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雌二醇联合1,25-二羟维生素D3对绝经后骨质疏松症大鼠的治疗作用 被引量:14
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作者 李希宁 翁伟 +2 位作者 沈哲源 豆晓杰 闵继康 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期857-864,共8页
目的:探讨雌二醇联合1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对绝经后骨质疏松症(PMOP)大鼠的治疗作用,并阐明其作用机制。方法:40只雌性SD大鼠随机分为对照组、骨质疏松症模型组(模型组)、卵巢去势后雌二醇干预组(雌二醇组)和卵巢去势后雌二... 目的:探讨雌二醇联合1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对绝经后骨质疏松症(PMOP)大鼠的治疗作用,并阐明其作用机制。方法:40只雌性SD大鼠随机分为对照组、骨质疏松症模型组(模型组)、卵巢去势后雌二醇干预组(雌二醇组)和卵巢去势后雌二醇联合1,25(OH)2D3组[雌二醇联合1,25(OH)2D3组],每组10只,连续喂养24周后取大鼠血清,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血清中成骨标志物碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)、骨保护素(OPG)、Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PINP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)和骨吸收标志物核因子κB受体活化因子配体(RANKL)水平。取大鼠双侧股骨,采用HE和TRAP染色观察大鼠骨组织形态表现,采用骨密度仪和力学生物仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD)和骨组织弹性模量、刚度、最大应力及最大承受力。取大鼠双侧胫骨,采用逆转录PCR(RT-PCR)法和Western blotting法检测各组大鼠骨组织中ALP、OC、OPG及RANKL mRNA和蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠血清中ALP、OC、OPG、PINP、TRACP和RANKL水平明显升高(P<0.01);大鼠骨膜厚度明显增加,破骨细胞数量增多且骨外膜下可见少许点状虫蚀状缺损,呈现典型骨质疏松特点;大鼠股骨BMD和生物力学指标明显降低(P<0.01),骨组织中ALP、OC、OPG及RANKL mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组比较,雌二醇联合1,25(OH)2D3组大鼠血清中ALP、PINP、TRACP和RANKL水平明显降低(P<0.01),OPG/RANKL比值明显升高(P<0.01);骨膜内成骨细胞增生活跃,且骨膜下无虫蚀状缺损;大鼠股骨BMD和生物力学指标明显升高(P<0.01),骨组织中ALP、OC及RANKL mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与雌二醇组比较,雌二醇联合1,25(OH)2D3组大鼠血清中OC和OPG水平及OPG/RANKL比值明显升高(P<0.01),TRACP和RANKL水平明显降低(P<0.01),大鼠股骨BMD和生物力学指标中弹性模量及最大应力明显升高(P<0.01),骨组织中OPG mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01),RANKL mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:雌二醇联合1,25(OH)2D3能更有效地促进大鼠成骨细胞的增殖和分化,二者联合应用可在治疗PMOP的同时降低过量激素替代导致的不良反应发生率。 展开更多
关键词 绝经后骨质疏松症 成骨细胞 雌二醇 1 25-二羟维生素D3 骨密度
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mTOR磷酸化水平对成骨MC3T3E1细胞增殖、自噬和分化的作用及其机制 被引量:2
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作者 李希宁 翁伟 +3 位作者 沈哲源 豆晓杰 赵宇 闵继康 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期575-586,共12页
目的:通过雷帕霉素(RAPA)和MHY1485抑制和激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的磷酸化,探讨磷酸化mTOR(p-mTOR)水平变化对成骨细胞增殖、自噬和分化的作用及其机制。方法:小鼠成骨MC3T3-E1细胞分为对照组、20 nmol·L^(-1)RAPA组、60... 目的:通过雷帕霉素(RAPA)和MHY1485抑制和激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的磷酸化,探讨磷酸化mTOR(p-mTOR)水平变化对成骨细胞增殖、自噬和分化的作用及其机制。方法:小鼠成骨MC3T3-E1细胞分为对照组、20 nmol·L^(-1)RAPA组、60 nmol·L^(-1)RAPA组、160 nmol·L^(-1)RAPA组和2.0μmol·L^(-1)MHY1485组。流式细胞术检测各组不同细胞周期MC3T3-E1细胞百分率,Western blotting和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中mTOR及下游真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)和核糖体S6激酶1(S6K1)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和Caspase-3、碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(Runx2)和成骨相关转录因子Osterix的表达水平,茜素红染色观察各组成骨MC3T3-E1细胞矿化能力。结果:与对照组比较,20和60 nmol·L^(-1)RAPA组细胞增殖活性升高(P<0.05或P<0.01),G1期细胞百分率降低(P<0.05或P<0.01),S期细胞百分率升高(P<0.05或P<0.01),细胞中p-mTOR及其下游通路磷酸化4E-BP1(p-4E-BP1)、磷酸化S6K1(p-S6K1)水平和p62、Bax、Cleaved-Caspase-3表达水平降低(P<0.05或P<0.01)、LC3-Ⅱ、Bcl-2、ALP和Runx2表达水平升高(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,160 nmol·L^(-1)RAPA组细胞增殖活性降低(P<0.01)、细胞中p-mTOR、p-4E-BP1和p-S6K1水平明显降低(P<0.05或P<0.01),2.0μmol·L^(-1)MHY1485组细胞增殖活性明显降低(P<0.01),细胞中p-mTOR、p-4E-BP1和p-S6K1水平明显升高(P<0.01),160 nmol·L^(-1)RAPA和2μmol·L^(-1)MHY1485组细胞中Bax和Cleaved-Caspase-3表达水平升高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2、ALP、Runx2和Osterix表达水平降低(P<0.05或P<0.01);作用12 d后,20和60 nmol·L^(-1)RAPA组细胞中可见明显矿化结节,160 nmol·L^(-1)RAPA和2.0μmol·L^(-1)MHY1485组成骨细胞中见极少数钙盐结晶。结论:轻中度抑制mTOR的磷酸化可促进成骨细胞增殖、自噬和分化,而过度抑制和增强mTOR磷酸化则具有相反作用。 展开更多
关键词 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 成骨细胞 细胞增殖 自噬 分化
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斜外侧入路椎间融合术联合不同固定方式治疗腰椎滑脱症的早期疗效分析 被引量:3
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作者 李海东 何守玉 +1 位作者 方申云 闵继康 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期890-897,共8页
目的:比较斜外侧入路椎间融合术(oblique lateral interbody fusion,OLIF)联合不同固定方式治疗腰椎滑脱症的早期临床疗效及并发症情况。方法:回顾性分析2020年1月~2022年1月于我院接受OLIF治疗的腰椎滑脱症患者53例,其中男性24例,女性2... 目的:比较斜外侧入路椎间融合术(oblique lateral interbody fusion,OLIF)联合不同固定方式治疗腰椎滑脱症的早期临床疗效及并发症情况。方法:回顾性分析2020年1月~2022年1月于我院接受OLIF治疗的腰椎滑脱症患者53例,其中男性24例,女性29例,年龄62.17±9.72岁;OLIF联合侧方钢板(lateral plate,LP)固定组24例(LP组),OLIF联合后方椎弓根螺钉(pedicle screw,PS)内固定组29例(PS组)。两组患者的年龄、性别及体质指数(body mass index,BMI)等人群特征均无明显统计学差异。记录两组患者的手术时间、术中出血量、术后并发症情况。于术前、术后1周、3个月及12个月分别采用腰痛视觉模拟评分(visual analog scale,VAS)、Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)及影像学指标如椎间隙高度(disc height,DH)、椎间孔高度(foraminal height,FH)、椎管横截面积(cross-sectional area,CSA)来综合评价临床疗效。末次随访时根据Bridwell评估方法对椎间融合率进行评估。结果:随访时间为13.2±6.5个月(12~16个月)。LP组手术时间及术中出血量均显著性低于PS组(75.41±11.53min vs 127.05±5.62min,P<0.05;39.55±5.32mL vs 89.81±9.62mL,P<0.05)。两组患者术前VAS评分、ODI指数均无统计学差异,术后1周LP组VAS评分及ODI均优于PS组[3.05±0.67 vs 4.55±0.39,P<0.01;(17.36±2.76)%vs(22.80±6.02)%,P<0.01],但这种差异在术后1年时消失。LP组术前DH、FH及CSA分别为8.96±1.23mm,16.18±3.49mm和88.95±14.79mm^(2),术后1年分别为12.53±3.47mm、20.14±3.12mm、124.83±7.56mm^(2),较前均明显改善;PS组术前DH、FH及CSA分别为8.66±2.21mm、16.35±5.19mm、89.23±12.18mm^(2),术后1年分别为12.32±4.67mm、20.86±3.44mm、125.75±7.76mm^(2),较前均明显改善,但各参数在同期随访时无组间差异。LP组22例实现椎间融合,融合率为91.67%,略低于PS组(93.10%),但无统计学差异。LP组融合器沉降2例,腰骶丛损伤2例;PS组融合器沉降2例,腰骶丛损伤1例,并发症发生率组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:OLIF+LP及OLIF+PS均可有效治疗腰椎滑脱症,相比于OLIF+PS,OLIF+LP的出血量更少、手术时间更短,而临床效果相当。 展开更多
关键词 腰椎滑脱症 斜外侧入路椎间融合术 侧方钢板 椎弓根螺钉
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