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mOX40-Ig的表达及其生物学活性的初步研究: 1; 作者刘艳菲林志娟 +3 位作者冯永堂许传武史琳苗乃法《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期126-129,共4页; 目的:构建pcDNA3.1-mOX40-Ig真核表达载体,转染CHO细胞进行稳定表达,获得有生物学活性的mOX40-Ig融合蛋白。方法:RT-PCR法扩增获得hIgG1Fc段基因,构建pcDNA3.1-hIgG1Fc重组质粒并经测序证实。从本室保存的pIRES2-EGFP-mOX40重组质粒中PC... 展开更多; 关键词 OX40 mOX40-Ig CHO细胞真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

内皮抑素在兔VX2肝移植瘤介入治疗中的应用价值被引量：4: 2; 作者蹇兆成孙业全 +4 位作者王滨梁淑娟刘艳白旭明宁厚法《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第4期285-289,共5页; 目的探讨内皮抑素在兔VX2肝移植瘤介入治疗中的应用价值。方法建立兔肝移植瘤模型,随机分为对照组(NS,10只),TACE组(Lipiodol+ADM,10只)和内皮抑素组(Lipiodol+ADM+ES,10只),多排螺旋CT测量肿瘤大小,计算肿瘤增长率(GR);术后1周取出病... 展开更多; 关键词肝肿瘤实验性化学栓塞治疗性新生血管化病理性动物实验; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠IL-1β在H22细胞的表达及对NK细胞杀伤活性的影响被引量：4: 3; 作者肖伟玲梁淑娟 +2 位作者牟东珍王雪净吴慧娜《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1130-1132,1135,共4页; 目的:重组表达小鼠IL-1β全长基因,转染H22肝癌细胞,分析对NK细胞杀伤活性的影响。方法:构建小鼠IL-1β重组表达载体pIRES2-EGFP-mIL-1β,利用jetPEI转染H22肝癌细胞,RT-PCR和激光扫描共聚焦显微镜分析IL-1β重组载体的表达,MTT方法分... 展开更多; 关键词 IL-1Β NK细胞天然免疫肝癌; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠OX40稳定表达细胞株的构建及其对B细胞促分化作用的研究被引量：2: 4; 作者原江水冯永堂 +4 位作者王菲宫伟雁邸大琳任杰苗乃法《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期767-770,共4页; 目的:构建稳定表达小鼠OX40的细胞株HUVEC,并探讨其对B细胞的促增殖作用。方法:从ConA活化的小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR法扩增小鼠OX40的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体中,经PCR、酶切和测序分析,进而构建pIRES2-EGFP-OX40... 展开更多; 关键词 OX40 绿荧光蛋白表达载体稳定表达增殖; 在线阅读下载PDF 职称材料

人IL-1β重组表达载体在肝癌细胞的表达及对其NK细胞杀伤敏感性的影响被引量：2: 5; 作者梁淑娟潘继红 +2 位作者牟东珍肖伟玲鞠吉雨《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期688-692,共5页; 目的:构建全长人IL-1β真核表达载体,转染H7402肝癌细胞,分析对其NK细胞杀伤敏感性的影响。方法:RT-PCR法扩增人IL-1β基因全长编码序列,经T-A克隆,构建pIRES2-EGFP-IL-1β重组表达载体,采用阳离子聚合物jetPEI的方法转染H7402肝癌细胞,... 展开更多; 关键词 IL-1Β 肝癌细胞 NK细胞天然免疫逃逸促炎性细胞因子; 在线阅读下载PDF 职称材料

IL-21在肝癌细胞株H22细胞中的表达及其活性被引量：1: 6; 作者王丽娜鞠吉雨 +4 位作者梁淑娟牟东珍邸大琳孙萍苗乃法《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期174-178,共5页; 目的:构建小鼠IL-21(mIL-21)真核表达载体mIL-21-pcDNA3.1,转染肝癌H22细胞,探讨其生物学活性。方法:RT-PCR法扩增mIL-21基因,构建mIL-21真核表达载体mIL-21-pcDNA3.1,并经DNA测序证实。脂质体法介导mIL-21-pcDNA3.1转染H22细胞,RT-PCR... 展开更多; 关键词肝肿瘤 mIL-21基因 H22细胞株真核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

IL-1β反义RNA在HepG2细胞的表达及对NK细胞杀伤活性的影响: 7; 作者梁淑娟肖伟玲 +2 位作者牟东珍吴慧娜王雪净《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期719-722,共4页; 目的:构建IL-1β反义RNA真核表达载体,转染HepG2细胞,探讨阻断IL-1β作用后对其NK细胞杀伤敏感性的作用。方法:RT-PCR方法扩增两段基因序列IL-1β1(17-331,315bp)和IL-1β2(246-505,260bp),经T-A克隆后构建反义RNA表达载体pcDNA3.0-anti... 展开更多; 关键词肝癌细胞 IL-1Β 反义RNA NK细胞天然免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名mOX40-Ig的表达及其生物学活性的初步研究: 1; 作者刘艳菲林志娟冯永堂许传武史琳苗乃法; 机构潍坊医学院分子免疫学实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期126-129,共4页; 文摘目的:构建pcDNA3.1-mOX40-Ig真核表达载体,转染CHO细胞进行稳定表达,获得有生物学活性的mOX40-Ig融合蛋白。方法:RT-PCR法扩增获得hIgG1Fc段基因,构建pcDNA3.1-hIgG1Fc重组质粒并经测序证实。从本室保存的pIRES2-EGFP-mOX40重组质粒中PCR扩增mOX40胞外段,将其插入pcDNA3.1-hIgG1Fc重组质粒中构建pcDNA3.1-mOX40-Ig真核表达载体。脂质体法转染CHO细胞获得稳定表达,用RT-PCR与ELISA法检测其表达,蛋白A亲和纯化后,SDS-PAGE进行鉴定。3H-TdR掺入法研究OX40信号对B细胞的体外促增殖作用。结果:测序证实hIgG1Fc段、mOX40胞外段及mOX40-Ig基因序列正确,RT-PCR与ELISA证实mOX40-Ig的表达,SDS-PAGE证实其为mOX40-Ig融合蛋白,3H-TdR掺入法显示mOX40-Ig在体外能有效地促进B细胞增殖。结论:成功地构建pcDNA3.1-mOX40-Ig真核表达载体,并获得有生物学活性的mOX40-Ig融合蛋白的稳定表达,为进一步开展OX40相关领域的横向应用研究奠定了基础。; 关键词 OX40 mOX40-Ig CHO细胞真核表达; Keywords OX40 mOX40-Ig CHO cell line eukaryotic expression; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名内皮抑素在兔VX2肝移植瘤介入治疗中的应用价值被引量：4: 2; 作者蹇兆成孙业全王滨梁淑娟刘艳白旭明宁厚法; 机构山东省潍坊医学院附属医院影像中心潍坊医学院分子免疫学重点实验室; 出处《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第4期285-289,共5页; 基金山东省科技发展计划项目(2007GG30002032) 山东省卫生系统杰出学科带头人基金(2006-39) +1 种基金山东省教育厅重点项目(J04E01) 潍坊医学院青年教师科研启动基金(KQ07021); 文摘目的探讨内皮抑素在兔VX2肝移植瘤介入治疗中的应用价值。方法建立兔肝移植瘤模型,随机分为对照组(NS,10只),TACE组(Lipiodol+ADM,10只)和内皮抑素组(Lipiodol+ADM+ES,10只),多排螺旋CT测量肿瘤大小,计算肿瘤增长率(GR);术后1周取出病理标本,利用免疫组化染色及半定量RT-PCR法分别检测残瘤组织微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)表达。结果3组肿瘤增长率分别为对照组(270.86±148.94)%,TACE组(-8.91±21.77)%,内皮抑素组(-20.40±36.07)%,3组间相互比较,对照组呈明显正增长,与其余2组比较差异均有统计学意义(P<0.01),而TACE组与内皮抑素组之间差异无统计学意义(P>0.05);各组的MVD值分别为80.00±17.14(对照组)、84.22±16.45(TACE组)和57.00±13.26(内皮抑素组),内皮抑素组MVD值最低,与另外2组比较差异均有统计学意义(P<0.05),对照组和TACE组之间差异性不明显(P>0.05);VEGF165mRNA:对照组为(0.85±0.056),TACE组为(1.10±0.087),内皮抑素组为(0.72±0.065),TACE组表达水平最高,与其余2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论兔VX2肝移植瘤的介入治疗中应用内皮抑素后,肿瘤明显缩小,肿瘤组织VEGF的表达减低,MVD的分布减少,提高了肿瘤的治疗效果。; 关键词肝肿瘤实验性化学栓塞治疗性新生血管化病理性动物实验; Keywords liver neoplasm, experimental chemoembolization, therapeutic angiogenesis animal experiment; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠IL-1β在H22细胞的表达及对NK细胞杀伤活性的影响被引量：4: 3; 作者肖伟玲梁淑娟牟东珍王雪净吴慧娜; 机构潍坊医学院分子免疫学重点实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1130-1132,1135,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30772497) 教育部科学技术研究重点项目(205090) +1 种基金山东省卫生高层次人才1020工程专项基金资助项目(2006); 文摘目的:重组表达小鼠IL-1β全长基因,转染H22肝癌细胞,分析对NK细胞杀伤活性的影响。方法:构建小鼠IL-1β重组表达载体pIRES2-EGFP-mIL-1β,利用jetPEI转染H22肝癌细胞,RT-PCR和激光扫描共聚焦显微镜分析IL-1β重组载体的表达,MTT方法分析转染前后,野生型小鼠脾脏NK细胞对H22细胞杀伤活性的变化。结果:RT-PCR扩增出小鼠IL-1β,长度约843bp。纯化的PCR产物与pIRES2-EG-FP同时经XhoI和EcoRI双酶切,在T4连接酶作用下连接,转化大肠杆菌,提取质粒经PCR、限制性酶谱分析(XhoI+EcoRI)和DNA序列测定后,确认获得重组表达载体pIRES2-EGFP-mIL-1β。将该质粒转染至H22小鼠肝癌细胞中,RT-PCR和荧光观察证实,H22细胞能表达高水平IL-1β重组表达载体,与转染空载体的对照组细胞相比,IL-1β转基因后H22细胞对NK92细胞杀伤抵抗性明显增强,同时野生型小鼠脾脏NK细胞对pIRES2-EGFP-mIL-1β转基因细胞的杀伤活性明显下降,效靶比40:1时下降了约10%。结论:IL-1β能够明显增强H22肝癌细胞对NK细胞杀伤的抵抗性,可能是肝癌细胞借以逃逸天然免疫应答的重要机制。; 关键词 IL-1Β NK细胞天然免疫肝癌; Keywords IL-1β NK cell innate immunity hepatoma; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠OX40稳定表达细胞株的构建及其对B细胞促分化作用的研究被引量：2: 4; 作者原江水冯永堂王菲宫伟雁邸大琳任杰苗乃法; 机构潍坊医学院分子免疫学实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期767-770,共4页; 文摘目的:构建稳定表达小鼠OX40的细胞株HUVEC,并探讨其对B细胞的促增殖作用。方法:从ConA活化的小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR法扩增小鼠OX40的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体中,经PCR、酶切和测序分析,进而构建pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体。以脂质体法转染HUVEC,经G418筛选后,用流式细胞术检测OX40分子的表达。采用3H-TdR掺入法,研究OX40信号对体外培养的B细胞的促分化作用。结果:构建了OX40基因的真核表达载体。经PCR、酶切和测序证实,插入的目的片段与GenBank登录的小鼠OX40cDNA序列完全一致。用G418筛选后,获得能稳定表达小鼠OX40蛋白的HUVEC细胞。3H-TdR掺入法结果显示,小鼠OX40稳定表达的细胞HUVEC对体外培养的B细胞具有促增殖、分化的作用。OX40/OX40L信号与CD40/CD40L信号具有协同作用。结论:成功地构建小鼠OX40稳定表达地细胞,OX40对B细胞具有促增殖、分化作用。; 关键词 OX40 绿荧光蛋白表达载体稳定表达增殖; Keywords OX40 pIRES2-EGFP vector expression proliferation; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人IL-1β重组表达载体在肝癌细胞的表达及对其NK细胞杀伤敏感性的影响被引量：2: 5; 作者梁淑娟潘继红牟东珍肖伟玲鞠吉雨; 机构山东省潍坊医学院分子免疫学重点实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期688-692,共5页; 基金山东省中青年科学家科研奖励基金(2004BSB14074) 教育部科学研究项目重点项目(205090) 山东省卫生系统重点科技人才基金资助; 文摘目的:构建全长人IL-1β真核表达载体,转染H7402肝癌细胞,分析对其NK细胞杀伤敏感性的影响。方法:RT-PCR法扩增人IL-1β基因全长编码序列,经T-A克隆,构建pIRES2-EGFP-IL-1β重组表达载体,采用阳离子聚合物jetPEI的方法转染H7402肝癌细胞,G418筛选获得稳定表达的细胞克隆,RT-PCR分析IL-1β的表达水平,MTT方法分析转染前后NK细胞对肝癌细胞杀伤活性的变化。结果:从LPS处理的人外周PBMCs总RNA中扩增出IL-1β(大小约829 bp),先构建pMD18-IL-1β克隆载体,DNA序列鉴定正确后,利用Pfu DNA聚合酶将IL-1β基因亚克隆到pIRES2-EGFP中,构建真核表达载体pIRES2-EGFP-IL-1β,经PCR、限制性酶谱分析(BamHⅠ和EcoRⅠ)和DNA序列测定正确后,将其转染H7402肝癌细胞,G418筛选获得稳定表达IL-1β的细胞,与转染空载体的细胞相比,该细胞对NK-92细胞杀伤的敏感性显著降低,效靶比10∶1时下降了约30%。结论:促炎性细胞因子IL-1β能够显著增强肝癌细胞对NK细胞杀伤的抵抗性,可能是导致肝癌细胞发生天然免疫逃逸的重要机制。; 关键词 IL-1Β 肝癌细胞 NK细胞天然免疫逃逸促炎性细胞因子; Keywords IL-β Hepatoma NK cells Innate immunity Proinflammatory cytokine; 分类号 R392.1 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名IL-21在肝癌细胞株H22细胞中的表达及其活性被引量：1: 6; 作者王丽娜鞠吉雨梁淑娟牟东珍邸大琳孙萍苗乃法; 机构潍坊医学院分子免疫学实验室; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期174-178,共5页; 基金潍坊市科技局立项计划(No.200702038)~~; 文摘目的:构建小鼠IL-21(mIL-21)真核表达载体mIL-21-pcDNA3.1,转染肝癌H22细胞,探讨其生物学活性。方法:RT-PCR法扩增mIL-21基因,构建mIL-21真核表达载体mIL-21-pcDNA3.1,并经DNA测序证实。脂质体法介导mIL-21-pcDNA3.1转染H22细胞,RT-PCR和Western boltting鉴定其表达,MTT法检测mIL-21-pcDNA3.1对T细胞增殖和NK细胞杀伤活性的影响。结果:DNA序列分析证实构建的mIL-21-pcDNA3.1正确无误,RT-PCR和Western boltting证实转染的H22细胞中有mIL-21的表达。MTT法显示,转染mIL-21的H22细胞培养上清刺激T细胞增殖的刺激指数(stimulation index,SI)为3.412±0.312,联合ConA的刺激指数为4.673±0.450,均显著高于转染空质粒组的1.465±0.103和未转染组的1.447±0.245,(P<0.01)。转染mIL-21的H22细胞培养上清NK细胞杀伤率为(81.66±4.26)%,显著高于转染空质粒组的(34.74±5.52)%和未转染对照组的(33.61±1.42)%。结论:mIL-21-pcDNA3.1载体在H22细胞中的表达可显著增强T细胞增殖及NK细胞的杀伤功能,为其在抗肝癌治疗中的应用奠定了基础。; 关键词肝肿瘤 mIL-21基因 H22细胞株真核表达; Keywords live neoplasms mIL-21 H22 cell line eukaryotic expression; 分类号 R730.3 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名IL-1β反义RNA在HepG2细胞的表达及对NK细胞杀伤活性的影响: 7; 作者梁淑娟肖伟玲牟东珍吴慧娜王雪净; 机构潍坊医学院分子免疫学重点实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期719-722,共4页; 基金山东省中青年科学家科研奖励基金(2004BSB14074) 教育部科学研究项目重点项目(205090) 山东省卫生系统重点科技人才基金(2006年); 文摘目的:构建IL-1β反义RNA真核表达载体,转染HepG2细胞,探讨阻断IL-1β作用后对其NK细胞杀伤敏感性的作用。方法:RT-PCR方法扩增两段基因序列IL-1β1(17-331,315bp)和IL-1β2(246-505,260bp),经T-A克隆后构建反义RNA表达载体pcDNA3.0-antiIL1β1和pcDNA3.0-anti-IL1β2。采用阳离子聚合物(jetPEI)的方法转染HepG2肝癌细胞,RT-PCR方法检测反义RNA的表达水平,胞内因子染色的方法分析IL-1的表达水平,MTT方法分析NK-92细胞对HepG2杀伤活性的变化。结果:以LPS刺激的人PBMC总RNA为模板,RT-PCR扩增得到两个约315bp和260bp的基因片段,先构建克隆载体pMD18T-IL-1β1和pMD18T-IL-1β2,质粒PCR、XhoI酶切和DNA序列分析正确后,利用PfuDNA聚合酶进行PCR,产物纯化后经EcoRI、XhoI双酶切,反向插入pcDNA3.0,获得人IL-1β反义RNA真核表达载体pcDNA3.0-antiIL-1β1和pcDNA3.0-antiIL-1β2。PCR、PstI酶切和DNA序列分析正确后,将其分别转染HepG2细胞,RT-PCR检测显示HepG2细胞能够高水平表达两种反义RNA,胞内因子染色发现IL-1β的表达水平明显下降,同时该细胞对NK-92杀伤的敏感性明显升高,其中IL-1β1反义RNA的作用更为显著,效靶比10∶1时,NK细胞对HepG2的杀伤活性提高了约20%。结论:以促炎性细胞因子IL-1β为靶点进行干预,能够有效地下调肝癌细胞对NK细胞杀伤的抵抗能力。; 关键词肝癌细胞 IL-1Β 反义RNA NK细胞天然免疫; Keywords hepatoma IL-1β antisense RNA NK cell innate immunity; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	mOX40-Ig的表达及其生物学活性的初步研究	刘艳菲林志娟冯永堂许传武史琳苗乃法	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	内皮抑素在兔VX2肝移植瘤介入治疗中的应用价值	蹇兆成孙业全王滨梁淑娟刘艳白旭明宁厚法	《介入放射学杂志》 CSCD 北大核心	2009	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	小鼠IL-1β在H22细胞的表达及对NK细胞杀伤活性的影响	肖伟玲梁淑娟牟东珍王雪净吴慧娜	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	小鼠OX40稳定表达细胞株的构建及其对B细胞促分化作用的研究	原江水冯永堂王菲宫伟雁邸大琳任杰苗乃法	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2005	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人IL-1β重组表达载体在肝癌细胞的表达及对其NK细胞杀伤敏感性的影响	梁淑娟潘继红牟东珍肖伟玲鞠吉雨	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	IL-21在肝癌细胞株H22细胞中的表达及其活性	王丽娜鞠吉雨梁淑娟牟东珍邸大琳孙萍苗乃法	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	IL-1β反义RNA在HepG2细胞的表达及对NK细胞杀伤活性的影响	梁淑娟肖伟玲牟东珍吴慧娜王雪净	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料