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RPL30基因的克隆及其与神经管发育相关关系的研究
被引量：
3
1
作者
于丽
管英俊
+1 位作者
高英茂
李少玲
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期33-37,共5页
本文通过构建金黄地鼠神经管cDNA文库,筛选了RPL30基因,并探讨了其与神经管发育的关系。提取胚胎(E)8.5d的金黄地鼠神经管总RNA,用SMART技术构建神经管cDNA的噬菌体表达文库。利用分部分排除技术(SSS法),结合PCR法逐级筛选cDNA文库。将...
本文通过构建金黄地鼠神经管cDNA文库,筛选了RPL30基因,并探讨了其与神经管发育的关系。提取胚胎(E)8.5d的金黄地鼠神经管总RNA,用SMART技术构建神经管cDNA的噬菌体表达文库。利用分部分排除技术(SSS法),结合PCR法逐级筛选cDNA文库。将得到的RPL30阳性噬菌斑进行质粒转化、酶切鉴定及测序分析,进而回收、纯化RPL30cDNA片段并制备探针。用Northern杂交技术检测神经管发育过程中RPL30mRNA的表达状况。结果显示,构建的神经管cDNA文库容量为1.5×106pfu/ml,重组率达到99%,平均插入片段长度大于1kb。经过筛选得到含RPL30cDNA的阳性克隆。序列测定及同源性分析发现,该cDNA片段全长535bp,其中含有完整的开放阅读框。Northern杂交结果显示,在E8d^E12d各时间段,神经管中RPL30mRNA的表达均处于较高水平,且随着时间的增长,表达量递增,于E12d达到高峰。本文结果表明,我们用SSS技术结合PCR法从神经管cDNA文库中克隆到了RPL30基因的全长cDNA序列,该基因可能与神经管发育密切相关。
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关键词
CDNA文库
神经管
RPL30
SSS法筛选
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职称材料
雌二醇对去卵巢大鼠延髓毛细血管超微结构的影响
被引量：
2
2
作者
王凤斌
唐可欣
+2 位作者
姜红心
管英俊
王亚南
《医学研究生学报》
CAS
2005年第1期27-29,33,共4页
目的 :观察雌激素对去卵巢大鼠延髓毛细血管超微结构的影响。 方法 :30只雌性成年SD大鼠随机分为去卵巢组 (A组 )、雌二醇组 (B组 )和假手术对照组 (C组 )。A组和B组大鼠卵巢切除后 10天起 ,分别皮下注射等渗盐水 0 .1ml/d、17 β雌二...
目的 :观察雌激素对去卵巢大鼠延髓毛细血管超微结构的影响。 方法 :30只雌性成年SD大鼠随机分为去卵巢组 (A组 )、雌二醇组 (B组 )和假手术对照组 (C组 )。A组和B组大鼠卵巢切除后 10天起 ,分别皮下注射等渗盐水 0 .1ml/d、17 β雌二醇 2 0 μg/ (kg·d) ;C组只剖开腹膜 ,不切除卵巢。手术后 10天起 ,皮下注射等渗盐水0 .1ml/d。各组动物连续用药 6周后观察结果。 结果 :①血清雌二醇的浓度 :A组明显低于C组 (P <0 .0 1) ,B组明显高于A组 (P <0 .0 1) ,而B组和C组比较无统计学意义。②电镜观察 :A组延髓毛细血管有明显的损伤表现 ,内皮细胞肿胀变形 ,线粒体明显肿胀、嵴断裂 ,血管内皮外基膜增厚 ,部分结构不完整 ;B组的毛细血管损伤明显减轻 ;C组延髓毛细血管形态正常。 结论 :雌激素对去卵巢大鼠延髓毛细血管有明显的保护作用。
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关键词
17-Β雌二醇
毛细血管
超微结构
卵巢去势
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职称材料
题名
RPL30基因的克隆及其与神经管发育相关关系的研究
被引量：
3
1
作者
于丽
管英俊
高英茂
李少玲
机构
潍坊医学院组胚教研室
山东大学
医学院
组
胚
教研室
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第1期33-37,共5页
基金
国家自然科学基金(No.30270701)
卫生部优秀青年科技人才专项基金(No.1999BA2CCA1)资助项目
文摘
本文通过构建金黄地鼠神经管cDNA文库,筛选了RPL30基因,并探讨了其与神经管发育的关系。提取胚胎(E)8.5d的金黄地鼠神经管总RNA,用SMART技术构建神经管cDNA的噬菌体表达文库。利用分部分排除技术(SSS法),结合PCR法逐级筛选cDNA文库。将得到的RPL30阳性噬菌斑进行质粒转化、酶切鉴定及测序分析,进而回收、纯化RPL30cDNA片段并制备探针。用Northern杂交技术检测神经管发育过程中RPL30mRNA的表达状况。结果显示,构建的神经管cDNA文库容量为1.5×106pfu/ml,重组率达到99%,平均插入片段长度大于1kb。经过筛选得到含RPL30cDNA的阳性克隆。序列测定及同源性分析发现,该cDNA片段全长535bp,其中含有完整的开放阅读框。Northern杂交结果显示,在E8d^E12d各时间段,神经管中RPL30mRNA的表达均处于较高水平,且随着时间的增长,表达量递增,于E12d达到高峰。本文结果表明,我们用SSS技术结合PCR法从神经管cDNA文库中克隆到了RPL30基因的全长cDNA序列,该基因可能与神经管发育密切相关。
关键词
CDNA文库
神经管
RPL30
SSS法筛选
Keywords
cDNA library,neural tube,RPL30,subsection screening
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
雌二醇对去卵巢大鼠延髓毛细血管超微结构的影响
被引量：
2
2
作者
王凤斌
唐可欣
姜红心
管英俊
王亚南
机构
潍坊
医学院
生理学
教研室
潍坊
医学院
形态学实验室
潍坊
医学院
组
胚
学
教研室
出处
《医学研究生学报》
CAS
2005年第1期27-29,33,共4页
文摘
目的 :观察雌激素对去卵巢大鼠延髓毛细血管超微结构的影响。 方法 :30只雌性成年SD大鼠随机分为去卵巢组 (A组 )、雌二醇组 (B组 )和假手术对照组 (C组 )。A组和B组大鼠卵巢切除后 10天起 ,分别皮下注射等渗盐水 0 .1ml/d、17 β雌二醇 2 0 μg/ (kg·d) ;C组只剖开腹膜 ,不切除卵巢。手术后 10天起 ,皮下注射等渗盐水0 .1ml/d。各组动物连续用药 6周后观察结果。 结果 :①血清雌二醇的浓度 :A组明显低于C组 (P <0 .0 1) ,B组明显高于A组 (P <0 .0 1) ,而B组和C组比较无统计学意义。②电镜观察 :A组延髓毛细血管有明显的损伤表现 ,内皮细胞肿胀变形 ,线粒体明显肿胀、嵴断裂 ,血管内皮外基膜增厚 ,部分结构不完整 ;B组的毛细血管损伤明显减轻 ;C组延髓毛细血管形态正常。 结论 :雌激素对去卵巢大鼠延髓毛细血管有明显的保护作用。
关键词
17-Β雌二醇
毛细血管
超微结构
卵巢去势
Keywords
estradiol
Capillary
Ultrastructure
Ovariectomy
分类号
R338.22 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RPL30基因的克隆及其与神经管发育相关关系的研究
于丽
管英俊
高英茂
李少玲
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
3
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职称材料
2
雌二醇对去卵巢大鼠延髓毛细血管超微结构的影响
王凤斌
唐可欣
姜红心
管英俊
王亚南
《医学研究生学报》
CAS
2005
2
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