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表达PD-L1/PD-L2的人胎盘间充质干细胞对外周血T细胞分泌IL-17的拮抗作用 被引量:5
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作者 王国艳 王斐斐 +2 位作者 李恒 张丽霞 栾希英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期132-136,共5页
目的探讨程序性死亡因子配体1(PD-L1)和PD-L2在人胎盘源性间充质干细胞(hPMSCs)上表达对外周血T细胞分泌IL-17的影响。方法应用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞(hPMSCs),并进行表型及分化鉴定;RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)... 目的探讨程序性死亡因子配体1(PD-L1)和PD-L2在人胎盘源性间充质干细胞(hPMSCs)上表达对外周血T细胞分泌IL-17的影响。方法应用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞(hPMSCs),并进行表型及分化鉴定;RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)及流式细胞术(FCM)检测hPMSCs上PD-L1及PD-L2的表达;应用化学合成的PD-L1 siRNA、PD-L2 siR-NA沉默hPMSCs上PD-L1及PD-L2表达;密度梯度离心法分离纯化人外周血T细胞;细胞胞内因子染色法分析沉默PD-L1或PD-L2后hPMSCs对PMA活化的T细胞分泌IL-17的影响。结果除PD-L1外,hPMSCs高表达PD-L2;siRNA能够有效阻断PD-L1和PD-L2在hPMSCs上的表达;胞内染色结果显示,hPMSCs能够上调T细胞IL-17的分泌,阻断PD-L1或PD-L2后,T细胞IL-17的分泌被进一步上调,且PD-L1和PD-L2具有叠加作用。结论 PD-L1和PD-L2在hPMSCs上表达,可拮抗hPMSCs刺激外周血T细胞分泌IL-17的作用。 展开更多
关键词 人胎盘源性间充质干细胞 PD-L1 PD-L2 T细胞 IL-17
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γ干扰素上调人胎盘间充质干细胞PD-L1表达并增强其诱导脐血和外周血T细胞向IL-10^+T细胞的分化 被引量:9
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作者 王炜玮 李恒 +5 位作者 徐逢皇 都海波 李晓华 易君祝 王国艳 栾希英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期191-195,200,共6页
目的比较人胎盘间充质干细胞(h PMSC)对脐血和外周血IL-10^+T细胞分化的调节作用,并探讨γ干扰素(IFN-γ)在其中的作用机制。方法应用酶消化法分离、培养h PMSC;反转录PCR和流式细胞术分别检测程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)在h PMSC的表达... 目的比较人胎盘间充质干细胞(h PMSC)对脐血和外周血IL-10^+T细胞分化的调节作用,并探讨γ干扰素(IFN-γ)在其中的作用机制。方法应用酶消化法分离、培养h PMSC;反转录PCR和流式细胞术分别检测程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)在h PMSC的表达;Ficoll密度梯度离心法分离脐血和健康成人外周血单个核细胞,并用红细胞花环法纯化T细胞;用植物血凝素(PHA)活化T细胞并与h PMSC进行共培养,流式细胞术分别检测在阻断型PD-L1 m Ab和IFN-γ预刺激的条件下h PMSC对脐血和外周血T细胞向CD4^+IL-10^+T细胞、CD8^+IL-10^+T细胞分化的诱导作用。结果 h PMSC可诱导脐血和外周血T细胞向CD4^+IL-10^+T细胞、CD8^+IL-10^+T细胞分化,且对外周血T细胞向IL-10^+T细胞分化的诱导能力明显高于对脐血T细胞向该细胞分化的诱导能力;IFN-γ预处理h PMSC后,h PMSC促进脐血和外周血T细胞向IL-10^+T细胞分化能力明显增强;h PMSC高表达PD-L1,IFN-γ可明显上调其在h PMSC上的表达;阻断PD-L1在h PMSC上表达后,脐血、外周血中CD4^+IL-10^+T细胞、CD8^+IL-10^+T细胞比例均明显降低。结论 h PMSC诱导外周血T细胞向IL-10^+T细胞分化的能力明显高于其诱导脐血T细胞向该细胞分化的能力。IFN-γ可通过上调PD-L1在h PMSC上的表达,增强h PMSC对脐血和外周血T细胞向IL-10^+T细胞分化的诱导能力。 展开更多
关键词 胎盘间充质干细胞 程序性死亡蛋白配体1 IL-10+T细胞 γ干扰素(IFN-γ)
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HIV衣壳蛋白P24与TRIM22在HEK293T细胞中的表达及共定位 被引量:3
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作者 孙大康 安新业 +3 位作者 周玉明 纪兵 宋向芹 徐殿红 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1081-1084,共4页
目的观察人类免疫缺陷病毒(HIV)衣壳蛋白P24与三基序蛋白22(TRIM22)在HEK293T细胞中的共定位情况。方法以慢病毒载体p LP1为模板,通过PCR法扩增p24编码序列,克隆至p DsRed-Monomer-N1真核表达载体。经菌落PCR、双酶切及DNA测序进行鉴定... 目的观察人类免疫缺陷病毒(HIV)衣壳蛋白P24与三基序蛋白22(TRIM22)在HEK293T细胞中的共定位情况。方法以慢病毒载体p LP1为模板,通过PCR法扩增p24编码序列,克隆至p DsRed-Monomer-N1真核表达载体。经菌落PCR、双酶切及DNA测序进行鉴定。将p DsRed-Monomer-N1-p24与p EGFP-N3-TRIM22载体共同转染HEK293T细胞,用荧光显微镜观察p24-DsRed-Monomer和TRIM22-EGFP的表达及共定位情况。结果经菌落PCR、双酶切及测序鉴定,成功构建p DsRedMonomer-N1-p24真核表达载体。通过荧光显微镜检测发现,p24-DsRed-Monomer和TRIM22-EGFP在HEK293T细胞中存在共定位关系。结论 HIV衣壳蛋白P24与TRIM22存在共定位。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 衣壳蛋白 P24 TRIM22 共定位
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TIPE3抑制CDDP诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡及其机制研究 被引量:1
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作者 姜召玲 王洋 +1 位作者 杨明浩 姜杰(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期956-959,共4页
目的:探讨TIPE3抑制宫颈癌细胞系SiHa化疗敏感性及其机制。方法:SiHa细胞转入TIPE3慢病毒表达载体后,CDDP处理24 h,CCK-8法测量IC50值,Annexin V/FITC和PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡水平,ELISA法检测培养上清中IL-6分泌水平,Western b... 目的:探讨TIPE3抑制宫颈癌细胞系SiHa化疗敏感性及其机制。方法:SiHa细胞转入TIPE3慢病毒表达载体后,CDDP处理24 h,CCK-8法测量IC50值,Annexin V/FITC和PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡水平,ELISA法检测培养上清中IL-6分泌水平,Western blot检测转染TIPE3后耐药基因MDR-1及IL-6的表达水平。同时,干扰TIPE3表达后从反向进行进一步验证。结果:①TIPE3增强宫颈癌细胞系SiHa对CDDP的IC50值;②TIPE3抑制CDDP诱导的宫颈癌细胞系SiHa凋亡;③TIPE3使宫颈癌细胞系SiHa中肿瘤耐药基因MDR1及IL-6的表达升高。结论:TIPE3增强MDR1及IL-6的表达,进而抑制CDDP诱导的宫颈癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 宫颈癌 TIPE3 化疗敏感性 MDR1 IL-6
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TNFAIP8(TIPE)抑制p53蛋白乙酰化促进宫颈癌增殖机制研究 被引量:8
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作者 姜杰 周玉明 +3 位作者 姜茹 王美蓉 杨明浩 赵培庆 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1506-1509,共4页
目的:TIPE蛋白在肿瘤发生发展中起重要作用,但目前为止其在宫颈癌中的表达情况及潜在生物学功能还未见报道,本研究旨在探讨TIPE在宫颈癌中的表达水平及对宫颈癌细胞生物学功能的影响和可能机制。方法:免疫组化检测宫颈癌组织及癌旁组织... 目的:TIPE蛋白在肿瘤发生发展中起重要作用,但目前为止其在宫颈癌中的表达情况及潜在生物学功能还未见报道,本研究旨在探讨TIPE在宫颈癌中的表达水平及对宫颈癌细胞生物学功能的影响和可能机制。方法:免疫组化检测宫颈癌组织及癌旁组织中TIPE的表达,分析表达水平与患者预后的相关性;细胞实验检测TIPE对Siha细胞增殖影响;Western blot实验初步探讨其可能的分子机制。结果:宫颈癌组织中TIPE表达水平较癌旁组织明显上调,且与预后负相关;细胞实验发现其促进宫颈癌细胞系Siha的增殖;机制研究发现TIPE抑制p53乙酰化,从而抑制其下游分子p21的表达。结论:TIPE在宫颈癌组织中表达上调,且通过抑制p53乙酰化促进宫颈癌细胞增殖,提示其参与了宫颈癌的发生发展进程。 展开更多
关键词 宫颈癌 TIPE P53 P21
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Tim-4促进子宫颈癌细胞SiHa侵袭与迁移及其可能机制 被引量:5
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作者 姜杰 杨明浩 +3 位作者 姜召玲 王国艳 修燕 赵培庆 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期270-274,共5页
目的:探讨Tim-4促进子宫颈癌细胞侵袭与迁移及其相关机制。方法:用实时荧光定量PCR法检测子宫颈癌细胞系Siha、Hela与子宫颈上皮永生化细胞系H8中Tim-4的表达水平。在较低表达Tim-4的Siha细胞系感染携Tim-4的慢病毒载体,荧光显微镜观测S... 目的:探讨Tim-4促进子宫颈癌细胞侵袭与迁移及其相关机制。方法:用实时荧光定量PCR法检测子宫颈癌细胞系Siha、Hela与子宫颈上皮永生化细胞系H8中Tim-4的表达水平。在较低表达Tim-4的Siha细胞系感染携Tim-4的慢病毒载体,荧光显微镜观测Siha细胞系转染Tim-4的表达水平。用Transwell及划痕实验检测Tim-4对子宫颈癌细胞系Siha的侵袭与迁转移能力的影响,用Western blotting检测Siha细胞转染Tim-4后MMP2、MMP9、E-cadherin、N-cadherin的变化。结果:子宫颈癌细胞系Siha、Hela与宫颈上皮永生化细胞系H8相比高表达Tim-4。成功构建携Tim-4慢病毒载体的Siha细胞系;Tim-4明显抑制子宫颈癌细胞系Siha的迁移与侵袭能力,且影响了MMP2、MMP9及N-cadherin、E-cadherin的表达水平。结论:过表达Tim-4可促进子宫颈癌细胞的侵袭与迁移能力,其机制可能与Tim-4促进Siha细胞EMT转化有关。 展开更多
关键词 TIM-4 子宫颈癌 上皮间质转化 侵袭 迁移
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