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敲除CDC20可明显抑制宫颈癌细胞的增殖及侵袭转移
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作者 莫艳秀 舒洋 +4 位作者 莫钰兰 刘峻彤 徐欧欧 邓华菲 王岐本 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1200-1211,共12页
目的 探讨细胞分裂周期蛋白20(CDC20)在宫颈癌中的功能及其对宫颈癌C33A细胞增殖、迁移以及侵袭的影响和作用机制。方法 TCGA数据库分析CDC20在宫颈癌组织中的表达情况,免疫组化(IHC)检测宫颈癌组织与癌旁组织中的CDC20和β-Catenin蛋... 目的 探讨细胞分裂周期蛋白20(CDC20)在宫颈癌中的功能及其对宫颈癌C33A细胞增殖、迁移以及侵袭的影响和作用机制。方法 TCGA数据库分析CDC20在宫颈癌组织中的表达情况,免疫组化(IHC)检测宫颈癌组织与癌旁组织中的CDC20和β-Catenin蛋白表达水平。利用CRISPR/Cas9设计CDC20基因双靶点的sgRNA2&7序列,构建重组质粒并测序验证。将宫颈癌细胞C33A按转染的质粒不同分为sgRNA-NC组和sgRNA-CDC20组,通过qRT-PCR和Western blotting检测CDC20的mRNA和蛋白表达水平,平板克隆检测其增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡水平;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力。将2组C33A细胞分别接种于裸鼠(5只/组)双侧腋下左、右两侧,定期监测肿瘤体积并绘制其生长曲线,称取裸鼠体质量并脱臼处死。Western blotting分别检测细胞和瘤体组织中的CDC20和β-Catenin蛋白的表达水平;免疫共沉淀(CoIP)和免疫荧光共定位验证CDC20与β-Catenin的相互作用。结果 CDC20和β-Catenin在宫颈癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.001)。体外细胞实验结果显示:与sgRNA-NC组细胞比较,sgRNA-CDC20敲除株的细胞增殖能力下降(P<0.001)且细胞凋亡显著升高(P<0.01);迁移和侵袭能力受到明显抑制(P<0.05)。体内动物实验结果显示:与sgRNA-NC组比较,sgRNACDC20组的瘤体体积生长曲线明显减小(P<0.05),但裸鼠体质量无明显变化(P>0.05);sgRNA-CDC20组中的细胞和组织中的CDC20和β-Catenin的蛋白水平明显降低(P<0.05),免疫共沉淀(CoIP)和免疫荧光验证CDC20和β-Catenin存在相关性。结论CDC20在宫颈癌组织、细胞以及瘤体中的表达明显升高,敲除CDC20可明显抑制C33A细胞的增殖和侵袭转移能力,并促进凋亡,其机制可能与Wnt/β-Catenin信号通路密切相关。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 CDC20 宫颈癌 WNT/Β-CATENIN
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血清HER-2/neu、TPS、CA15-3和TSGF联合检测在乳腺癌诊断中的价值 被引量:28
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作者 蒋显勇 易艳军 +4 位作者 梁庄严 袁才佳 李木兰 邹明英 李邓君 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第24期4115-4117,共3页
目的:探究乳腺癌患者血清中人表皮生长因子受体2(HER-2/neu)、组织多肽特异性抗原(TPS)、糖类抗原15-3(CA15-3)和肿瘤特异性生长因子(TSGF)联合检测在乳腺癌诊断中的价值。方法 :采用化学发光免疫分析法检测48例乳腺癌患者、46例良性乳... 目的:探究乳腺癌患者血清中人表皮生长因子受体2(HER-2/neu)、组织多肽特异性抗原(TPS)、糖类抗原15-3(CA15-3)和肿瘤特异性生长因子(TSGF)联合检测在乳腺癌诊断中的价值。方法 :采用化学发光免疫分析法检测48例乳腺癌患者、46例良性乳腺疾病患者以及50例健康女性血清中HER-2/neu、TPS、CA15-3和TSGF水平。结果 :乳腺癌组HER-2/neu、TPS、CA15-3及TSGF水平均显著高于良性疾病组及健康对照组(P<0.01),而良性乳腺疾病组4项肿瘤标志物浓度水平与健康对照组比较均无统计学差异(P>0.05);HER-2/neu、TPS、CA15-3和TSGF联合检测灵敏度明显高于各单项检测灵敏度。结论:单项肿瘤标志物检测在乳腺癌诊断中的应用价值不高,而HER-2/neu、TPS、CA15-3和TSGF联合检测有助于提高乳腺癌的诊断灵敏度,对乳腺癌具有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 人类表皮生长因子受体2 组织多肽特异性抗原 糖类抗原15-3 肿瘤特 异性生长因子:联合检测
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