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寿光黑鸡成纤维细胞的体外培养与冷冻保存 被引量:3
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作者 王娟 于媛 +2 位作者 王跃嗣 马云 焦飞 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第6期2521-2523,2526,共4页
[目的]建立鸡成纤维细胞的体外培养体系。[方法]用组织块法和消化法分别分离培养鸡皮肤成纤维细胞;比较细胞生长速率及冻存复苏率。[结果]酶消化培养的成纤维细胞原代生长较快,约5 d便可形成单层;2种方法传代细胞的生长速度相似,仅需2-... [目的]建立鸡成纤维细胞的体外培养体系。[方法]用组织块法和消化法分别分离培养鸡皮肤成纤维细胞;比较细胞生长速率及冻存复苏率。[结果]酶消化培养的成纤维细胞原代生长较快,约5 d便可形成单层;2种方法传代细胞的生长速度相似,仅需2-3 d就可形成单层;使用酶消化法和反复贴壁法,经3-4代后,可获得纯化的成纤维细胞;成纤维细胞经冷冻复苏后有75%-80%存活;分离纯化的胚胎和皮肤成纤维细胞的生长曲线均正常,可传至12代,传代后染色体数目不变。[结论]采用组织块法及酶消化法培养鸡成纤维细胞均可获得ES细胞建系所需的饲养层细胞。该研究为ES细胞系的成功建立奠定了基础。 展开更多
关键词 皮肤 胚胎 成纤维细胞 体外培养 冷冻保存
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不同培养条件对鸡胚胎生殖细胞Oct4启动子DNA甲基化的影响 被引量:2
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作者 王娟 焦飞 +2 位作者 于媛 潘效红 马云 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期118-121,共4页
旨在在体外通过胚胎生殖细胞(EGC)和细胞外基质共同构建一个EGC的小生境(niche)模型,通过比较Oct4DNA甲基化的变化,研究niche中特有的表观遗传效应对胚胎生殖细胞自我更新的影响。构建EGC细胞标准培养方案(对照组)和改良培养方案(试验... 旨在在体外通过胚胎生殖细胞(EGC)和细胞外基质共同构建一个EGC的小生境(niche)模型,通过比较Oct4DNA甲基化的变化,研究niche中特有的表观遗传效应对胚胎生殖细胞自我更新的影响。构建EGC细胞标准培养方案(对照组)和改良培养方案(试验组),采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)技术、RT-PCR技术,对比分析两种培养方案中Oct4启动子的甲基化状态,判断基因表达与其CpG岛甲基化的关系,分析DNA甲基化模式与EGC细胞自我更新的关系。结果显示,试验组可扩增出Oct4的非甲基化扩增产物,而对照组为其甲基化扩增产物,试验组Oct4表达水平明显高于对照组。试验组EGC生长状态明显好于对照组。试验表明,在改良培养条件下,Oct4基因启动子DNA甲基化程度较低,且与基因表达水平呈负相关,更有利于维持胚胎生殖细胞的自我更新状态。 展开更多
关键词 胚胎生殖细胞 Oct4基因 DNA甲基化 全能性
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成血管血液干细胞特化形成相关基因的研究进展
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作者 王跃嗣 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期2264-2269,共6页
Previous research has confirmed that hematopoietic cells and endothelial cells originate in a common mesodermal precursor named as hemangioblast at specific time and locations during embryonic development. Hematopoiet... Previous research has confirmed that hematopoietic cells and endothelial cells originate in a common mesodermal precursor named as hemangioblast at specific time and locations during embryonic development. Hematopoietic cells and endothelial cells were originated gradually from hemangioblast by specialization, determination and differentiation step by step. The author reviews the origin, markers, commitment, and differentiation of hemangioblast, and presents some research evidence on the transcriptional factors and influencing genes for the specialization of hemangioblast. Further research on specialization genes of the hemangioblast will be critical for a better understanding of the events involved in hematopoietic and endothelial cell differentiation as well as for utilizing this cell population for clinical applications. 展开更多
关键词 成血管血液干细胞 造血干细胞 基因表达调控
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