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P2X7受体与乳腺癌发生发展关系的研究进展 被引量:3
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作者 罗淑萍 张云芳 +1 位作者 彭效祥 赵荣兰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第7期760-764,共5页
P2X7受体(P2X7 purinergic receptor,P2X7R)属于双跨膜阳离子通道型受体,在体内受ATP门控,激活后可产生诸如阳离子通道开放、信号通路激活、炎症介质释放和细胞凋亡等效应,在多种肿瘤及炎症性疾病的发生发展过程中发挥重要作用。研究表... P2X7受体(P2X7 purinergic receptor,P2X7R)属于双跨膜阳离子通道型受体,在体内受ATP门控,激活后可产生诸如阳离子通道开放、信号通路激活、炎症介质释放和细胞凋亡等效应,在多种肿瘤及炎症性疾病的发生发展过程中发挥重要作用。研究表明,P2X7R在乳腺癌中表达异常,并通过激活一系列信号通路,影响乳腺癌的发生和发展;多种microRNA也可通过调节P2X7R基因的表达而促进乳腺癌的发生发展。文章对P2X7R的研究进展及其异常表达与乳腺癌的关系进行了综述。 展开更多
关键词 P2X7受体 乳腺癌 三磷酸腺苷 MICRORNA
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P2X7受体胞外段蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定
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作者 贾丽娜 彭效祥 +3 位作者 李明萱 罗淑萍 张云芳 赵荣兰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第19期2369-2374,共6页
目的:克隆嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)胞外段编码序列,体外表达和鉴定重组P2X7R胞外段蛋白。方法:采用德泰生物密码子优化软件MaxCodon^TM Optimization Program(V13),对P2X7R胞外段蛋白氨基酸编码序列进行优化并设计PCR扩增引物。采... 目的:克隆嘌呤能离子通道型受体7(P2X7R)胞外段编码序列,体外表达和鉴定重组P2X7R胞外段蛋白。方法:采用德泰生物密码子优化软件MaxCodon^TM Optimization Program(V13),对P2X7R胞外段蛋白氨基酸编码序列进行优化并设计PCR扩增引物。采用重叠PCR扩增目标基因,通过限制性酶切位点NdeⅠ和HindⅢ,将P2X7R胞外段编码序列定向插入原核表达载体pET30a(+),构建pET30a-P2X7R重组表达质粒,转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3+)表达菌种中,进行融合表达,诱导剂异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达。重组蛋白含6×His纯化标签,亲和层析(Ni-IDA树脂)纯化后,SDS-PAGE凝胶电泳和Western blot鉴定纯化产物。结果:PCR扩增的P2X7R胞外段蛋白编码序列长度为885 bp,成功构建重组pET30a-P2X7R质粒,并转化至E.coli BL21(DE3+)菌株中。融合型表达的重组蛋白分子量约为34 kD,可被抗His标签单克隆抗体特异性识别。结论:成功克隆P2X7R胞外段蛋白编码序列、诱导表达并纯化了重组P2X7R胞外段蛋白,为今后制备抗人P2X7R胞外段蛋白的单克隆抗体奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 P2X7R 重组蛋白 克隆 融合表达
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