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脑红蛋白在感染性休克早期大鼠脑组织中的动态变化
被引量：
1
1
作者
杨彤
孙雪华
刘志武
《临床麻醉学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1197-1199,共3页
目的探讨感染性休克早期大鼠脑组织中脑红蛋白（neuroglobin,NGB）含量的动态变化在感染性休克中可能发挥的作用。方法健康雄性SD大鼠60只,12~15周龄,体重300~350g,随机分为两组,每组30只。M组经尾静脉注射脂多糖（LPS）10mg/kg制备大...
目的探讨感染性休克早期大鼠脑组织中脑红蛋白（neuroglobin,NGB）含量的动态变化在感染性休克中可能发挥的作用。方法健康雄性SD大鼠60只,12~15周龄,体重300~350g,随机分为两组,每组30只。M组经尾静脉注射脂多糖（LPS）10mg/kg制备大鼠感染性休克模型,当SBP下降幅度达到基础值的40%时认为感染性休克模型复制成功;C组给予等量生理盐水。分别在给LPS前（T_0）、给LPS后1h（T_1）、2h（T_2）、4h（T_3）、6h（T_4）采用ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6浓度和NGB含量,Western blot法检测脑组织中NGB、半胱天冬酶-3（caspase-3）的含量。结果与C组比较,T1~T4时M组血清中的TNF-α、IL-6浓度明显增高（P〈0.05）,脑组织中caspase-3含量明显增加（P〈0.05）;T_3、T_4时血清和脑组织中NGB含量明显增高（P〈0.05）。结论感染性休克后大鼠脑组织发生了炎症损伤、细胞凋亡病理学改变,脑红蛋白在感染性休克所致的损伤脑组织中含量增加,推测其可能发挥了内源性神经保护功能。
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关键词
感染性休克
脑红蛋白
细胞凋亡
炎症反应
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职称材料
犬黑皮质素受体-4突变体D298N真核表达载体的构建及其在MDCK细胞中的表达
2
作者
宋立先
刘春红
+2 位作者
王占青
高蓉
徐学振
《安徽农业科学》
CAS
2022年第20期76-80,共5页
[目的]引进犬MC4R突变点,构建突变体D298N表达载体并在MDCK细胞中获得表达。[方法]设计带突变点D298N引物,以犬MC4R基因组DNA为模板,采用普通PCR和Overlap-PCR扩增编码区,将产物克隆、酶切、测序鉴定。将测序正确的基因连接到pcDNA3.1-m...
[目的]引进犬MC4R突变点,构建突变体D298N表达载体并在MDCK细胞中获得表达。[方法]设计带突变点D298N引物,以犬MC4R基因组DNA为模板,采用普通PCR和Overlap-PCR扩增编码区,将产物克隆、酶切、测序鉴定。将测序正确的基因连接到pcDNA3.1-myc-His/A载体上,将重组体pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R-D298N酶切、鉴定,将测序正确的重组体转染到MDCK细胞中,继续培养3 d,提取细胞总RNA,并采用RT-PCR方法检测基因表达。提取细胞总蛋白,Western Blot鉴定蛋白表达。[结果]构建带D298N突变点的真核表达载体,提取质粒后有2处碱基不同,分别是777位碱基T→C,892位碱基G→A(引入的突变位点)。转染到MDCK后,RT-PCR和Western Blot均检测到重组体在基因水平和蛋白水平的表达。[结论]成功构建犬的重组体真核表达载体并在MDCK细胞中表达。
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关键词
犬
黑皮质素受体-4
真核表达载体
定点诱变
D298N
MDCK细胞
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职称材料
题名
脑红蛋白在感染性休克早期大鼠脑组织中的动态变化
被引量：
1
1
作者
杨彤
孙雪华
刘志武
机构
解放军
滨州医学院烟台附院
麻醉科
出处
《临床麻醉学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第12期1197-1199,共3页
文摘
目的探讨感染性休克早期大鼠脑组织中脑红蛋白（neuroglobin,NGB）含量的动态变化在感染性休克中可能发挥的作用。方法健康雄性SD大鼠60只,12~15周龄,体重300~350g,随机分为两组,每组30只。M组经尾静脉注射脂多糖（LPS）10mg/kg制备大鼠感染性休克模型,当SBP下降幅度达到基础值的40%时认为感染性休克模型复制成功;C组给予等量生理盐水。分别在给LPS前（T_0）、给LPS后1h（T_1）、2h（T_2）、4h（T_3）、6h（T_4）采用ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6浓度和NGB含量,Western blot法检测脑组织中NGB、半胱天冬酶-3（caspase-3）的含量。结果与C组比较,T1~T4时M组血清中的TNF-α、IL-6浓度明显增高（P〈0.05）,脑组织中caspase-3含量明显增加（P〈0.05）;T_3、T_4时血清和脑组织中NGB含量明显增高（P〈0.05）。结论感染性休克后大鼠脑组织发生了炎症损伤、细胞凋亡病理学改变,脑红蛋白在感染性休克所致的损伤脑组织中含量增加,推测其可能发挥了内源性神经保护功能。
关键词
感染性休克
脑红蛋白
细胞凋亡
炎症反应
Keywords
Septic shock
Neuroglobin
Cell apoptosis
Inflammatory response
分类号
R459.7 [医药卫生—急诊医学]
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职称材料
题名
犬黑皮质素受体-4突变体D298N真核表达载体的构建及其在MDCK细胞中的表达
2
作者
宋立先
刘春红
王占青
高蓉
徐学振
机构
滨州医学院烟台附院
出处
《安徽农业科学》
CAS
2022年第20期76-80,共5页
基金
辽宁省科技基金项目(2007408001-6)。
文摘
[目的]引进犬MC4R突变点,构建突变体D298N表达载体并在MDCK细胞中获得表达。[方法]设计带突变点D298N引物,以犬MC4R基因组DNA为模板,采用普通PCR和Overlap-PCR扩增编码区,将产物克隆、酶切、测序鉴定。将测序正确的基因连接到pcDNA3.1-myc-His/A载体上,将重组体pcDNA3.1-myc-His/A-cMC4R-D298N酶切、鉴定,将测序正确的重组体转染到MDCK细胞中,继续培养3 d,提取细胞总RNA,并采用RT-PCR方法检测基因表达。提取细胞总蛋白,Western Blot鉴定蛋白表达。[结果]构建带D298N突变点的真核表达载体,提取质粒后有2处碱基不同,分别是777位碱基T→C,892位碱基G→A(引入的突变位点)。转染到MDCK后,RT-PCR和Western Blot均检测到重组体在基因水平和蛋白水平的表达。[结论]成功构建犬的重组体真核表达载体并在MDCK细胞中表达。
关键词
犬
黑皮质素受体-4
真核表达载体
定点诱变
D298N
MDCK细胞
Keywords
Canine
Melanocortin receptor 4
Eukaryotic expressive vector
Site-directed mutagenesis
D298N
MDCK cell
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
脑红蛋白在感染性休克早期大鼠脑组织中的动态变化
杨彤
孙雪华
刘志武
《临床麻醉学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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职称材料
2
犬黑皮质素受体-4突变体D298N真核表达载体的构建及其在MDCK细胞中的表达
宋立先
刘春红
王占青
高蓉
徐学振
《安徽农业科学》
CAS
2022
0
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