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沉默JAG1基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响
被引量:
11
1
作者
袁磊
李伯和
+3 位作者
时冉冉
高丽
宋金玲
王建国
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期262-267,共6页
目的:探究沉默Jagged 1(JAG1)基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响及其分子生物学机制。方法:用已构建的pRS-JAG1重组质粒转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用Western blotting方法检测重组质粒对JAG1蛋白表达的影响;MTT比色法...
目的:探究沉默Jagged 1(JAG1)基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响及其分子生物学机制。方法:用已构建的pRS-JAG1重组质粒转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用Western blotting方法检测重组质粒对JAG1蛋白表达的影响;MTT比色法测定沉默JAG1对细胞生长的抑制情况;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;蛋白印记分析细胞周期蛋白1(cyclin D1)、p21CIP1/WAF1、p27KIP1、p-Rb、Bcl-2、Bax、Bcl-xL和cleaved caspase-3蛋白水平的变化。结果:Western blotting结果证实重组质粒可在72h内有效抑制JAG1蛋白表达;人乳腺癌MDA-MB-231细胞JAG1被沉默后,细胞的生长速度明显减慢,细胞明显阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率显著升高(P<0.05),cyclin D1、p-Rb、Bcl-2和Bcl-xL蛋白水平被下调(P<0.05),而p21CIP1/WAF1、p27KIP1、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论:沉默JAG1可有效抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并诱导其凋亡。本研究为以JAG1为分子靶点的三阴乳腺癌治疗提供实验依据。
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关键词
JAG1蛋白
短发夹RNA
细胞周期
细胞凋亡
MDA—MB-231细胞
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职称材料
肿瘤抗原PIWIL2的HLA-A2限制性CTL表位鉴定
被引量:
7
2
作者
时冉冉
李伯和
+3 位作者
袁磊
付陈增
陈娇
王建国
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期1315-1319,共5页
目的:鉴定肿瘤抗原PIWIL2的人类白细胞抗原A2(HLA-A2)限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位。方法:首先运用RT-PCR、Western blot方法检测PIWIL2在肿瘤细胞系MCF-7、SW480和HT-29中的表达情况,然后通过BIMAS、Rank Pep、Net MHC、Net CTL1....
目的:鉴定肿瘤抗原PIWIL2的人类白细胞抗原A2(HLA-A2)限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位。方法:首先运用RT-PCR、Western blot方法检测PIWIL2在肿瘤细胞系MCF-7、SW480和HT-29中的表达情况,然后通过BIMAS、Rank Pep、Net MHC、Net CTL1.2及IEDB软件预测打分来选取PIWIL2的HLA-A2限制性的表位。候选表位肽通过标准的Fmoc化学合成法合成,结合力实验用于检测候选表位与T2A2细胞表面HLA-A2分子的结合能力,ELISPOT实验检测候选表位肽诱导CTL分泌IFN-γ的能力,体外细胞毒性实验检测候选肽诱导CTL的能力。结果:PIWIL2在肿瘤细胞系MCF-7、SW480和HT-29中均有表达。候选肽P485、P493、P965具有中等结合力。ELISPOT实验结果显示表位肽P485和P965诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力。细胞毒性实验结果显示表位肽P485和P965对MCF-7细胞均有一定的杀伤作用。结论:表位肽P485和P965是优秀的PIWIL2抗原HLAA2限制性CTL候选表位,可能成为新的抗肿瘤多肽免疫治疗疫苗的候选表位。
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关键词
PIWIL2
人类白细胞抗原A2
细胞毒性T淋巴细胞
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职称材料
题名
沉默JAG1基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响
被引量:
11
1
作者
袁磊
李伯和
时冉冉
高丽
宋金玲
王建国
机构
漯河医学高等专科学校分子生物学实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第2期262-267,共6页
基金
河南省基础与前沿技术研究计划项目(No.122300410277)
漯河医学高等专科学校科研基金资助项目(No.2010-S10)
文摘
目的:探究沉默Jagged 1(JAG1)基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响及其分子生物学机制。方法:用已构建的pRS-JAG1重组质粒转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用Western blotting方法检测重组质粒对JAG1蛋白表达的影响;MTT比色法测定沉默JAG1对细胞生长的抑制情况;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;蛋白印记分析细胞周期蛋白1(cyclin D1)、p21CIP1/WAF1、p27KIP1、p-Rb、Bcl-2、Bax、Bcl-xL和cleaved caspase-3蛋白水平的变化。结果:Western blotting结果证实重组质粒可在72h内有效抑制JAG1蛋白表达;人乳腺癌MDA-MB-231细胞JAG1被沉默后,细胞的生长速度明显减慢,细胞明显阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率显著升高(P<0.05),cyclin D1、p-Rb、Bcl-2和Bcl-xL蛋白水平被下调(P<0.05),而p21CIP1/WAF1、p27KIP1、Bax和cleaved caspase-3的蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论:沉默JAG1可有效抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,并诱导其凋亡。本研究为以JAG1为分子靶点的三阴乳腺癌治疗提供实验依据。
关键词
JAG1蛋白
短发夹RNA
细胞周期
细胞凋亡
MDA—MB-231细胞
Keywords
JAG1 protein
Short hairpin RNA
Cell cycle
Apoptosis
MDA-MB-231 cells
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
肿瘤抗原PIWIL2的HLA-A2限制性CTL表位鉴定
被引量:
7
2
作者
时冉冉
李伯和
袁磊
付陈增
陈娇
王建国
机构
漯河医学高等专科学校分子生物学实验室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第7期1315-1319,共5页
基金
河南省科技发展计划资助项目(No.142102310466)
漯河医学高等专科学校科研基金资助项目(No.2014-SLMC09)
文摘
目的:鉴定肿瘤抗原PIWIL2的人类白细胞抗原A2(HLA-A2)限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位。方法:首先运用RT-PCR、Western blot方法检测PIWIL2在肿瘤细胞系MCF-7、SW480和HT-29中的表达情况,然后通过BIMAS、Rank Pep、Net MHC、Net CTL1.2及IEDB软件预测打分来选取PIWIL2的HLA-A2限制性的表位。候选表位肽通过标准的Fmoc化学合成法合成,结合力实验用于检测候选表位与T2A2细胞表面HLA-A2分子的结合能力,ELISPOT实验检测候选表位肽诱导CTL分泌IFN-γ的能力,体外细胞毒性实验检测候选肽诱导CTL的能力。结果:PIWIL2在肿瘤细胞系MCF-7、SW480和HT-29中均有表达。候选肽P485、P493、P965具有中等结合力。ELISPOT实验结果显示表位肽P485和P965诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力。细胞毒性实验结果显示表位肽P485和P965对MCF-7细胞均有一定的杀伤作用。结论:表位肽P485和P965是优秀的PIWIL2抗原HLAA2限制性CTL候选表位,可能成为新的抗肿瘤多肽免疫治疗疫苗的候选表位。
关键词
PIWIL2
人类白细胞抗原A2
细胞毒性T淋巴细胞
Keywords
PIWIL2
Human leucocyte antigen A2
Cytotoxic T lymphocytes
分类号
Q279 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
沉默JAG1基因对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响
袁磊
李伯和
时冉冉
高丽
宋金玲
王建国
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
11
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
肿瘤抗原PIWIL2的HLA-A2限制性CTL表位鉴定
时冉冉
李伯和
袁磊
付陈增
陈娇
王建国
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
7
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