背景与目的:Δ133p53具有促进肿瘤细胞生长的作用,但具体作用机制尚不明确,本实验是采用5-FU-MKN45胃癌细胞系模型,观察p53异构体Δ133p53表达与p53基因下游MDM2、cyclin G1基因表达的相关性。方法:使用不同浓度5-FU(50μg/m L,100μg/m...背景与目的:Δ133p53具有促进肿瘤细胞生长的作用,但具体作用机制尚不明确,本实验是采用5-FU-MKN45胃癌细胞系模型,观察p53异构体Δ133p53表达与p53基因下游MDM2、cyclin G1基因表达的相关性。方法:使用不同浓度5-FU(50μg/m L,100μg/m L)作用于人胃癌MKN45细胞系后,MTT法检测细胞抑制率,巢式逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR法)检测Δ133p53、MDM2及cyclin G1 m RNA的表达变化。组间差异用单因素方差分析,组内比较用t检验,两变量相关性用Pearson直线相关分析。结果:MTT结果显示,随着5-FU浓度增高以及作用时间的延长,细胞抑制率逐渐增加,4组实验中50μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞24、48和78 h后抑制率平均值分别为41.10%、54.79%和68.48%,差异有统计学意义(F=45.52,P=0.00)。100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞24、48和78 h后抑制率平均值分别为69.53%、78.21%和86.92%,差异有统计学意义(F=85.58,P=0.00)。50和100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞24 h后抑制率分别为41.10%和69.53%,差异有统计学意义(F=51.29,P=0.00)。50和100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞48 h后抑制率分别为54.79%和78.21%,差异有统计学意义(F=51.29,P=0.00)。50和100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞72 h后抑制率分别为68.48%和86.82%,差异有统计学意义(F=104.91,P=0.00)。RT-PCR结果显示,随着5-FU浓度的增加,胃癌细胞系MKN45细胞中Δ133p53 m RNA、MDM2 m RNA和cyclin G1 m RNA表达量逐渐下降,组间差异具有统计学意义(F值分别为738.532、1 396.607和2 785.560,P=0.00)。相关性分析显示,Δ133p53 m RNA与MDM2 m RNA在胃癌中表达呈正相关(r=0.871,P=0.01),而cyclin G1 m RNA的表达与Δ133p53 m RNA没有明显的相关性(P=0.13)。结论:在5-FU-MKN45模型中,Δ133p53参与的5-FU的抗肿瘤途径与MDM2有关,与cyclin G1无关。展开更多
文摘背景与目的:Δ133p53具有促进肿瘤细胞生长的作用,但具体作用机制尚不明确,本实验是采用5-FU-MKN45胃癌细胞系模型,观察p53异构体Δ133p53表达与p53基因下游MDM2、cyclin G1基因表达的相关性。方法:使用不同浓度5-FU(50μg/m L,100μg/m L)作用于人胃癌MKN45细胞系后,MTT法检测细胞抑制率,巢式逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR法)检测Δ133p53、MDM2及cyclin G1 m RNA的表达变化。组间差异用单因素方差分析,组内比较用t检验,两变量相关性用Pearson直线相关分析。结果:MTT结果显示,随着5-FU浓度增高以及作用时间的延长,细胞抑制率逐渐增加,4组实验中50μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞24、48和78 h后抑制率平均值分别为41.10%、54.79%和68.48%,差异有统计学意义(F=45.52,P=0.00)。100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞24、48和78 h后抑制率平均值分别为69.53%、78.21%和86.92%,差异有统计学意义(F=85.58,P=0.00)。50和100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞24 h后抑制率分别为41.10%和69.53%,差异有统计学意义(F=51.29,P=0.00)。50和100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞48 h后抑制率分别为54.79%和78.21%,差异有统计学意义(F=51.29,P=0.00)。50和100μg/m L 5-FU作用于MKN45细胞72 h后抑制率分别为68.48%和86.82%,差异有统计学意义(F=104.91,P=0.00)。RT-PCR结果显示,随着5-FU浓度的增加,胃癌细胞系MKN45细胞中Δ133p53 m RNA、MDM2 m RNA和cyclin G1 m RNA表达量逐渐下降,组间差异具有统计学意义(F值分别为738.532、1 396.607和2 785.560,P=0.00)。相关性分析显示,Δ133p53 m RNA与MDM2 m RNA在胃癌中表达呈正相关(r=0.871,P=0.01),而cyclin G1 m RNA的表达与Δ133p53 m RNA没有明显的相关性(P=0.13)。结论:在5-FU-MKN45模型中,Δ133p53参与的5-FU的抗肿瘤途径与MDM2有关,与cyclin G1无关。
