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MG53蛋白乳酸化修饰通过介导心肌细胞铁死亡加重小鼠心肌缺血再灌注损伤
1
作者 李小旺 方飞 +3 位作者 陆建忠 强鑫华 卢凯 廖俊 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第4期653-660,共8页
目的:探究mitsugumin 53(MG53)蛋白乳酸化水平在小鼠心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)中的变化,并进一步探索MG53乳酸化影响心肌细胞I/R损伤的潜在分子机制。方法:16只C57BL/6小鼠随机分为假手术组和I/R组,每组8只。使用左前... 目的:探究mitsugumin 53(MG53)蛋白乳酸化水平在小鼠心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)中的变化,并进一步探索MG53乳酸化影响心肌细胞I/R损伤的潜在分子机制。方法:16只C57BL/6小鼠随机分为假手术组和I/R组,每组8只。使用左前降之冠状动脉结扎后再灌注的方法构建小鼠心肌I/R模型,对假手术组小鼠开胸但不进行结扎和再灌注。将H9C2大鼠心肌细胞随机分为对照组、缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)组、H/R+2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)组和H/R+2-DG+乳酸(lactate)组。对照组细胞在DMEM完全培养液中常氧培养;H/R组细胞先置于厌氧室(95%N_(2)和5%CO_(2))中,37℃培养2 h,随后转移至95%空气和5%CO_(2)的常氧再培养24 h;H/R+2-DG组细胞在培养液中添加5 mmol/L 2-DG并进行H/R操作;H/R+2-DG+lactate组细胞培养基中添加5 mmol/L 2-DG和20 mmol/L lactate并进行H/R操作。在小鼠模型中,用TTC染色和HE染色观察小鼠心肌缺血和损伤情况;用ELISA检测小鼠心肌损伤相关蛋白肌酸激酶和心肌钙蛋白I的表达情况;用免疫荧光检测MG53表达情况。在体外细胞模型中,CCK-8试剂盒和流式细胞术分别被用于检测细胞活力和凋亡水平。使用免疫沉淀和Western blot检测小鼠心肌组织和H9C2细胞中MG53蛋白、乳酸化MG53蛋白和铁死亡相关蛋白的表达情况;使用相应试剂盒检测小鼠心肌组织和H9C2细胞中活性氧、亚铁离子、乳酸脱氢酶和丙二醛水平。结果:I/R组小鼠心肌组织出现明显损伤,MG53蛋白表达水平下降,MG53蛋白乳酸化水平上升,细胞铁死亡水平上升。在体外心肌细胞中,H/R组细胞活力显著下降,凋亡水平显著升高,铁死亡水平显著升高,MG53蛋白表达量显著下降,MG53乳酸化水平显著上升。与H/R组相比,H/R+2-DG组细胞活力上升,凋亡水平下降,铁死亡水平下降,MG53表达量上升,MG53乳酸化水平下降。与H/R+2-DG组相比,H/R+2-DG+lactate组细胞活力显著下降,细胞凋亡水平、铁死亡水平和MG53乳酸化水平显著上升,MG53表达水平显著下降。结论:在小鼠心肌I/R过程中,MG53蛋白表达下调且MG53蛋白乳酸化水平上升。MG53乳酸化水平的上升可能通过介导心肌细胞铁死亡而加重小鼠心肌I/R损伤。 展开更多
关键词 心肌缺血 再灌注损伤 铁死亡 MG53蛋白 非组蛋白乳酸化
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多部门协作缩短住院患者急诊标本检验分析前周转时间的实践 被引量：9
2
作者 蔡建利 周勤学 +7 位作者 李思娇 诸宇佳 沈丽娟 韩慧 朱昊旭 韩卫平 蔡云祥 沈志昊 《中国护理管理》 CSCD 北大核心 2020年第9期1432-1436,共5页
目的:研究通过多部门协作管理对缩短住院患者急诊标本检验分析前TAT的实践效果。方法:建立多部门协作专案改善团队,通过现况调查、要因分析找出要因,经头脑风暴和决策矩阵分析确定信息系统改进、人员绩效管理、目视化管理3大可行方案并... 目的:研究通过多部门协作管理对缩短住院患者急诊标本检验分析前TAT的实践效果。方法:建立多部门协作专案改善团队,通过现况调查、要因分析找出要因,经头脑风暴和决策矩阵分析确定信息系统改进、人员绩效管理、目视化管理3大可行方案并付诸实践,将改善前(2017年5月)和改善后(2018年5月)住院患者急诊标本检验分析前TAT数据进行对比,观察实践效果。结果:住院患者急诊标本检验分析前TAT中位数从改善前的43.79min降低至改善后的23.64 min,顺利完成了团队既定目标(≤26 min)。T开-采、T采-送、T送-接中位数分别从改善前的13.85 min、18.36 min、11.58 min降至改善后的7.21 min、9.97 min、6.46 min,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:多部门协作管理,有利于增进沟通和优势互补,实现资源的最大利用,促进工作更有效率,更有效益。可不断提升管理水平,缩短住院患者急诊标本检验分析前TAT。 展开更多
关键词 多部门协作 急诊检验 周转时间 质量改进 医院信息系统
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人参皂苷Rg1调控Epac1/Rap1信号通路对缺血性脑卒中大鼠神经保护作用机制研究 被引量：10
3
作者 王坤 许佩佩 +1 位作者 周兰兰 鲁晟 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2023年第7期721-727,共7页
目的:研究人参皂苷Rg1对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用并探究其作用机制。方法:将84只13周龄左右的SPF级SD雄性大鼠随机分为7组(n=12):假手术组、模型组、Rg1低剂量组、Rg1中剂量组、Rg1高剂量组、Epac1激动剂组、Epac1抑制剂组。模... 目的:研究人参皂苷Rg1对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用并探究其作用机制。方法:将84只13周龄左右的SPF级SD雄性大鼠随机分为7组(n=12):假手术组、模型组、Rg1低剂量组、Rg1中剂量组、Rg1高剂量组、Epac1激动剂组、Epac1抑制剂组。模型组、Rg1低、中、高剂量组、Epac1激动剂组、Epac1抑制剂组均采用线栓法建立永久性局灶脑缺血大鼠模型。Rg1低中高剂量组大鼠每天上午固定时间进行灌胃给药,Rg1低剂量组、Rg1中剂量组和Rg1高剂量组分别使用60、120、240μmol/L Rg1处理;Epac1激动剂组和Epac1抑制剂组大鼠每天上午固定时间进行腹腔注射给药,Epac1激动剂8-CPT使用浓度为1.0×10^(4)μmol/L,抑制剂ESI-09使用浓度为1.0×10^(5)μmol/L。连续给药两周后,将各组大鼠施以断头处死。分别采用TTC染色、尼氏染色、TUNEL染色、微量酶标法、Western blot法检测各组大鼠脑梗死体积、完整神经元数目、氧化损伤指标、细胞凋亡情况,以及NOX2、Epac1、Rap1、caspase3的蛋白表达水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠脑梗死体积明显增大,脑组织中完整的神经元数量明显减少,脑组织中神经元氧化损伤明显加重,神经细胞凋亡率明显升高,NOX2、Epac1、Rap1、Caspase3蛋白表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,Rg1低、中、高剂量组和Epac1抑制剂组大鼠脑梗死体积明显减少,脑组织中完整的神经元数量明显增多,神经细胞凋亡率明显降低,NOX2、Epac1、Rap1、Caspase3蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人参皂苷Rg1可以调控缺血性脑卒中后的Epac1/Rap1信号通路,减轻脑神经元的氧化应激,从而减轻神经功能损害,发挥对神经细胞的保护作用。 展开更多
关键词 人参皂苷RG1 Epac1 缺血性脑卒中 神经保护
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