳞状上... 目的:探讨Wnt-1和β-catenin在宫颈正常鳞状上皮、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈浸润性鳞状细胞癌(SCC)中的表达及意义,寻找早期诊断SCC的生物学指标。方法:采用免疫组织化学方法(SP法)检测Wnt-1和β-catenin蛋白在20例宫颈正常鳞状上皮、30例CINⅠ、40例CINⅡ/Ⅲ及40例SCC患者中的表达情况。结果:(1)Wnt-1阳性表达率在宫颈正常鳞状上皮、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组织中分别是25.0%、60.0%、82.5%、97.5%,其在4组中的表达差异具有统计学意义(χ2=40.04,P<0.05);(2)β-catenin异常表达率在宫颈正常鳞状上皮、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组织中分别是5.0%、26.7%、57.5%、82.5%,差异具有统计学意义(χ2=37.25,P<0.05);(3)两者在SCC中表达的相关性:Wnt-1蛋白的阳性表达和β-catenin蛋白的异常表达有相关性(r=0.33,P<0.05)。结论:Wnt-1和β-catenin参与了宫颈鳞状上皮的恶性转化过程,在由CIN发展到宫颈癌的过程中起了促进作用,联合检测这两项指标有助于早期诊断SCC。 展开更多
关键词 鳞状细胞 宫颈肿瘤 宫颈上皮内瘤变 Wnt-1蛋白 Β-CATENIN
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过表达Snail增强肺癌细胞A549的体外侵袭能力 被引量:4
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作者 李洪利 尹崇高 +2 位作者 李文通 孙永红 钟延美 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期943-948,共6页
用锌指转录因子Snail诱导肺癌细胞A549发生上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),检测肺癌发生EMT后细胞侵袭能力的变化,为临床筛选分子靶向药物提供依据.构建pcDNA3.1-snail载体,用pcDNA3.1-snail及空pcDNA3.1载... 用锌指转录因子Snail诱导肺癌细胞A549发生上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),检测肺癌发生EMT后细胞侵袭能力的变化,为临床筛选分子靶向药物提供依据.构建pcDNA3.1-snail载体,用pcDNA3.1-snail及空pcDNA3.1载体转染肺癌A549细胞后,进行G418筛选;光镜观察培养后细胞形态学的改变、免疫细胞化学与免疫荧光检测细胞表达E-钙黏着蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的改变,Western印迹检测细胞中E-钙黏着蛋白和波形蛋白的改变,Transwell侵袭小室法进行细胞体外侵袭能力检测.采用pcDNA3.1-snail转染细胞后,A549细胞变得细长,细胞融合度降低.免疫细胞化学、免疫荧光、Western印迹结果显示,E-钙黏着蛋白表达降低,波形蛋白表达升高;transwell侵袭小室法结果显示,过表达Snail的A549细胞穿透matrigel胶的细胞数明显增多.结果提示,Snail能有效诱导肺癌发生EMT,并且能增强肺癌的体外侵袭能力. 展开更多
关键词 转录因子SNAIL 上皮细胞-间质转化 肺癌 侵袭能力
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大肠癌细胞与血管内皮细胞间缝隙连接通讯的建立与功能检测 被引量:1
5
作者 刘群 乔颜春 +1 位作者 崔晶 孙青 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期174-177,共4页
目的建立大肠癌细胞与血管内皮细胞间缝隙连接细胞通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)模型,探讨癌细胞与血管内皮细胞之间GJIC的变化在癌转移中的作用。方法采用细胞培养、免疫组化技术及激光漂白后荧光恢复技术,检... 目的建立大肠癌细胞与血管内皮细胞间缝隙连接细胞通讯(gap junction intercellular communication,GJIC)模型,探讨癌细胞与血管内皮细胞之间GJIC的变化在癌转移中的作用。方法采用细胞培养、免疫组化技术及激光漂白后荧光恢复技术,检测单独培养的内皮细胞及与不同转移能力的人大肠癌细胞系LoVo细胞、HT29细胞共培养之内皮细胞间缝隙连接细胞间通讯的状况。结果相邻接触的内皮细胞在激光漂白后出现荧光恢复现象,低转移能力的HT29细胞与内皮细胞共培养组荧光恢复明显减缓;高转移能力的LoVo细胞与内皮细胞共培养组荧光恢复更慢([25.68±15.74)%和(15.13±7.76)%,P<0.05]。结论大肠癌细胞与血管内皮细胞黏附后,其间的缝隙连接细胞间通讯减少,并且高转移能力的LoVo细胞与血管内皮细胞间的缝隙连接通讯减少尤其明显。肿瘤细胞与血管内皮细胞粘附后,其间的缝隙连接细胞间通讯发生改变,与恶性肿瘤的转移特性密切相关。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 肿瘤转移 缝隙连接细胞间通讯
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ZFP36L1通过激活STAT3信号通路抑制上皮间质转化减弱人乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移 被引量:7
6
作者 张烽萍 齐高秀 +4 位作者 丁康 刘军 陈敏 林盟 周风华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期721-726,共6页
目的探讨锌指蛋白36样分子1(ZFP36L1)在乳腺癌发生发展中的作用和机制。方法免疫组织化学方法检测乳腺癌组织ZFP36L1的表达和定位,分析ZFP36L1的表达与乳腺癌临床病理参数及预后的关系;MCF-7人乳腺癌细胞转染ZFP36L1过表达和空白质粒,通... 目的探讨锌指蛋白36样分子1(ZFP36L1)在乳腺癌发生发展中的作用和机制。方法免疫组织化学方法检测乳腺癌组织ZFP36L1的表达和定位,分析ZFP36L1的表达与乳腺癌临床病理参数及预后的关系;MCF-7人乳腺癌细胞转染ZFP36L1过表达和空白质粒,通过5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)和新型四唑氮盐(MTS)实验检测细胞增殖能力和细胞活性,Transwell^(TM)检测细胞的侵袭和迁移能力,Western blot法检测β联蛋白(β-catenin)、波形蛋白(vimentin)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、信号转导子与转录激活子3(STAT3)和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白水平。结果与高表达ZFP36L1的乳腺癌患者相比,低表达ZFP36L1患者肿瘤体积大,TNM分期高,淋巴结及远处转移率高;过表达ZFP36L1的MCF-7乳腺癌细胞的活性减低,增殖、侵袭和迁移能力降低,E-cadherin表达升高,β-catenin、vimentin表达降低;STAT3及p-STAT3表达升高。结论ZFP36L1作为一种抑癌基因,通过上皮间质转化(EMT)和STAT3信号通路抑制了乳腺癌增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 锌指蛋白36样分子1(ZFP36L1) 乳腺癌 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移 上皮间质转化(EMT) 信号转导子与转录激活子3(STAT3)
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HPV E6/E7mRNA原位杂交技术在HPV分型检测阴性的子宫颈腺癌中的研究 被引量:5
7
作者 冯慧敏 张海凤 +3 位作者 孙永红 胥雅婷 张友忠 刘玉珍 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期154-157,共4页
目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)分型检测阴性的子宫颈腺癌中HPV E6/E7mRNA的表达情况,为子宫颈腺癌的早期筛查提供新思路。方法:选择2019年1月至2021年6月于潍坊医学院附属医院和山东大学齐鲁医院就诊的HPV分型检测阴性的15例子宫颈腺癌患... 目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)分型检测阴性的子宫颈腺癌中HPV E6/E7mRNA的表达情况,为子宫颈腺癌的早期筛查提供新思路。方法:选择2019年1月至2021年6月于潍坊医学院附属医院和山东大学齐鲁医院就诊的HPV分型检测阴性的15例子宫颈腺癌患者为研究组,同期HPV分型检测阳性的15例子宫颈腺癌患者为对照组。采用高危型HPV E6/E7mRNA原位杂交(RISH)检测两组患者病变组织中HPV E6/E7mRNA的表达情况,同时采用免疫组化法(IHC)检测p16和Ki-67的表达情况。结果:与对照组比较,研究组HPV E6/E7 mRNA的阳性表达(73.3%vs.100.0%)、p16的阳性表达(80.0%vs.100.0%)及Ki-67的阳性表达(86.7%vs.100.0%),差异均无统计学意义(P>0.05)。研究组中HPV E6/E7mRNA表达阴性的4例患者病理类型均属于非HPV相关子宫颈腺癌(胃型腺癌2例,微偏腺癌2例),HPV E6/E7mRNA在HPV相关和非HPV相关中的阳性占比分别为100.0%(26/26)和0(0/4);其中1例普通浸润型腺癌HPV E6/E7mRNA和Ki-67阳性表达,而p16阴性表达,1例胃型腺癌和1例微偏腺癌为HPV E6/E7mRNA和Ki-67阴性表达,而p16阳性表达。结论:HPV分型检测阴性的子宫颈腺癌中绝大部分由HPV感染引起,而且p16表达阴性并不能排除HPV感染,其阳性表达也不代表HPV感染。HPV E6/E7mRNA检测有助于降低HPV分型检测的假阴性率,更加精准地区分HPV相关与非HPV相关子宫颈腺癌。 展开更多
关键词 子宫颈腺癌 人乳头瘤病毒 人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA 原位杂交
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低级别嗜酸细胞性肾肿瘤1例 被引量:3
8
作者 梁雲资 陈冰 +4 位作者 陈敏 许琳斐 丁雯丽 孙晓东 韩芳 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期639-640,共2页
患者男性,58岁。因排尿困难入院,临床表现无肉眼血尿及结节性硬化症(tuberous sclerosis,TSC)。超声示:左侧肾中部靠下极见一大小2.7 cm×2.1 cm实性回声。CT示:左侧肾占位,增强扫描后可见不均匀性强化影(图1),高度怀疑嗜酸细胞腺瘤... 患者男性,58岁。因排尿困难入院,临床表现无肉眼血尿及结节性硬化症(tuberous sclerosis,TSC)。超声示:左侧肾中部靠下极见一大小2.7 cm×2.1 cm实性回声。CT示:左侧肾占位,增强扫描后可见不均匀性强化影(图1),高度怀疑嗜酸细胞腺瘤,遂行左侧肾根治切除术。 展开更多
关键词 肾肿瘤 嗜酸细胞性 低级别 病例报道
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CCL18通过ANXA2促进肺腺癌的侵袭 被引量:4
9
作者 邓梓坤 肖钦佩 +3 位作者 郑远航 冯瑞军 盛智梅 张宝刚 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期461-467,共7页
背景与目的 ANXA2在癌症进展中起着非常重要的作用,趋化因子18(chemokine ligand 18, CCL18)与肺腺癌(lung adenocarcinoma, LUAD)的侵袭、迁移、转移及预后不良有关。本研究旨在探究CCL18是否通过ANXA2促进LUAD侵袭以及其在LUAD侵袭中... 背景与目的 ANXA2在癌症进展中起着非常重要的作用,趋化因子18(chemokine ligand 18, CCL18)与肺腺癌(lung adenocarcinoma, LUAD)的侵袭、迁移、转移及预后不良有关。本研究旨在探究CCL18是否通过ANXA2促进LUAD侵袭以及其在LUAD侵袭中的作用和分子机制。方法 Western blot检测LUAD组织与癌周正常组织中ANXA2表达量,并检测转染效率及ANXA2作为上游调节剂在AKT/cofilin信号通路中的作用。细胞趋化实验、Transwell侵袭实验等实验探讨ANXA2对LUAD的作用机理。F-actin聚合实验和Western blot检测转染Si RNA的A549细胞侵袭是否与F-actin相关。结果与相邻非肿瘤组织相比,癌组织中A NX A2的蛋白表达水平升高(P<0.05)。敲低A NX A2组的LUA D细胞中CCL18诱导的趋化运动能力和侵袭能力下降(P<0.05)。与对照组相比,敲低ANXA2的LUAD细胞的F-actin聚合明显降低,而敲低ANXA2的LUAD细胞中AKT在Ser473和Thr308位点的磷酸化和cofilin、LIMK的磷酸化水平均降低(P<0.05)。结论敲低ANXA2可以通过降低AKT及下游通路磷酸化,进而降低CCL18对LUAD细胞的侵袭性的影响。 展开更多
关键词 ANXA2 CCL18 肺肿瘤 侵袭
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外泌体miR-574-5P通过下调大肿瘤抑制基因2促进胶质瘤增殖、侵袭和迁移 被引量:4
10
作者 冯瑞军 郑远航 +4 位作者 盛智梅 李可欣 董杰 肖钦沛 张宝刚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1520-1527,共8页
外泌体可参与肿瘤细胞侵袭、迁移和血管生成等生物学过程,而侵袭是胶质瘤患者死亡的主要原因。研究表明,肿瘤细胞分泌的外泌体能够携带miRNA到受体细胞中,调控受体细胞增殖、迁移和侵袭等生物学功能。miR-574-5P在多种肿瘤发生发展中发... 外泌体可参与肿瘤细胞侵袭、迁移和血管生成等生物学过程,而侵袭是胶质瘤患者死亡的主要原因。研究表明,肿瘤细胞分泌的外泌体能够携带miRNA到受体细胞中,调控受体细胞增殖、迁移和侵袭等生物学功能。miR-574-5P在多种肿瘤发生发展中发挥关键作用,但胶质瘤细胞来源的外泌体是否表达miR-574-5P,以及其在胶质瘤细胞生长和侵袭迁移中的作用未见报道。本研究将探讨胶质瘤细胞来源的外泌体miR-574-5P在细胞增殖、迁移和侵袭过程中的作用机制。运用电镜、纳米粒径跟踪和Western印迹表征外泌体。结果显示,所提取的圆形颗粒是外泌体,直径为30~100 nm;经免疫荧光检测外泌体的内化,结果显示,外泌体内化到LN229细胞中;运用生物信息学和网上数据找出胶质瘤细胞来源的外泌体差异miRNA,结果显示,外泌体差异miRNA为miR-574-5P,并预测大肿瘤抑制基因2(LATS2)可能是miR-574-5P的靶基因;双荧光素酶报告基因结果证实,miR-574-5P与LATS2的3′UTR区互补结合;转染实验、qRT-PCR和Western印迹检测miR-574-5P与LATS2的关系,结果显示,过表达miR-574-5P后,LATS2 mRNA的含量与对照组无显著差异(P>0.05),表明miR-574-5P对LATS2的调控作用通过抑制其翻译实现(P<0.05)。转染实验、CCK-8法、Transwell迁移和侵袭实验,检测miR-574-5P对LN229细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果显示,过表达miR-574-5P可显著促进LN229细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。此外,Western印迹检测信号通路LATS2/YAP关键激酶蛋白质的表达情况,观察外泌体对此信号通路的影响。结果显示,外泌体下调LATS2表达,减少p-YAP磷酸化。综上所述,外泌体miR-574-5P通过靶向下调LATS2,激活LATS2/YAP信号通路,从而促进胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力,这可为胶质瘤的诊断和治疗提供一个科学可靠的靶点。 展开更多
关键词 胶质瘤 外泌体 miR-574-5P 大肿瘤抑制基因2
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肾脏嗜酸性空泡状肿瘤1例
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作者 陈冰 梁雲资 +4 位作者 陈敏 瞿娜 李雪 孙晓东 韩芳 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期511-512,共2页
患者男性,33岁。体检发现左肾占位1周入院。患者无腰背部疼痛、肉眼血尿、尿频、尿急及尿痛。CT示左肾外侧实质类圆形稍低密度肿块影突出肾轮廓外,内密度不均,增强扫描后可见不均匀性强化影,符合左侧肾癌表现(图1)。结合临床诊断为左侧... 患者男性,33岁。体检发现左肾占位1周入院。患者无腰背部疼痛、肉眼血尿、尿频、尿急及尿痛。CT示左肾外侧实质类圆形稍低密度肿块影突出肾轮廓外,内密度不均,增强扫描后可见不均匀性强化影,符合左侧肾癌表现(图1)。结合临床诊断为左侧肾肿物。遂行部分肾切除术,术中左侧肾外缘中部见棕褐色肿物膨出肾脏表面,完整切除肿物及部分肾组织送病理检查。 展开更多
关键词 肾肿瘤 空泡状肿瘤 嗜酸性 病例报道
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miR-346通过靶向调控SRSF10抑制胶质瘤细胞迁移、侵袭和增殖
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作者 李可欣 董杰 +3 位作者 段万理 董浩 王雪洁 张宝刚 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期741-749,共9页
胶质瘤是最常见的肿瘤之一,预后较差。有研究表明,microRNAs(miRNAs)与包括胶质瘤在内的多种肿瘤有密切联系。然而,miR-346通过靶向调控丝氨酸/精氨酸剪接因子10(serine/arginine splicing factor 10,SRSF10)抑制胶质瘤细胞迁移、侵袭... 胶质瘤是最常见的肿瘤之一,预后较差。有研究表明,microRNAs(miRNAs)与包括胶质瘤在内的多种肿瘤有密切联系。然而,miR-346通过靶向调控丝氨酸/精氨酸剪接因子10(serine/arginine splicing factor 10,SRSF10)抑制胶质瘤细胞迁移、侵袭和增殖能力的分子机制目前仍不明确。对GSE165137与GSE139031芯片进行差异表达分析结果显示,miR-346在两个数据集中共同下调,运用CGGA数据库分析显示,miR-346高表达的患者总生存期明显提高(P<0.0001),miR-346的表达随胶质瘤WHO分级升高而降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,miR-346在胶质瘤细胞U251中的表达显著降低(P<0.05),且miR-346过表达质粒转染成功(P<0.05)。Transwell实验,5-乙炔基-2脱氧尿嘧啶核苷(EdU)增殖实验和细胞克隆形成结果显示,与对照组相比,过表达miR-346后U251细胞的迁移、侵袭和增殖能力下降(P<0.05)。生物信息学方法预测miR-346的靶基因为SRSF10;双荧光素酶结果证实,miR-346与SRSF10mRNA的3′-UTR存在靶向结合关系(P<0.05);Western印迹结果显示,过表达miR-346后SRSF10蛋白表达水平下降(P<0.05)。Transwell实验、EdU实验及细胞克隆形成结果显示,与miR-346+Vector组相比,miR-346+SRSF10组的迁移、侵袭和增殖能力显著增加(P<0.05)。综上所述,miR-346在胶质瘤细胞和组织中表达普遍下调,且miR-346可通过靶向调控SRSF10抑制胶质瘤细胞的迁移、侵袭和增殖。 展开更多
关键词 胶质瘤 miR-346 迁移 侵袭 增殖 丝氨酸/精氨酸剪接因子10
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外泌体介导miR-335-5p通过靶向LKB1对胶质瘤细胞上皮-间质转化的影响
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作者 郑远航 冯瑞军 +4 位作者 盛智梅 李可欣 董杰 肖钦沛 张宝刚 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第1期36-41,共6页
目的探讨外泌体中microRNA-335-5p(miR-335-5p)被胶质瘤细胞摄取并作用于肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)影响胶质瘤细胞侵袭的分子机制。方法通过外泌体提取试剂盒提取外泌体;运用透射电镜、粒度仪、Western blot法鉴定分离获取的外泌... 目的探讨外泌体中microRNA-335-5p(miR-335-5p)被胶质瘤细胞摄取并作用于肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)影响胶质瘤细胞侵袭的分子机制。方法通过外泌体提取试剂盒提取外泌体;运用透射电镜、粒度仪、Western blot法鉴定分离获取的外泌体;RT-PCR检测不同肿瘤细胞来源外泌体中miR-335-5p的表达量;外泌体摄取实验检测胶质瘤细胞对外泌体的摄取情况;Transwell实验检测加入外泌体后胶质瘤细胞的侵袭能力;双荧光素酶报告实验验证miR-335-5p是否靶向结合LKB1;Transwell实验检测转染miR-335-5p mimic后胶质瘤细胞的侵袭能力;Western blot法检测转染miR-335-5p mimic后胶质瘤细胞中LKB1和上皮-间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和vimentin)的表达水平。结果LN229细胞来源的外泌体中miR-335-5p表达水平明显高于H4细胞来源的外泌体;过表达miR-335-5p后LN229细胞侵袭能力增强;miR-335-5p靶向结合LKB1 mRNA的3′UTR区;miR-335-5p通过负向调控LKB1诱导胶质瘤细胞发生上皮-间质转化。结论外泌体中的miR-335-5p被胶质瘤细胞摄取并通过抑制LKB1蛋白表达诱导细胞发生上皮-间质转化,从而促进胶质瘤细胞的侵袭。 展开更多
关键词 胶质瘤 外泌体 上皮-间质转化 miR-335-5p LKB1
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