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miR-300通过负向调控垂体肿瘤转化基因1抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭和转移
被引量：
4
1
作者
梁答
吴晓林
+3 位作者
白俊
张丽萍
尹崇高
钟伟
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期285-291,共7页
目的研究miR-300及垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)对骨肉瘤侵袭转移的影响,探讨引起骨肉瘤侵袭转移的分子机制。方法Western blot检测人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞MG63中PTTG1的表达情况,并检测转染敲低PTTG1质粒后细胞的转染效率;Transw...
目的研究miR-300及垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)对骨肉瘤侵袭转移的影响,探讨引起骨肉瘤侵袭转移的分子机制。方法Western blot检测人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞MG63中PTTG1的表达情况,并检测转染敲低PTTG1质粒后细胞的转染效率;Transwell侵袭实验和CCK8实验检测敲低PTTG1及过表达miR-300对骨肉瘤细胞MG63侵袭和增殖能力的影响;网上预测并筛选与PTTG1互补结合的microRNAs(miRNAs);qRT-PCR检测人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞MG63中miR-300的表达情况;Western blot检测转染过表达miR-300质粒后PTTG1在骨肉瘤细胞MG63的表达情况;双荧光素酶实验检测miR-300和PTTG1的靶向结合情况;Transwell侵袭实验和CCK8实验检测过表达miR-300和过表达PTTG1质粒共转后对骨肉瘤细胞MG63侵袭和增殖能力的影响。结果PTTG1在骨肉瘤细胞MG63中表达较高(P=0.0002);敲低PTTG1可抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭(P=0.0002)和增殖(P=0.0039)能力;网上预测软件预测可能与PTTG1互补结合的miRNAs,NCBI数据库下载数据集分析确定研究对象为miR-300;qRT-PCR结果表明miR-300在骨肉瘤细胞MG63中表达降低(P=0.0004);采用过表达质粒过表达骨肉瘤细胞MG63中的miR-300,qRT-PCR结果提示转染成功(P<0.0001);Western blot发现过表达miR-300后PTTG1的表达明显降低(P=0.0007);双荧光素酶实验结果显示miR-300可与PTTG1靶向结合(P=0.0010);细胞共转实验显示过表达PTTG1可逆转miR-300对骨肉瘤细胞侵袭(P=0.0003)和增殖(P=0.0077)能力的影响。结论miR-300通过靶向结合PTTG1抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭转移能力。
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关键词
骨肉瘤
miR-300
垂体肿瘤转化基因1
侵袭
转移
增殖
在线阅读
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职称材料
MiR-671-5p通过负向调控SMAD抑制骨肉瘤细胞的迁移和侵袭
被引量：
1
2
作者
胡雅琼
梁答
+5 位作者
陈新璐
陈琳
白俊
李洪利
尹崇高
钟伟
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第10期1562-1568,共7页
目的探讨miR-671-5p影响骨肉瘤的迁移侵袭的相关机制。方法通过NCBI在线数据库筛选骨肉瘤中差异表达的微小RNA(miRNA)、预测miRNA的靶蛋白并进行功能分析;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)用于检测转染过表达miR-671-5p质粒后con组和miR-671-5...
目的探讨miR-671-5p影响骨肉瘤的迁移侵袭的相关机制。方法通过NCBI在线数据库筛选骨肉瘤中差异表达的微小RNA(miRNA)、预测miRNA的靶蛋白并进行功能分析;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)用于检测转染过表达miR-671-5p质粒后con组和miR-671-5p组骨肉瘤细胞中miR-671-5p的表达情况;通过Transwell实验检测转染质粒后骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力;Western blot实验检测相关蛋白在骨肉瘤细胞中的表达情况;荧光素酶报告基因检测重组人SMAD家族成员3(SMAD3)的3’UTR中是否含有miR-671-5p的结合位点。结果MiR-671-5p在骨肉瘤组织和细胞中表达下调(P<0.05)。qRT-PCR证明转染过表达miR-671-5p质粒后,细胞转染成功(P<0.05)。过表达骨肉瘤细胞中的miR-671-5p后细胞的迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05),并且miR-671-5p能够抑制骨肉瘤细胞的上皮间质转化(EMT)(P<0.05);Western blot结果显示SMAD3在骨肉瘤细胞中表达上调(P<0.05);荧光素酶报告基因检测证实miR-671-5p与SMAD3的3’UTR之间存在结合位点(P<0.05);Western blot结果显示转染过表达SMAD3质粒后,SMAD3表达明显升高(P<0.05),而miR-671-5p能明显抑制SMAD3的表达(P<0.05);Transwell实验证明SMAD3能够促进骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05),而miR-671-5p则能够逆转这种促进作用(P<0.05)。结论MiR-671-5p能够通过负向调控SMAD3抑制骨肉瘤细胞迁移和侵袭能力。
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关键词
miR-671-5p
SMAD3
迁移
侵袭
上皮间质转化
骨肉瘤
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职称材料
题名
miR-300通过负向调控垂体肿瘤转化基因1抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭和转移
被引量：
4
1
作者
梁答
吴晓林
白俊
张丽萍
尹崇高
钟伟
机构
潍坊医学院附属医院关节外一科//矫形骨科
潍坊
医学院
基础
医学院
病理学教研室
潍坊
医学院
护理
学院
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第2期285-291,共7页
基金
山东省自然科学基金(ZR2019MH033)
潍坊市科技局医学类项目(2019YX061)。
文摘
目的研究miR-300及垂体肿瘤转化基因1(PTTG1)对骨肉瘤侵袭转移的影响,探讨引起骨肉瘤侵袭转移的分子机制。方法Western blot检测人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞MG63中PTTG1的表达情况,并检测转染敲低PTTG1质粒后细胞的转染效率;Transwell侵袭实验和CCK8实验检测敲低PTTG1及过表达miR-300对骨肉瘤细胞MG63侵袭和增殖能力的影响;网上预测并筛选与PTTG1互补结合的microRNAs(miRNAs);qRT-PCR检测人成骨细胞hFOB1.19及骨肉瘤细胞MG63中miR-300的表达情况;Western blot检测转染过表达miR-300质粒后PTTG1在骨肉瘤细胞MG63的表达情况;双荧光素酶实验检测miR-300和PTTG1的靶向结合情况;Transwell侵袭实验和CCK8实验检测过表达miR-300和过表达PTTG1质粒共转后对骨肉瘤细胞MG63侵袭和增殖能力的影响。结果PTTG1在骨肉瘤细胞MG63中表达较高(P=0.0002);敲低PTTG1可抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭(P=0.0002)和增殖(P=0.0039)能力;网上预测软件预测可能与PTTG1互补结合的miRNAs,NCBI数据库下载数据集分析确定研究对象为miR-300;qRT-PCR结果表明miR-300在骨肉瘤细胞MG63中表达降低(P=0.0004);采用过表达质粒过表达骨肉瘤细胞MG63中的miR-300,qRT-PCR结果提示转染成功(P<0.0001);Western blot发现过表达miR-300后PTTG1的表达明显降低(P=0.0007);双荧光素酶实验结果显示miR-300可与PTTG1靶向结合(P=0.0010);细胞共转实验显示过表达PTTG1可逆转miR-300对骨肉瘤细胞侵袭(P=0.0003)和增殖(P=0.0077)能力的影响。结论miR-300通过靶向结合PTTG1抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭转移能力。
关键词
骨肉瘤
miR-300
垂体肿瘤转化基因1
侵袭
转移
增殖
Keywords
osteosarcoma
miR-300
PTTG1
invasion
metastasis
proliferation
分类号
R738.1 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
MiR-671-5p通过负向调控SMAD抑制骨肉瘤细胞的迁移和侵袭
被引量：
1
2
作者
胡雅琼
梁答
陈新璐
陈琳
白俊
李洪利
尹崇高
钟伟
机构
潍坊
医学院
病理学教研室
潍坊医学院附属医院关节外一科//矫形骨科
潍坊
医学院
医学
研究实验中心
潍坊
医学院
护理
学院
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第10期1562-1568,共7页
基金
潍坊市科技局医学类项目(2019YX061)
山东省自然科学基金(ZR2019MH033)。
文摘
目的探讨miR-671-5p影响骨肉瘤的迁移侵袭的相关机制。方法通过NCBI在线数据库筛选骨肉瘤中差异表达的微小RNA(miRNA)、预测miRNA的靶蛋白并进行功能分析;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)用于检测转染过表达miR-671-5p质粒后con组和miR-671-5p组骨肉瘤细胞中miR-671-5p的表达情况;通过Transwell实验检测转染质粒后骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力;Western blot实验检测相关蛋白在骨肉瘤细胞中的表达情况;荧光素酶报告基因检测重组人SMAD家族成员3(SMAD3)的3’UTR中是否含有miR-671-5p的结合位点。结果MiR-671-5p在骨肉瘤组织和细胞中表达下调(P<0.05)。qRT-PCR证明转染过表达miR-671-5p质粒后,细胞转染成功(P<0.05)。过表达骨肉瘤细胞中的miR-671-5p后细胞的迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05),并且miR-671-5p能够抑制骨肉瘤细胞的上皮间质转化(EMT)(P<0.05);Western blot结果显示SMAD3在骨肉瘤细胞中表达上调(P<0.05);荧光素酶报告基因检测证实miR-671-5p与SMAD3的3’UTR之间存在结合位点(P<0.05);Western blot结果显示转染过表达SMAD3质粒后,SMAD3表达明显升高(P<0.05),而miR-671-5p能明显抑制SMAD3的表达(P<0.05);Transwell实验证明SMAD3能够促进骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05),而miR-671-5p则能够逆转这种促进作用(P<0.05)。结论MiR-671-5p能够通过负向调控SMAD3抑制骨肉瘤细胞迁移和侵袭能力。
关键词
miR-671-5p
SMAD3
迁移
侵袭
上皮间质转化
骨肉瘤
Keywords
miR-671-5p
SMAD3
migration
invasion
epithelial-mesenchymal transition
osteosarcoma
分类号
R738.1 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miR-300通过负向调控垂体肿瘤转化基因1抑制骨肉瘤细胞MG63的侵袭和转移
梁答
吴晓林
白俊
张丽萍
尹崇高
钟伟
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
4
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2
MiR-671-5p通过负向调控SMAD抑制骨肉瘤细胞的迁移和侵袭
胡雅琼
梁答
陈新璐
陈琳
白俊
李洪利
尹崇高
钟伟
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北大核心
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