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结核分枝杆菌与宿主作用相关蛋白研究进展 被引量：4
1
作者 李瑞芳 管志玉 +1 位作者 付玉荣 伊正君 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期306-309,共4页
结核分枝杆菌(MTB)是第二大致死性感染性疾病的病原体,以呼吸道感染为主要途径,一旦侵入宿主体内即很难被清除。本文主要阐述了结核分枝杆菌侵入人体后有些蛋白可以调节宿主免疫机制、抵御宿主的清除作用,从而与宿主长期共存;其蛋白作... 结核分枝杆菌(MTB)是第二大致死性感染性疾病的病原体,以呼吸道感染为主要途径,一旦侵入宿主体内即很难被清除。本文主要阐述了结核分枝杆菌侵入人体后有些蛋白可以调节宿主免疫机制、抵御宿主的清除作用,从而与宿主长期共存;其蛋白作用机制包括阻止吞噬溶酶体的形成和酸化、抑制自噬体的形成、抗氧化应激、抑制细胞凋亡等。如何打破两者的"共存"现象还需要继续研究。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 蛋白 自噬 氧化应激 凋亡
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基于核酸检测诊断结核分枝杆菌感染的研究进展 被引量：4
2
作者 路晓红 付玉荣 伊正君 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期967-971,共5页
结核病是由结核分枝杆菌感染而引起的传染性疾病。实验室诊断技术的不断进步,为结核病的诊断及治疗提供了多种选择方案。核酸检测是利用分子生物学的理论和技术,通过直接探查核酸的存在状态,从而对人体的状态与疾病做出诊断的方法。近年... 结核病是由结核分枝杆菌感染而引起的传染性疾病。实验室诊断技术的不断进步,为结核病的诊断及治疗提供了多种选择方案。核酸检测是利用分子生物学的理论和技术,通过直接探查核酸的存在状态,从而对人体的状态与疾病做出诊断的方法。近年来,核酸诊断技术的发展极大地推动了实验室的快速诊断,本文就结核杆菌感染后细菌核酸及宿主微小核糖核酸检测方面的新方法、新技术进行综述。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 分子生物学 核酸 微小核糖核酸
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颗粒蛋白前体调控胃癌细胞增殖与衰老的效应研究 被引量：3
3
作者 李媛媛 王红艳 +2 位作者 吴晓燕 宋瑞卉 李敬 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期173-178,共6页
背景与目的:颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)是一种新型生长因子,在细胞迁移、细胞周期进展及肿瘤形成过程中发挥着重要作用。PGRN在多种恶性肿瘤细胞中高表达,不仅参与肿瘤的生长过程,还与肿瘤的发生、演变过程关系密切。本研究旨在探... 背景与目的:颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)是一种新型生长因子,在细胞迁移、细胞周期进展及肿瘤形成过程中发挥着重要作用。PGRN在多种恶性肿瘤细胞中高表达,不仅参与肿瘤的生长过程,还与肿瘤的发生、演变过程关系密切。本研究旨在探讨PGRN在胃癌组织中的表达,及其对胃癌BGC823细胞增殖与衰老的影响。方法:利用免疫组化方法检测胃癌组织及癌旁组织中PGRN的表达;利用实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)干扰胃癌细胞株BGC823中PGRN的表达;通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法、细胞克隆形成和细胞衰老检测实验,探讨PGRN对BGC823细胞增殖与衰老的影响。结果:PGRN在胃癌组织中高表达。PGRN表达降低后,胃癌细胞的增殖与克隆形成能力均显著降低。PGRN-siRNA细胞的克隆形成率为(25.3±3.1)%,对照组细胞的克隆形成率为(72.1±5.7)%,正常组细胞的克隆形成率为(80.3±4.0)%。两两比较,对照组与正常组间差异无统计学意义(P>0.05),实验组与其他两组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。干扰PGRN表达能够明显促进BGC823细胞衰老。PGRN-siRNA细胞衰老阳性率为(27.6±2.1)%,对照组细胞衰老阳性率为(3.2±1.3)%,正常组细胞衰老阳性率为(1.9±1.2)%。两两比较,对照组与正常组间差异无统计学意义(P>0.05),实验组与其他两组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:PGRN可作为新的胃癌标志物,为临床胃癌的靶向治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 胃肿瘤 颗粒蛋白前体 SIRNA 细胞衰老
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TLR7在结核分枝杆菌感染中的作用研究 被引量：2
4
作者 李瑞芳 管志玉 +1 位作者 付玉荣 伊正君 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1223-1226,共4页
目的将TLR7激活基序ssRNA加入结核分枝杆菌感染的小鼠巨噬细胞,研究TLR7被激活后在结核分枝杆菌感染中的作用。方法结核分枝杆菌感染RAW264.7细胞,感染后加入化学合成的TLR7激活基序ssRNA,RT-PCR法检测感染不同时间之后细胞对细菌的吞噬... 目的将TLR7激活基序ssRNA加入结核分枝杆菌感染的小鼠巨噬细胞,研究TLR7被激活后在结核分枝杆菌感染中的作用。方法结核分枝杆菌感染RAW264.7细胞,感染后加入化学合成的TLR7激活基序ssRNA,RT-PCR法检测感染不同时间之后细胞对细菌的吞噬率;无菌TritonX-100裂解细胞,罗氏培养基培养计数活细菌;电镜观察细胞内自噬小体;ELISA检测细胞上清中IL-12、TNF-α与IL-4的含量。结果感染3h后RAW264.7细胞吞噬率最高(P>0.05);处理3h后电镜观察,ssRNA组细胞状态明显好于对照组;36h后ssRNA组IL-12(P<0.05)、IL-4(P<0.05)水平高于对照组,细胞内活菌数量ssRNA组低于对照组(P<0.05),48h后IL-4(P<0.05)水平下降,TNF-α的含量上升(P<0.05)。结论TLR7能通过诱导细胞自噬、调节细胞因子产生等机制增强细胞杀结核分枝杆菌的能力,TLR7激活基序ssRNA可以用于治疗结核分枝杆菌感染。 展开更多
关键词 TLR7 ssRNA 小鼠巨噬细胞 结核分枝杆菌
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细菌毒素-抗毒素系统研究进展 被引量：2
5
作者 楚海荣 付玉荣 伊正君 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期271-274,共4页
毒素-抗毒素系统(TA)普遍存在于细菌和古细菌的染色体和质粒中,包括人类致病菌如结核分枝杆菌等,此系统由2个共表达的基因组成,分别编码毒素蛋白和抗毒素,毒素通常抑制细菌生长,而抗毒素则可中和毒素的毒性对细菌起保护作用。根据抗毒... 毒素-抗毒素系统(TA)普遍存在于细菌和古细菌的染色体和质粒中,包括人类致病菌如结核分枝杆菌等,此系统由2个共表达的基因组成,分别编码毒素蛋白和抗毒素,毒素通常抑制细菌生长,而抗毒素则可中和毒素的毒性对细菌起保护作用。根据抗毒素的性质和TA的组成,目前已经发现有5型TA,TA中毒素对细菌发挥毒性作用的机制不同,不同TA之间又存在着错综复杂的交互作用,而且此系统在细菌中发挥的作用也一直是近年来学者们研究的热点。现对细菌TA的研究现状进行综述。 展开更多
关键词 毒素-抗毒素系统 条件协调效应 细菌持留感染 MTB 综述
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潜伏结核感染的分子机制研究进展 被引量：3
6
作者 张波 伊正君 付玉荣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期990-992,共3页
潜伏结核感染是活动性结核病的主要来源,也是结核病防控的关键,但是潜伏结核感染的机制尚未完全明确。近年来,在分子水平上对潜伏结核感染所做的大量研究表明,许多重要分子参与了潜伏结核感染的发生过程,进一步阐释了潜伏结核感染的发... 潜伏结核感染是活动性结核病的主要来源,也是结核病防控的关键,但是潜伏结核感染的机制尚未完全明确。近年来,在分子水平上对潜伏结核感染所做的大量研究表明,许多重要分子参与了潜伏结核感染的发生过程,进一步阐释了潜伏结核感染的发生机制,为潜伏结核感染诊断、治疗及新疫苗的研发开辟了新方向。现就结核潜伏感染的分子机制研究进展进行综述。 展开更多
关键词 结核 潜伏感染 分子机制
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狂犬病病毒核酸诊断技术研究进展 被引量：2
7
作者 路静 伊正君 付玉荣 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第12期1310-1315,共6页
狂犬病是由狂犬病病毒引起的人兽共患烈性传染病,发病后死亡率几乎为100%。近年来,我国狂犬病的发病率呈上升趋势,急需一种快速、简便、经济、准确、易于推广的实验室诊断方法。文中从基于PCR方法的核酸诊断技术、依赖核酸序列扩增技术... 狂犬病是由狂犬病病毒引起的人兽共患烈性传染病,发病后死亡率几乎为100%。近年来,我国狂犬病的发病率呈上升趋势,急需一种快速、简便、经济、准确、易于推广的实验室诊断方法。文中从基于PCR方法的核酸诊断技术、依赖核酸序列扩增技术、环介等温扩增技术、基因芯片技术等方面对目前国内外狂犬病病毒核酸诊断技术作一综述,并分析各种方法的优点和缺点,为狂犬病的临床快速诊断提供参考依据,以更好地预防和控制狂犬病。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 核酸诊断 依赖核酸序列扩增技术 环介等温扩增技术 基因芯片技术
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重组小鼠白细胞介素-27融合蛋白多克隆抗体的制备及鉴定
8
作者 路晓红 付玉荣 伊正君 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期185-190,共6页
目的:制备重组小鼠白细胞介素-27(interleukin-27,IL-27)融合蛋白的多克隆抗体并鉴定其活性。方法:用反转录PCR从小鼠脾细胞扩增出EB病毒诱导基因3(EBI3)和p28成熟肽基因片段,采用重叠延伸PCR用(Gly4Ser)3接头将2个片段进行连接,将得到... 目的:制备重组小鼠白细胞介素-27(interleukin-27,IL-27)融合蛋白的多克隆抗体并鉴定其活性。方法:用反转录PCR从小鼠脾细胞扩增出EB病毒诱导基因3(EBI3)和p28成熟肽基因片段,采用重叠延伸PCR用(Gly4Ser)3接头将2个片段进行连接,将得到的小鼠IL-27单链融合基因片段克隆于p ET-32a(+)载体。阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白表达,利用SDS-PAGE与Western blot鉴定目的蛋白的表达。以纯化的IL-27融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗小鼠IL-27融合蛋白的多克隆抗体,利用Western blot和ELISA进行特异性及效价分析。结果:从小鼠脾细胞总RNA中扩增得到IL-27单链融合基因经测序与预期序列一致;在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导,SDS-PAGE显示表达出的融合蛋白相对分子质量(molecular weight,Mr)约67 000;Western blot结果表明该融合蛋白能与抗6×His的单克隆抗体发生反应;该蛋白免疫新西兰大白兔后获得抗血清,Western blot结果显示该血清可以特异性地与IL-27融合蛋白结合,ELISA测定该多克隆抗体的效价可以达到1∶3 200。结论:在大肠杆菌中成功表达出小鼠IL-27融合蛋白,并制备出效价较高、特异性较好的兔抗小鼠IL-27多克隆抗体。 展开更多
关键词 小鼠白细胞介素-27 重叠延伸PCR 融合蛋白 原核表达 多克隆抗体
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不同宿主大肠杆菌对15种抗生素抗药性差异研究
9
作者 李云 蔡亚娜 +4 位作者 张士栋 王庆艳 杜加法 刘玉庆 赵淑梅 《山东农业科学》 2009年第4期95-98,共4页
采用96孔板微量肉汤稀释法,测定SPF鸡、商品肉鸡、鸡场饲养员、医院病人等不同宿主粪样140株大肠杆菌对15种抗生素的抗药性,比较不同用药环境下大肠杆菌的抗药性差异。结果表明:SPF鸡分离菌株的抗药性最低,平均抗药性频率为46.08%,大部... 采用96孔板微量肉汤稀释法,测定SPF鸡、商品肉鸡、鸡场饲养员、医院病人等不同宿主粪样140株大肠杆菌对15种抗生素的抗药性,比较不同用药环境下大肠杆菌的抗药性差异。结果表明:SPF鸡分离菌株的抗药性最低,平均抗药性频率为46.08%,大部分菌株对8～9种抗生素存在低水平抗药性。医院病人大肠杆菌平均抗药性频率达到67.47%,多数菌株对12～13种抗生素产生抗药性。由于商品鸡场大量使用抗生素,鸡场饲养员和肉鸡分离株平均抗药性频率远高于SPF鸡,分别达80.00%和72.27%,并对12～13种抗生素产生抗药性,其中对磺胺二甲嘧啶、利福平的抗药性频率都在90%以上。建议测定区域使用抗药性频率低于50%的抗生素:头孢唑啉、头孢噻呋、硫酸黏菌素、阿米卡星。 展开更多
关键词 大肠杆菌 抗生素 抗药性传播
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白血病患者行异基因骨髓移植术后并发移植物抗宿主病眼部损害一例 被引量：1
10
作者 刘丽梅 王超 +2 位作者 张亚丽 王晓真 张少斌 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期27-28,共2页
患者，男，41岁，因右眼眼红、畏光1d于2016年3月27日至潍坊眼科医院就诊。患者自诉常年眼干、无泪，每日点用羧甲基纤维素钠滴眼液（美国艾尔建公司）10支。
关键词 白血病患者 移植物抗宿主病 异基因骨髓移植 眼部损害 术后并发 羧甲基纤维素钠 医院就诊 滴眼液
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