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慢病毒介导的人PLK1RNA干扰对食管鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及机制 被引量:2
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作者 刘晓影 陈丽梅 +5 位作者 张宝刚 冯卫国 王守训 杜长青 刘顺梅 赵春玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1528-1532,共5页
目的研究靶向人PLK1的RNA干扰对食管鳞癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响及其机制。方法介导PLK1 siRNA表达的重组慢病毒感染食管鳞癌细胞,通过荧光定量PCR和Western blot检测PLK1基因的干扰效率;应用裸鼠皮下移植瘤模型,进行慢病毒载体介导P... 目的研究靶向人PLK1的RNA干扰对食管鳞癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响及其机制。方法介导PLK1 siRNA表达的重组慢病毒感染食管鳞癌细胞,通过荧光定量PCR和Western blot检测PLK1基因的干扰效率;应用裸鼠皮下移植瘤模型,进行慢病毒载体介导PLK1基因的RNA干扰治疗,研究PLK1对体内食管鳞癌移植瘤生长的影响,并通过瘤组织免疫组化检测Caspase-3和CD31的表达及计算新生血管密度的方法,探讨PLK1影响移植瘤生长的相关机制。结果介导PLK1 siRNA表达的重组慢病毒能明显抑制食管鳞癌细胞中PLK1的表达及裸鼠体内移植瘤的生长。下调的PLK1可能通过调控Caspase-3的表达而诱导食管鳞癌细胞凋亡,通过抑制食管鳞癌的血管生成而抑制了食管鳞癌的恶性进展。结论 PLK1促进了食管鳞癌的恶性生长。PLK1有可能是治疗食管鳞癌的一个新靶点。 展开更多
关键词 PLK1基因 RNA干扰 慢病毒载体 食管鳞癌 Caspase-3 CD31 血管生成
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交联葡聚糖结合无花果蛋白酶的制备与性质 被引量:5
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作者 任维栋 耿秀芳 孙风祥 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第6期661-665,共5页
本文报道了将Sephadgx G-200与对β-硫酸酯乙砜基苯胺(SESA)首先醚化制备对氨基苯砜乙基交联葡聚糖(ABSE-Sephadex G-200),然后经重氮化固定无花果蛋白酶。固定化酶的活力回收达69%。BANA对该酶固定化过程中的活性变化有保护作用。天... 本文报道了将Sephadgx G-200与对β-硫酸酯乙砜基苯胺(SESA)首先醚化制备对氨基苯砜乙基交联葡聚糖(ABSE-Sephadex G-200),然后经重氮化固定无花果蛋白酶。固定化酶的活力回收达69%。BANA对该酶固定化过程中的活性变化有保护作用。天然酶与固定化酶都具有良好的耐热性,在69°~70℃,80min固定化酶较天然酶稳定。 用苯甲酰-DL-精氨酰-β-荼胺(BANA)为底物,在半胱氨酸存在下,测定了两种形式酶的动力学性质。在pH7.7的磷酸盐缓冲系统中,37℃,天然无花果蛋白酶的K_m=0.32mol/L;在间歇振摇下固定化酶的表观K′m=1.02mmol/L。最适pH无明显改变,均为pH7.7。 展开更多
关键词 无花果蛋白酶 固定化 制备
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shRNA对A549细胞survivin基因表达及紫杉醇敏感性的影响 被引量:1
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作者 董俊红 王振明 +2 位作者 付新华 王守训 黄焕生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期589-592,共4页
目的观察靶向survivin基因的短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)对人肺腺癌细胞A549生物学行为及紫杉醇敏感性的影响。方法将靶向survivin的基因片段插入载体后构建重组质粒,用转染试剂FuGENE(HD将其导入A549细胞,RT-PCR及Western blot... 目的观察靶向survivin基因的短发夹RNA(shorthairpin RNA,shRNA)对人肺腺癌细胞A549生物学行为及紫杉醇敏感性的影响。方法将靶向survivin的基因片段插入载体后构建重组质粒,用转染试剂FuGENE(HD将其导入A549细胞,RT-PCR及Western blot分析转染前后survivin基因的表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,MTT法检测转染后A549细胞对紫杉醇的敏感性变化。结果成功构建重组质粒。与对照组相比,转染重组质粒后,survivin基因的表达明显降低,细胞凋亡率增加。转染前紫杉醇抑制A549细胞的IC50为转染后的11.9倍,两者比较,差异有显著性(P<0.05)。结论靶向survivin的shRNA能下调survivin基因表达,诱导细胞凋亡,增强A549细胞对紫杉醇的敏感性。 展开更多
关键词 SHRNA SURVIVIN 紫杉醇 肺腺癌细胞
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