积雪草活性成分槲皮素通过介导STAT3磷酸化抑制IL-23/IL-17A炎症轴发挥抗银屑病作用 被引量：4

1

作者 刘青 刘敬 +8 位作者 郑逸航 雷金 黄建华 刘思妤 刘芳 彭群龙 张远芳 王俊杰 李玉娟 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第1期90-99,共10页

目的探讨积雪草抗银屑病活性成分及其作用机制。方法利用TCMSP、PharmMapper等数据库获取积雪草化合物和靶点,利用GeneCards数据库筛选银屑病相关的潜在靶点,Cytoscape 3.10.0软件导入积雪草活性成分、银屑病共同靶点制作“药物-活性成... 目的探讨积雪草抗银屑病活性成分及其作用机制。方法利用TCMSP、PharmMapper等数据库获取积雪草化合物和靶点,利用GeneCards数据库筛选银屑病相关的潜在靶点,Cytoscape 3.10.0软件导入积雪草活性成分、银屑病共同靶点制作“药物-活性成分-作用靶点”网络图,使用STRING数据库构建PPI网络,借助DAVID数据库进行通路富集分析。通过网络药理学筛选得到积雪草主要活性成分槲皮素、积雪草苷、积雪草酸,并将这3种活性成分(7.5、15、30、60μmol/L)作用于脂多糖(LPS)刺激RAW264.7小鼠巨噬细胞炎症模型,Griess法检测细胞NO水平评价抗炎活性。ELISA检测TNF-α、IL-6细胞促炎因子的表达,RT-qPCR测定细胞IL-23、IL-17A、TNF-α、IL-6 mRNA的表达,Western blotting检测细胞p-STAT3(Tyr705)、p-STAT3(Ser727)的表达变化。结果网络药理学研究分析获取积雪草靶点139个,银屑病靶点4604个,PPI网络图显示CASP3、EGFR、PTGS2和ESR1为治疗银屑病的关键靶点,分析得到槲皮素、积雪草苷、积雪草酸可能是积雪草抗银屑病关键活性成分。KEGG结果显示与癌症、IL-17以及MAPK信号通路相关。槲皮素、积雪草苷、积雪草酸处理细胞炎症模型,发现槲皮素表现出明显的抗炎活性,细胞NO水平降低(P<0.05)。与LPS组相比,槲皮素处理后细胞中TNF-α,IL-6促炎因子分泌减少(P<0.05),IL-23、IL-17A、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平降低(P<0.05),STAT3磷酸化的两个位点(Tyr705、Ser727)蛋白表达均明显下调(P<0.05)。结论积雪草抗银屑病主要活性成分为槲皮素、积雪草苷和积雪草酸,其中关键成分槲皮素通过抑制NO产生、炎症因子TNF-α、IL-6的表达,并通过介导STAT3磷酸化调控IL-23/IL-17A炎症轴抑制炎症反应发挥抗银屑病作用。 展开更多

关键词 积雪草 银屑病 槲皮素 IL-23/IL-17A 网络药理学

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敲除CDC20可明显抑制宫颈癌细胞的增殖及侵袭转移

2

作者 莫艳秀 舒洋 +4 位作者 莫钰兰 刘峻彤 徐欧欧 邓华菲 王岐本 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1200-1211,共12页

目的 探讨细胞分裂周期蛋白20(CDC20)在宫颈癌中的功能及其对宫颈癌C33A细胞增殖、迁移以及侵袭的影响和作用机制。方法 TCGA数据库分析CDC20在宫颈癌组织中的表达情况,免疫组化(IHC)检测宫颈癌组织与癌旁组织中的CDC20和β-Catenin蛋... 目的 探讨细胞分裂周期蛋白20(CDC20)在宫颈癌中的功能及其对宫颈癌C33A细胞增殖、迁移以及侵袭的影响和作用机制。方法 TCGA数据库分析CDC20在宫颈癌组织中的表达情况,免疫组化(IHC)检测宫颈癌组织与癌旁组织中的CDC20和β-Catenin蛋白表达水平。利用CRISPR/Cas9设计CDC20基因双靶点的sgRNA2&7序列,构建重组质粒并测序验证。将宫颈癌细胞C33A按转染的质粒不同分为sgRNA-NC组和sgRNA-CDC20组,通过qRT-PCR和Western blotting检测CDC20的mRNA和蛋白表达水平,平板克隆检测其增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡水平;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力。将2组C33A细胞分别接种于裸鼠(5只/组)双侧腋下左、右两侧,定期监测肿瘤体积并绘制其生长曲线,称取裸鼠体质量并脱臼处死。Western blotting分别检测细胞和瘤体组织中的CDC20和β-Catenin蛋白的表达水平;免疫共沉淀(CoIP)和免疫荧光共定位验证CDC20与β-Catenin的相互作用。结果 CDC20和β-Catenin在宫颈癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.001)。体外细胞实验结果显示:与sgRNA-NC组细胞比较,sgRNA-CDC20敲除株的细胞增殖能力下降(P<0.001)且细胞凋亡显著升高(P<0.01);迁移和侵袭能力受到明显抑制(P<0.05)。体内动物实验结果显示:与sgRNA-NC组比较,sgRNACDC20组的瘤体体积生长曲线明显减小(P<0.05),但裸鼠体质量无明显变化(P>0.05);sgRNA-CDC20组中的细胞和组织中的CDC20和β-Catenin的蛋白水平明显降低(P<0.05),免疫共沉淀(CoIP)和免疫荧光验证CDC20和β-Catenin存在相关性。结论CDC20在宫颈癌组织、细胞以及瘤体中的表达明显升高,敲除CDC20可明显抑制C33A细胞的增殖和侵袭转移能力,并促进凋亡,其机制可能与Wnt/β-Catenin信号通路密切相关。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9 CDC20 宫颈癌 WNT/Β-CATENIN

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IGF-1抑制SIRT1表达与活性介导椎间盘纤维环细胞衰老的机制研究

3

作者 雷昌斌 毕艺宸 +5 位作者 周蕾 周恒兵 徐兴 杜泽坤 王王 王炯 《中国脊柱脊髓杂志》 北大核心 2025年第5期522-527,共6页

目的:探讨胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)通过调控沉默信息调节因子sirtuin 1(SIRT1)活性介导椎间盘细胞衰老的机制。方法:选取8周龄Spargue-Dawley(SD)雌性大鼠,分离椎间盘组织,体外培养椎间盘纤维环(annulus... 目的:探讨胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)通过调控沉默信息调节因子sirtuin 1(SIRT1)活性介导椎间盘细胞衰老的机制。方法:选取8周龄Spargue-Dawley(SD)雌性大鼠,分离椎间盘组织,体外培养椎间盘纤维环(annulus fibrosus,AF)细胞,加入不同浓度外源IGF-1(0、1、10、50、100ng/m L)进行培养,通过β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色、细胞增殖实验、细胞迁移实验等实验检测不同浓度IGF-1对AF细胞的影响,并通过Western blot进一步探讨IGF-1通过调控SIRT1活性介导AF细胞衰老的分子机制。结果:不同浓度外源IGF-1处理后,SA-β-Gal染色和Western blot结果均显示IGF-1呈浓度依赖性AF细胞衰老;CCK-8实验显示低浓度IGF-1促进AF细胞的增殖较为明显;Transwell实验结果表明低浓度IGF-1可以促进AF细胞的迁移,而高浓度IGF-1对AF细胞的迁移能力没有显著影响;Western blot结果进一步表明IGF-1可以下调SIRT1的表达,并促进p53蛋白的乙酰化。结论:IGF-1可通过抑制SIRT1的表达和活性促进AF细胞的衰老。 展开更多

关键词 椎间盘纤维环细胞 IGF-1 SIRT1 椎间盘衰老

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沉默信息调节因子1在椎间盘退变中的作用

4

作者 杨培 周蕾 +3 位作者 牛鑫月 周恒兵 刘香艳 雷昌斌 《中国脊柱脊髓杂志》 北大核心 2025年第2期205-208,共4页

椎间盘(intervertebral disc,IVD)位于脊柱相邻的两个椎体之间,主要由髓核(nucleus pulposus,NP)、纤维环(annulus fibrosus,AF)和上下两个软骨终板(cartilaginous endplates,CEP)[1]组成。随着年龄的增长和IVD的不断老化,会出现椎体骨... 椎间盘(intervertebral disc,IVD)位于脊柱相邻的两个椎体之间,主要由髓核(nucleus pulposus,NP)、纤维环(annulus fibrosus,AF)和上下两个软骨终板(cartilaginous endplates,CEP)[1]组成。随着年龄的增长和IVD的不断老化,会出现椎体骨质增生,细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成代谢和分解代谢不平衡等,使得IVD的形态和功能改变,最终会导致椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)。IDD是引起腰痛的主要原因。有研究表明,炎症、氧化应激、线粒体功能障碍和异常机械负荷等多种病理因素参与了IDD的发展[2]。而沉默信息调节因子(Sirtuin,SIRT)家族是一类进化高度保守的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)依赖性组蛋白去乙酰化酶,参与细胞炎症反应、氧化应激和维持线粒体功能等[3]。SIRT家族蛋白之一的SIRT1能通过去乙酰化和二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)核糖基化等方式修饰靶蛋白,调控核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(PI3K/Akt)等信号通路,从而减少炎症和氧化应激的发生,延缓IVD细胞的衰老。近年来,SIRT1被认为是预防和治疗IDD的一个新靶点,但其调控IDD的具体机制尚不明确。笔者对近年来关于SIRT1与IDD的相关研究进行综述。 展开更多

关键词 SIRT1 线粒体功能障碍 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 椎间盘退变 磷脂酰肌醇3激酶 组蛋白去乙酰化酶 丝裂原活化蛋白激酶 二磷酸腺苷

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天然化合物与抗菌药物联用应对细菌耐药性研究进展

5

作者 江超 胡杰 +1 位作者 李玉娟 杨志英 《中国感染控制杂志》 北大核心 2025年第10期1497-1503,共7页

细菌耐药性的出现导致抗菌药物疗效下降甚至失效,给临床抗感染治疗带来巨大挑战,严重威胁人类健康。因此,应对细菌耐药性已成为全球公共卫生领域的重大挑战与研究热点。天然化合物因其来源广泛、生物活性多样,在养殖业“减抗、替抗”的... 细菌耐药性的出现导致抗菌药物疗效下降甚至失效,给临床抗感染治疗带来巨大挑战,严重威胁人类健康。因此,应对细菌耐药性已成为全球公共卫生领域的重大挑战与研究热点。天然化合物因其来源广泛、生物活性多样,在养殖业“减抗、替抗”的实践中已展现出重要价值。近年来,研究发现多种天然化合物可作为抗菌药物的增效剂,与抗菌药物联用可恢复耐药菌对药物的敏感性,并增强其抗菌疗效。这表明,天然化合物具有作为应对细菌耐药性新策略的潜力。本文基于细菌主要耐药机制,综述了天然化合物与抗菌药物联合应用的协同抗菌机制,展望了其应用前景与面临的挑战,以期为应对细菌耐药性危机提供新的思路与策略。 展开更多

关键词 细菌耐药性 天然化合物 抗菌药物 联用 机制

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复方积雪草减轻小鼠日本血吸虫引起的肝纤维化:通过调控TLR4/MyD88通路抑制炎症-纤维化级联反应

6

作者 管丽萍 颜燕 +9 位作者 卢心怡 李智峰 高晖 曹东 侯晨曦 曾靖宇 李欣怡 赵洋 王俊杰 方会龙 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1307-1316,共10页

目的 基于网络药理学和分子对接,联合日本血吸虫(Sj)感染小鼠引起肝纤维化实验验证,探究复方积雪草(CCA)有效成分抗Sj病肝纤维化的作用机制。方法 利用传统中药系统药理学数据库筛选CCA的活性成分及其作用靶点,与Sj病肝纤维化发病机制... 目的 基于网络药理学和分子对接,联合日本血吸虫(Sj)感染小鼠引起肝纤维化实验验证,探究复方积雪草(CCA)有效成分抗Sj病肝纤维化的作用机制。方法 利用传统中药系统药理学数据库筛选CCA的活性成分及其作用靶点,与Sj病肝纤维化发病机制相关的靶点进行比对,获得CCA抗Sj病肝纤维化的潜在作用靶点;采用STRING数据库,构建药物疾病交集靶点的PPI网络,筛选核心靶点;通过Cytoscape 3.9.1构建“药物-成分-靶点-通路-疾病”网络图;运用David数据库进行GO和KEGG富集分析;利用PyMol和AutoDockVina1.1.2对CCA主要活性成分与核心靶点使用分子对接技术进行活性验证。将36只小鼠随机均分为正常对照组(control)、模型组(Sj)、复方积雪草组(Sj+CCA);control组不做任何处理,其余经腹部皮肤感染血吸虫尾蚴建模成功8周后,分别每天灌胃生理盐水和CCA水煎剂,连续8周。采用HE、Masson染色法检测小鼠肝组织病理变化;免疫组化染色检测肝脏Collagen-Ⅰ、Collagen-Ⅲ的表达水平;ELISA法测定小鼠血清中IL-6和TNF-α水平变化;蛋白质印迹法检测肝组织TLR4(TOLL样受体4)、MyD88(髓分化因子88)蛋白表达。结果 筛选得到107种CCA活性成分(OB≥30%,DL≥0.18),791个成分靶点,Sj病肝纤维化靶点集和CCA靶点集进行交集分析后共得到37个关键靶点。其中TNF、TP53、JUN、MMP9、CXCL为核心靶点,涉及的主要信号通路为Lipid and atherosclerosis、IL-17 signaling pathway、Fluid shear stress and atherosclerosis、Chagas disease、Pathways in cancer等。分子对接结果提示,CCA107个活性成分中槲皮素与TNF、TP53、JUN、MMP9有较好的结合活性。在小鼠Sj病肝纤维化模型中,CCA处理能够减轻炎性细胞浸润,减少Collagen-I、Collagen-Ⅲ沉积(P<0.001,P<0.01),改善肝组织结构,降低其炎症因子IL-6、TNF-α的含量(P<0.05),下调TLR4、MyD88蛋白表达(P<0.01)。结论 CCA可能作用于TNF、MMP9、JUN、TP53靶点,调控TLR4/MyD88信号通路,抑制IL-6、TNF-α等促炎因子释放,进而减少HSC活化及胶原纤维产生,降低ECM的沉积,阻断Sj虫卵肉芽肿的形成,发挥抗Sj感染引起的肝纤维化和保肝的作用。 展开更多

关键词 日本血吸虫病肝纤维化 复方积雪草 网络药理学 分子对接 实验验证

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PI3K/Akt/eNOS信号通路在葛根素抑制ox-LDL诱导的血管内皮细胞组织因子表达中的作用 被引量：17

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作者 邓华菲 李坚 +5 位作者 周琴 谭玉林 谢明 张天杰 韩瑛 张文龙 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1214-1218,共5页

目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K/Akt/eNOS)信号通路在葛根素(puerarin)抑制氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的血管内皮细胞组织因子(tissue factor,TF)表达中的作用。... 目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K/Akt/eNOS)信号通路在葛根素(puerarin)抑制氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的血管内皮细胞组织因子(tissue factor,TF)表达中的作用。方法:实时荧光定量PCR检测TF的mRNA表达,Western blot检测TF和Akt的蛋白表达,硝酸盐还原酶法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)含量。结果:与对照组相比,ox-LDL孵育内皮细胞后,内皮细胞TF的mRNA和蛋白表达升高,Akt蛋白磷酸化水平降低,细胞内NO产生减少;而葛根素预孵育内皮细胞1 h后,再用ox-LDL孵育,内皮细胞TF mRNA和蛋白表达下降,Akt蛋白磷酸化升高,细胞内NO产生增多;PI3K抑制剂LY294002和葛根素共同预孵育内皮细胞1 h后,再用ox-LDL孵育,内皮细胞TF的mRNA和蛋白表达升高,Akt蛋白磷酸化降低,细胞内NO产生减少;eNOS抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)和葛根素共同预孵育内皮细胞,也明显阻断葛根素对ox-LDL诱导的内皮细胞TF mRNA和蛋白表达、细胞Akt蛋白磷酸化和细胞内NO产生的作用。结论:葛根素可通过上调PI3K/Akt/eNOS信号通路抑制ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞TF mRNA和蛋白表达。 展开更多

关键词 葛根素 氧化型低密度脂蛋白 组织因子 PI3K/Akt/eNOS信号通路 血管内皮细胞

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茶多酚对慢性酒精中毒肝损伤影响的实验研究 被引量：7

8

作者 汤银娟 王建钧 +5 位作者 王祥海 潘梦婕 陈卓 肖玲珑 刘嘉华 蔡维君 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第2期198-201,共4页

目的探讨茶多酚在预防慢性酒精中毒对肝损伤方面的作用及其可能的机制。方法将40只雄性昆明小鼠随机分成正常对照组、酒精组、茶多酚低剂量组和茶多酚高剂量组。酒精组、茶多酚组连续90 d喂服30%酒精,8 h后再分别喂服纯水,浓度1%、2%的... 目的探讨茶多酚在预防慢性酒精中毒对肝损伤方面的作用及其可能的机制。方法将40只雄性昆明小鼠随机分成正常对照组、酒精组、茶多酚低剂量组和茶多酚高剂量组。酒精组、茶多酚组连续90 d喂服30%酒精,8 h后再分别喂服纯水,浓度1%、2%的茶多酚悬液。正常对照组以同样方式和剂量每天2次喂服纯水。末次灌胃24 h检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的含量和肝组织中超氧化物歧化酶SOD、丙二醛(MDA)、组织内活性氧类物质(ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)的水平;同时,取肝组织行免疫组织化学显示Bcl-2和Bax的表达。结果与正常对照组比较,酒精损伤组肝细胞Bax阳性表达均明显升高(P<0.01),肝细胞Bcl-2阳性表达明显降低(P<0.01)。茶多酚喂服的两组有所改善。结论慢性酒精中毒可以引起肝损伤,而喂服茶多酚能减轻损伤程度。 展开更多

关键词 茶多酚 酒精中毒 肝脏 BCL-2 BAX

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曲格列汀诱导高糖条件下肾系膜细胞表达HO-1 被引量：1

9

作者 伍先明 李爱琼 +2 位作者 周丽丽 彭小珊 李坚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2163-2168,共6页

目的:观察曲格列汀在高糖条件下对人肾系膜细胞(HRMCs)表达血红素氧合酶1(HO-1)的影响,并初步探讨其分子机制。方法:在正常浓度(5 mmol/L)葡萄糖及高糖(25 mmol/L)条件下培养HRMCs,分别加入1、5和10μmol/L曲格列汀作用8~24 h。随后用RT... 目的:观察曲格列汀在高糖条件下对人肾系膜细胞(HRMCs)表达血红素氧合酶1(HO-1)的影响,并初步探讨其分子机制。方法:在正常浓度(5 mmol/L)葡萄糖及高糖(25 mmol/L)条件下培养HRMCs,分别加入1、5和10μmol/L曲格列汀作用8~24 h。随后用RT-qPCR以及Western blot分别检测HO-1的mRNA和蛋白表达,比色法测定HO-1酶活性。此外,采用荧光探针检测细胞内活性氧簇(ROS)的变化,Western blot检测Akt磷酸化水平和核转录因子E2相关因子2(Nrf2)的表达水平。结果:高糖条件下HRMCs中HO-1的表达以及酶活性水平轻微增高,而经1、5和10μmol/L曲格列汀作用后,HO-1的mRNA、蛋白表达以及酶活性显著增高(P<0.05);同时,曲格列汀也能增加高糖条件下HRMCs的ROS水平并诱导Akt磷酸化,采用ROS清除剂NAC以及PI3K/Akt抑制剂LY294002处理后,HO-1的表达水平明显降低;此外,曲格列汀也可增强HRMCs核内转录因子Nrf2的表达,且NAC和LY294002能抑制曲格列汀诱导的Nrf2的表达。而沉默Nrf2后,曲格列汀诱导的HO-1表达减少。结论:曲格列汀可能能通过ROS和PI3K/Akt途径激活Nrf2而增加高糖条件下HRMCs表达HO-1。 展开更多

关键词 曲格列汀 氧化应激 人肾系膜细胞 PI3K/AKT信号通路

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曲格列汀改善高糖条件下人脐静脉内皮细胞氧化应激水平

10

作者 伍先明 李爱琼 +2 位作者 周丽丽 李坚 阳帆 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期792-795,共4页

目的:观察曲格列汀在高糖条件下对人脐静脉内皮细胞氧化应激水平的影响,并初步探讨其分子机制。方法:在正常葡萄糖浓度(5 mmol/L)及高糖(25 mmol/L)条件下培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),并在此期间分别加入1、5、10μmol/L曲格列汀作用2... 目的:观察曲格列汀在高糖条件下对人脐静脉内皮细胞氧化应激水平的影响,并初步探讨其分子机制。方法:在正常葡萄糖浓度(5 mmol/L)及高糖(25 mmol/L)条件下培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),并在此期间分别加入1、5、10μmol/L曲格列汀作用24 h。随后CCK-8实验测定细胞增殖情况,荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)变化,RT-qPCR以及Western blot分别检测NAD(P) H氧化酶和Nrf2及相关基因HMOX和NQO1的mRNA或蛋白表达水平以及内质网应激相关分子Bip1/Grp78、PDI、Ero1-Lα、Calnexin、IRE-1α和p-eIF2α表达的变化。结果:1、5和10μmol/L曲格列汀作用细胞24 h并不能降低其活性,但可有效降低高糖调剂下细胞内的ROS水平。曲格列汀处理也能明显抑制NAD(P) H氧化酶p22phox亚基mRNA的表达,并能抑制细胞核内核转录因子Nrf2的水平以及上调氧化应激相关基因HMOX和NQO1的表达。此外,高糖条件下内质网应激相关分子Bip1/Grp78、PDI、Ero1-Lα、Calnexin、IRE-1α和p-eIF2α表达水平明显增高,给予曲格列汀处理后,这些分子表达水平明显减少。结论:曲格列汀能增加高糖条件下人脐静脉内皮细胞Nrf2相关基因的表达并减轻内质网应激水平。 展开更多

关键词 曲格列汀 高糖 氧化应激

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人正常上皮细胞的原代培养 被引量：4

11

作者 唐宇 徐文姬 +4 位作者 郭皖北 谢明 方会龙 陈琛 周君 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1327-1333,共7页

传统的人正常上皮细胞原代培养方法存在培养率低、培养出的细胞活性差、操作繁琐等缺点,为了解决这些问题,近年来国内外的众多研究者对人正常上皮细胞的原代培养过程进行了大量研究和不断改进。笔者主要综述人正常上皮细胞分离纯化的一... 传统的人正常上皮细胞原代培养方法存在培养率低、培养出的细胞活性差、操作繁琐等缺点,为了解决这些问题,近年来国内外的众多研究者对人正常上皮细胞的原代培养过程进行了大量研究和不断改进。笔者主要综述人正常上皮细胞分离纯化的一些方法(如组织块分离法、酶消化分离法、机械刷取法、红细胞裂解法、Percoll分层液密度梯度分离法等)以及培养传代中可应用到的一些方法(如无血清培养基联合低浓度血清培养基培养法、鼠尾胶原包被法、玻璃培养瓶联合塑料培养皿培养法);其次阐述了人正常上皮细胞的生物学特性及免疫细胞化学染色法、台盼蓝拒染法等生物学性状检测的方法,并且对培养中无菌操作、培养时和分离时细胞外环境的条件、差速贴壁的次数、添加剂的选择与用量等影响因素作了归纳。 展开更多

关键词 人正常上皮细胞 上皮组织 原代培养

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红细胞膜的稳定性对动脉粥样硬化的影响 被引量：6

12

作者 林日甜 刘欢 +1 位作者 唐朝克 谭玉林 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期280-284,共5页

最近的研究发现,红细胞膜上胆固醇含量与动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的严重程度密切相关。As斑块内破溃的红细胞膜上的胆固醇对坏死核的形成有促进作用。此外,测量红细胞的体积变化的红细胞分布宽度(red blood cell distribution ... 最近的研究发现,红细胞膜上胆固醇含量与动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的严重程度密切相关。As斑块内破溃的红细胞膜上的胆固醇对坏死核的形成有促进作用。此外,测量红细胞的体积变化的红细胞分布宽度(red blood cell distribution width,RDW)可提示As的进展。红细胞通过多个方面对As有促进作用:(1)当红细胞渗入斑块内出血中时,这些红细胞被巨噬细胞氧化并吞噬,存在于这些红细胞膜的胆固醇加速动脉粥样斑块的形成;(2)当红细胞破裂时,红细胞释放血红蛋白,这会导致自由基的产生增多;(3)由于炎症和氧化应激对红细胞生成和红细胞体积影响,增加的RDW可能预测As的进展程度。本综述的目的是阐述红细胞膜上过量的胆固醇是如何影响血液流变学和氧气运输的,以及斑块内出血中的红细胞膜上的胆固醇不断沉积和局部强烈的氧化应激,促进As的进展,从而更好地了解红细胞在As中的作用,可能为As的预防和治疗提供新策略。 展开更多

关键词 红细胞 动脉粥样硬化 红细胞分布宽度 胆固醇 氧化应激

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茶多酚对周围神经损伤的修复作用研究 被引量：4

13

作者 汤银娟 陈龙 +5 位作者 段彦之 李姝 朱斌 左志敏 王祥海 李振林 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第3期301-307,313,共8页

目的研究茶多酚促进周围神经损伤修复的效果。方法成年BALB/c小鼠48只,随机分为茶多酚治疗组、生理盐水组及假手术组,每组16只。前两组制备右侧坐骨神经夹伤模型后每天以灌胃法给药,假手术组仅暴露右侧坐骨神经但不做其它处理。术后14 ... 目的研究茶多酚促进周围神经损伤修复的效果。方法成年BALB/c小鼠48只,随机分为茶多酚治疗组、生理盐水组及假手术组,每组16只。前两组制备右侧坐骨神经夹伤模型后每天以灌胃法给药,假手术组仅暴露右侧坐骨神经但不做其它处理。术后14 d通过足印分析检测小鼠患肢的运动功能,针刺法检测感觉功能;随后每组6只小鼠取坐骨神经提取RNA进行qPCR检测,其余10只小鼠的坐骨神经用于制备NF-200和MBP免疫组化显示再生轴突与髓鞘;其腓肠肌称湿重后制备HE染色切片。结果相对于生理盐水组,茶多酚治疗组的运动及感觉功能检测指标均有改善;腓肠肌湿重比及肌纤维平均横截面积的提高具有统计学意义;损伤神经的远端再生轴突及髓鞘也有提高。结论茶多酚能改善由神经损伤所致的行为学功能丧失以及神经病理改变。 展开更多

关键词 茶多酚 周围神经损伤 神经再生

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湖南省某高校大学生睡眠质量与亚健康状态的相关性分析 被引量：25

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作者 席俊彦 陈龙 +8 位作者 段彦之 李姝 朱斌 左志敏 李愿好 蒋诗音 骆岚兵 汤银娟 王建钧 《中国健康教育》 北大核心 2018年第12期1096-1099,1109,共5页

目的调查高校大学生的亚健康状态和睡眠质量,分析二者相关性。方法采用分层抽样方法 ,使用量表调查2997名湖南省郴州市某本科院校大学生的亚健康状态和睡眠质量,使用SPSS 24. 0软件进行统计分析。结果共调查2767名高校大学生。躯体亚健... 目的调查高校大学生的亚健康状态和睡眠质量,分析二者相关性。方法采用分层抽样方法 ,使用量表调查2997名湖南省郴州市某本科院校大学生的亚健康状态和睡眠质量,使用SPSS 24. 0软件进行统计分析。结果共调查2767名高校大学生。躯体亚健康、心理亚健康和身心亚健康的检出率分别为30.4%、25.9%和22. 2%,其中女生的身心亚健康检出率为24. 4%,高于男生的18.6%(P <0.001),法学专业的躯体亚健康和身心亚健康检出率分别为45.3%和28.1%,高于其他学科(P<0. 001)。低睡眠质量检出率为40.2%,其中男生的检出率为43.0%,高于女生的38.5%(P=0.027);大三的检出率为54.9%,高于其他年级(P<0.001);医学专业的检出率为56. 6%,高于其他学科(P <0.001)。低睡眠质量者中躯体亚健康、心理亚健康和身心亚健康检出率分别为35. 8%、28. 4%和25. 5%,各亚健康维度检出率均高于睡眠质量良好者(P <0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示睡眠质量、主观睡眠质量、入睡时间、睡眠时间、睡眠效率、睡眠障碍和日间功能障碍均为亚健康状态的独立危险因素(P <0.05)。结论湖南省高校大学生亚健康状态和低睡眠质量不容乐观,低睡眠质量可增加亚健康状态发生的风险。 展开更多

关键词 亚健康 睡眠质量 大学生 多因素分析 统计学

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阿托伐他汀对高胆固醇血症大鼠侧支血管中LOX-1和eNOS表达的影响（英文） 被引量：12

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作者 汤银娟 王建钧 +3 位作者 关莹露 蔡维君 唐伟军 罗明英 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1265-1272,共8页

目的探讨阿托伐他汀对高胆固醇血症大鼠侧支血管中LOX-1和eNOS表达的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为4组,即股动脉结扎组(L组)、高胆固醇血症+股动脉结扎组(HL组)、高胆固醇血症+阿托伐他汀+股动脉结扎组(AL组)、高胆固醇血症+生理盐水... 目的探讨阿托伐他汀对高胆固醇血症大鼠侧支血管中LOX-1和eNOS表达的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为4组,即股动脉结扎组(L组)、高胆固醇血症+股动脉结扎组(HL组)、高胆固醇血症+阿托伐他汀+股动脉结扎组(AL组)、高胆固醇血症+生理盐水+股动脉结扎组(NL组)。HL组、AL组和NL组大鼠均喂食可致动脉粥样硬化饲料8周。AL组股动脉结扎后10 mg/kg阿托伐他汀腹腔注射2周。采用免疫荧光法观察后肢侧支血管LOX-1和eNOS的表达。体外实验中,转染LOX-1-siRNA的内皮细胞经oxLDL和阿托伐他汀单独或共同处理后,RT-PCR和Western blotting检测LOX-1和eNOS的表达,Griess法检测NO的产生。结果LOX-1表达于大鼠正常侧支血管中,在高胆固醇血症大鼠中其表达则明显升高,在阿托伐他汀治疗后明显降低。eNOS在正常生长的侧支血管中呈强阳性表达,在高胆固醇血症血管中表达下调,经阿托伐他汀治疗后其表达上调。体外实验中,oxLDL处理使内皮细胞LOX-1表达升高,eNOS表达降低,而阿托伐他汀处理后细胞中LOX-1表达下调,eNOS表达上调。此外,在细胞中使用LOX-1 siRNA干预可消除oxLDL刺激对eNOS表达的影响。结论高胆固醇血症或oxLDL可能通过LOX-1/eNOS通路诱导内皮功能障碍,阿托伐他汀可以改善这一状态,表明阿托伐他汀可作为缺血性疾病诱导侧支血管损害的潜在治疗药物。 展开更多

关键词 动脉生成 阿托伐他汀 内皮细胞 内皮一氧化氮合酶 高胆固醇血症 凝集素样oxLDL受体1 氧化低密度脂蛋白

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葛根素减轻LPS诱导的小鼠急性肾损伤:基于调节SIRT1/NF-κB信号通路 被引量：9

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作者 郭晶晶 张文龙 +6 位作者 梁飘 张龙军 彭凌音 闵钰琦 潘小珍 杨志英 邓华菲 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1248-1253,共6页

目的探讨SIRT1/NF-κB信号通路在葛根素抗脂多糖(LPS)所致急性肾损伤(AKI)中的作用及机制。方法将15只BALB/C小鼠随机分为3组:对照组,LPS组,葛根素组。对照组小鼠腹腔注射生理盐水4 d;LPS组小鼠第1天注射LPS(5 mg/kg),随后注射生理盐水3... 目的探讨SIRT1/NF-κB信号通路在葛根素抗脂多糖(LPS)所致急性肾损伤(AKI)中的作用及机制。方法将15只BALB/C小鼠随机分为3组:对照组,LPS组,葛根素组。对照组小鼠腹腔注射生理盐水4 d;LPS组小鼠第1天注射LPS(5 mg/kg),随后注射生理盐水3 d,葛根素组小鼠第1天注射LPS(5 mg/kg)1 h后注射葛根素(25 mg/kg),继续注射葛根素3 d,第5天收集标本,观察小鼠肾组织形态变化,细胞凋亡情况;测定肾功能指标尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)和肾损伤分子1(KIM-1)以及炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β);检测肾组织SIRT1和NF-κB-p65(acetyl K310)的表达。结果与对照组相比,LPS组小鼠肾小球毛细血管扩张、充血,肾间质水肿,肾小管上皮细胞肿胀,变形脱落,肾小管损伤评分增加(P<0.01),肾组织细胞凋亡率增加(P<0.01),血清中BUN、Scr、KIM-1、TNF-α和IL-1β升高(P<0.01),肾组织TNF-α、IL-1βmRNA和NF-κB p65(acetyl K310)表达增加(P<0.01),而SIRT1表达降低了17%(P<0.05)。与LPS组相比,葛根素处理后肾间质水肿减轻,肾小管上皮细胞脱落不明显,肾小管损伤评分、肾组织细胞凋亡率降低(P<0.01),血清中BUN、Scr、KIM-1、TNF-α和IL-1β降低(P<0.01),肾组织TNF-α和IL-1βmRNA以及NF-κB p65(acetyl K310)表达降低了(P<0.05),SIRT1表达增加了17%(P<0.05)。结论葛根素能够减轻LPS所致AKI,其机制可能与SIRT1/NF-κB信号通路有关。 展开更多

关键词 葛根素 急性肾损伤 脓毒症 SIRT1/NF-κB 炎症因子

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阿托伐他汀对高胆固醇血症大鼠侧支血管生长的影响

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作者 汤银娟 罗华 +2 位作者 朱国富 蔡维君 罗明英 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第6期685-690,共6页

目的探讨阿托伐他汀对高胆固醇血症大鼠侧支血管生长的影响。方法 28只成年SD大鼠,给予高脂饮食8周,建立结扎股动脉诱导的高胆固醇血症大鼠侧支血管生长模型。随机将动物分为单纯股动脉结扎组(L组)、高胆固醇血症+股动脉结扎组(HL组)和... 目的探讨阿托伐他汀对高胆固醇血症大鼠侧支血管生长的影响。方法 28只成年SD大鼠,给予高脂饮食8周,建立结扎股动脉诱导的高胆固醇血症大鼠侧支血管生长模型。随机将动物分为单纯股动脉结扎组(L组)、高胆固醇血症+股动脉结扎组(HL组)和阿托伐他汀(0.3 mg·kg-1·14 d-1,腹腔注射)+高胆固醇血症+股动脉结扎组(AL组)。存活7 d后,采用血管造影,HE染色和共聚焦免疫荧光术,观察高胆固醇血症情况下,阿托伐他汀应用对侧支血管生长的作用以及重要的促侧支血管生长分子在侧支血管表达模式的变化。结果与L组比较,HL组的侧支血管数目减少,侧支血管生长受到损害,表现为血管内膜过度增生,中膜明显增厚,导致血管腔狭窄,且血管壁细胞增殖和外膜炎症细胞减少;AL组应用了阿托伐他汀,侧支血管的生长较HL组明显改善,发育为管腔较大的侧支血管,血管壁细胞的增殖和外膜炎症细胞增多,侧支血管数目增加。其侧支血管数目,血管横截面积和免疫荧光强度差异具有统计学意义(P<0.05)。结论高胆固醇血症损害大鼠后肢侧支血管的生长;阿托伐他汀可促进血管壁细胞的增殖和外膜巨噬细胞的增多,从而改善和恢复侧支血管的生长。 展开更多

关键词 高胆固醇血症 阿托伐他汀 缺血性疾病 侧支血管

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氟马西尼联合肾上腺素对钩吻中毒的解救作用 被引量：3

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作者 李玉娟 肖宁 +3 位作者 贾文丹 李霞荣 郑晓峰 孙志良 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期938-946,共9页

旨在研究氟马西尼联合肾上腺素对钩吻中毒大鼠的解救效果,并验证钩吻可能的毒性作用靶点,为钩吻中毒机制探讨及解救钩吻中毒病例提供参考。构建钩吻大鼠中毒模型,将60只大鼠随机分为4组,分别为对照组、氟马西尼解救组、肾上腺素解救组... 旨在研究氟马西尼联合肾上腺素对钩吻中毒大鼠的解救效果,并验证钩吻可能的毒性作用靶点,为钩吻中毒机制探讨及解救钩吻中毒病例提供参考。构建钩吻大鼠中毒模型,将60只大鼠随机分为4组,分别为对照组、氟马西尼解救组、肾上腺素解救组、联合用药(氟马西尼+肾上腺素)解救组,记录各组大鼠中毒及死亡情况,并监测各组大鼠血压、心率,评价各组药物的解救效果。采用分子对接、全细胞膜片钳技术,预测钩吻主要毒性物质钩吻素己与解救药物作用的靶点,阐释其可能的解毒机制。结果显示:钩吻灌胃大鼠的半数致死量(LD50)为0.25 g·kg^(-1),氟马西尼联合肾上腺素使用时对钩吻中毒的大鼠有显著的解救效果,存活率由25%提高到92%(P<0.01),且平均中毒症状出现时间由16.56 min延长至25.98 min(P<0.01),平均死亡时间由40.13 min延长至58.05 min(P<0.01),解救效果显著高于氟马西尼和肾上腺素单独解救组。联合用药组还可显著缓解中毒所致的大鼠血压、心率下降的临床表征。分子对接计算机模拟结果显示,氟马西尼与钩吻素己都与GABA_(A)受体同一活性位点有较好的结合效果,且氟马西尼的结合能-85.47 kJ·mol^(-1),强于钩吻素己结合能-77.15 kJ·mol^(-1)。全细胞膜片钳结果显示,钩吻素己可显著延长GABA_(A)受体离子通道的开放时间,而氟马西尼可拮抗此作用。综上所述,氟马西尼和肾上腺素联合使用对钩吻中毒大鼠具有明显的解救效果,钩吻神经毒性靶点与氟马西尼作用的GABA_(A)受体密切相关,肾上腺素对调节中毒所致的血压下降起到关键作用,联合用药可起到标本兼治效果。 展开更多

关键词 钩吻 氟马西尼 肾上腺素 毒性机制 GABA_(A)受体

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地锦草与5种抗菌药联用对猪链球菌的体外抑菌效果 被引量：2

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作者 江超 姚飞虹 +5 位作者 张之怡 程庆 罗稀楷 李嗣忻 舒宇 王歧本 《安徽农业科学》 CAS 2019年第24期114-116,共3页

[目的]探究地锦草与其他抗菌药物对猪链球菌的体外联合抗菌效果,达到有效防止猪链球菌的目的。[方法]采用琼脂稀释法、微量肉汤棋盘稀释法,分别测定了地锦草与庆大霉素、青霉素、头孢曲松、阿莫西林、硫酸链霉素对3株猪链球菌的最小抑... [目的]探究地锦草与其他抗菌药物对猪链球菌的体外联合抗菌效果,达到有效防止猪链球菌的目的。[方法]采用琼脂稀释法、微量肉汤棋盘稀释法,分别测定了地锦草与庆大霉素、青霉素、头孢曲松、阿莫西林、硫酸链霉素对3株猪链球菌的最小抑菌浓度(MIC)及分级抑菌浓度指数(FIC)。[结果]地锦草和5种抗菌药联用后对3株链球菌的MIC有不同程度的降低,联用后都表现为相加或协同效果。[结论]地锦草在体外与5种抗菌药联用可减少抗菌药物用量,增强药物对细菌的抑制作用。 展开更多

关键词 地锦草 抗菌药物 体外联合药敏试验 猪链球菌

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生命潮生物反馈技术干预2型糖尿病的先导观察 被引量：1

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作者 刘泽 何汶霞 +5 位作者 房睿哲 肖钢 言芳 邱祁广 方会龙 王俊杰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1622-1628,共7页

目的探讨生命潮生物反馈技术对2型糖尿病(T2DM)的治疗效果,为T2DM的临床治疗提供新技术。方法分析5例T2DM患者经生命潮生物反馈技术干预治疗后平均血糖、预估糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖及HbA1c的变化情况,干预期间联合瞬感血糖监测... 目的探讨生命潮生物反馈技术对2型糖尿病(T2DM)的治疗效果,为T2DM的临床治疗提供新技术。方法分析5例T2DM患者经生命潮生物反馈技术干预治疗后平均血糖、预估糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖及HbA1c的变化情况,干预期间联合瞬感血糖监测系统进行减药管理。结果与干预前使用降糖药相比,经干预治疗停用降糖药物后,其平均血糖、空腹血糖及HbA1c的差异无统计学意义(P>0.05),但预估HbA1c较干预前使用降糖药时明显降低(P<0.05);干预治疗后2例患者实现完全缓解,2例患者实现部分缓解,1例患者血糖得到明显改善;有1例患者经干预后其手足末端温度升高(P<0.05);另有1例患者经干预后心率的差异无统计学意义(P>0.05),但心率变异性指数升高(P<0.05)。结论生命潮生物反馈技术可通过促进自主神经系统调控平衡及改善微循环,在不改变原有生活方式下,帮助T2DM患者停用降糖药,维持血糖稳定,实现疾病缓解,降低并发症的发生。 展开更多

关键词 生命潮生物反馈 2型糖尿病 缓解

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