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生物活性玻璃45S5通过细胞自噬促进根尖牙乳头细胞成牙本质方向分化
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作者 刘炜林 苏灿 崔彩云 《华西口腔医学杂志》 北大核心 2025年第1期37-45,共9页
目的45S5促进根尖牙乳头细胞(APCs)成牙本质方向分化作用机制仍不明确,本研究旨在探讨细胞自噬参与生物活性玻璃45S5促进APCs成牙本质方向分化的作用。方法体外分离培养APCs,流式细胞术鉴定细胞组织来源。配置1 mg/mL 45S5浸提培养液,检... 目的45S5促进根尖牙乳头细胞(APCs)成牙本质方向分化作用机制仍不明确,本研究旨在探讨细胞自噬参与生物活性玻璃45S5促进APCs成牙本质方向分化的作用。方法体外分离培养APCs,流式细胞术鉴定细胞组织来源。配置1 mg/mL 45S5浸提培养液,检测pH和离子浓度。实验分为对照组、45S5组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)45S5组,45S5组为1 mg/mL 45S5诱导培养APCs,3-MA 45S5组为1 mg/mL 45S5中加入自噬抑制剂(3-MA)。免疫印迹法(Western blot)检测各组诱导培养24 h后自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)和P62的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测诱导培养7 d后骨涎蛋白(BSP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)和牙本质基质蛋白-1(DMP-1)的表达,细胞碱性磷酸酶(ALP)染色分析诱导培养7 d细胞ALP活性,茜素红染色分析诱导培养21 d矿化结节形成。结果45S5浸提培养液的pH为8.65±0.01,与对照组差异无统计学意义(P>0.05);45S5诱导培养液的硅离子浓度为(1.56±0.07)mmol/L,高于对照组(0.08±0.01)mmol/L(P<0.05);45S5浸提培养液的钙离子浓度为(1.57±0.15)mmol/L,与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,45S5组LC3B-Ⅱ/Ⅰ比值升高、P62表达降低(P<0.05);与45S5组相比,3-MA 45S5组LC3B-Ⅱ/Ⅰ比值降低、P62表达升高(P<0.05)。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,45S5组BSP、Runx2、DMP-1和DSPP表达增加;与45S5组相比,3-MA 45S5组BSP、Runx2、DMP-1和DSPP表达降低(P<0.05)。ALP染色和茜素红染色分析结果显示,与对照组相比,45S5组ALP活性增强,矿化结节形成增多;与45S5组相比,3-MA 45S5组ALP活性降低,矿化结节形成减少。结论1 mg/mL 45S5体外通过细胞自噬促进APCs成牙本质方向分化。 展开更多
关键词 成牙本质分化 根尖牙乳头细胞 自噬 生物活性玻璃45S5
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