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罗氏沼虾神经细胞的原代培养及其在病毒研究中的应用
1
作者 黄笑 王国浩 +4 位作者 董宣 唐琼英 段虎 杨国梁 黄倢 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2024年第4期187-194,共8页
细胞平台是研究病原–宿主互作的重要工具,虾类细胞系的缺少严重制约了虾类病毒学研究。传染性早熟病毒(IPV)是近年来发现的能够导致罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)性早熟和生长缓慢的一种新病毒,主要侵染罗氏沼虾神经组织。为建... 细胞平台是研究病原–宿主互作的重要工具,虾类细胞系的缺少严重制约了虾类病毒学研究。传染性早熟病毒(IPV)是近年来发现的能够导致罗氏沼虾(Macrobrachiumrosenbergii)性早熟和生长缓慢的一种新病毒,主要侵染罗氏沼虾神经组织。为建立罗氏沼虾病毒–宿主互作的体外研究平台,本研究采用木瓜蛋白酶消化健康罗氏沼虾的脑、眼柄、胸神经节和腹神经节,获取罗氏沼虾神经细胞,并利用L-15培养基进行离体培养。选择培养效果最佳的脑神经细胞进行IPV体外感染。结果显示,培养的原代细胞在含有谷氨酰胺的L-15培养基中生长良好,其中,从脑组织和眼柄X器官–窦腺复合体中分离出的细胞在体外存活时间可达15d,从胸腹神经节中分离出来的细胞在体外存活时间达9 d。在本研究所采用的感染方式和剂量条件下,脑细胞在感染96 h后检测到高载量的IPV。本研究建立了一种操作简便的罗氏沼虾神经细胞原代培养技术,为罗氏沼虾神经内分泌研究和病毒–宿主互作提供了基础数据和平台。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 神经细胞 原代培养 传染性早熟病毒
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罗氏沼虾不同育种群体遗传多样性研究 被引量：4
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作者 唐琼英 谢巨洪 +6 位作者 夏正龙 蔡缪荧 吴云明 白鹿淮 杜厚宽 李景芬 杨国梁 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1097-1104,共8页
为深入了解罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)不同种质资源的遗传背景,研究采用微卫星标记和线粒体基因相结合,对罗氏沼虾4个育种群体,即选育3代的数丰核心群体(SF)、引进的正大群体(ZD)、正大和数丰杂交的群体(ZDS)、正大子代和数... 为深入了解罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)不同种质资源的遗传背景,研究采用微卫星标记和线粒体基因相结合,对罗氏沼虾4个育种群体,即选育3代的数丰核心群体(SF)、引进的正大群体(ZD)、正大和数丰杂交的群体(ZDS)、正大子代和数丰杂交的群体(ZD2S)的遗传多样性进行了研究。150个个体的微卫星分析结果显示,7个微卫星位点均表现出高度多态性(PIC>0.5),4个群体平均的等位基因数(N_a)、期望杂合度(H_e)和多态信息含量(PIC)分别为19.43、0.8980和0.8867。SF群体的平均H_e(0.874)和PIC(0.854)最高,ZD2S的H_e(0.863)和PIC(0.834)其次,ZDS群体的H_e(0.798)和PIC(0.761)最低。4个群体间的遗传分化指数(F_(ST))为0.04166—0.10438,处于中低水平的遗传分化,其中,ZD和ZDS的遗传分化最大,F_(ST)为0.10438。线粒体COⅠ和12S rRNA基因组合序列分析结果显示,149个个体共识别27个单倍型,平均单倍型多样性(H_d)和核苷酸多样性(π)分别为0.846和0.00313。在4个群体中,ZD2S群体的H_d值最高,其次为SF群体,ZDS的最低;对于π值,SF群体的最高,其次为ZD2S群体,ZD群体的则最低,该结果与微卫星的结果基本一致。但基于线粒体基因的群体间遗传分化较小,F_(ST)值为–0.02226—0.07310,小于微卫星估计的结果。微卫星和线粒体基因一致表明,SF和ZD2S两个群体均保持着较高的遗传多样性,具有进一步选育的潜力。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 微卫星标记 COⅠ 12S rRNA 遗传多样性 育种
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罗氏沼虾不同养殖模式池塘水体理化因子及浮游植物群落特征
3
作者 何鉴桥 孔天赐 +4 位作者 娄浩宇 许珊华 张荣飞 杨国梁 唐琼英 《淡水渔业》 北大核心 2025年第4期55-63,共9页
为探索罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)的生态养殖模式,本研究选择7口罗氏沼虾养殖池塘,其中3口池塘为生态养殖组(S组,种草、混养鲢并加底增氧的低密度养殖),2口池塘为传统养殖组(C组,无草无底增氧的高密度单养),2口池塘为生态修复... 为探索罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)的生态养殖模式,本研究选择7口罗氏沼虾养殖池塘,其中3口池塘为生态养殖组(S组,种草、混养鲢并加底增氧的低密度养殖),2口池塘为传统养殖组(C组,无草无底增氧的高密度单养),2口池塘为生态修复组(D组,实验前三年采用和C组相同的传统养殖模式,实验当年经干塘并生石灰彻底消毒后采用和S组相同的养殖模式),在罗氏沼虾生长高峰期且易发蓝藻的8-10月期间每周一次采集水样,系统地比较了三种养殖模式对蓝藻群落结构的影响。结果显示:S组和D组的TN、TAN、NO-3-N、NO-2-N、AP、TP、CODMn、Chl-a和SS共9个理化指标均显著低于C组;三组池塘浮游植物共有8门59属,其中占比最多的均为蓝藻门,其相对丰度在C组、D组、S组分别为75.24%、63.94%、55.23%;S组的浮游植物Shannon-Wiener多样性指数和Margalef丰富度指数显著高于C组和D组。冗余分析表明,影响蓝藻丰度的主要理化因子S组是磷酸盐和叶绿素a, C组是水温和磷酸盐,D组是高锰酸盐指数。因此,罗氏沼虾生态养殖模式相较于传统养殖模式,蓝藻丰度和水体富营养化程度更低,浮游植物多样性水平更高,池塘生态系统更稳定;传统养殖模式的池塘经过生态养殖模式改良,水质会有一定改善。 展开更多
关键词 罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii) 蓝藻 水体理化因子 冗余分析
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防止和修复湖泊水库富营养化渔业操纵的探讨 被引量：7
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作者 王宇庭 叶金云 郑荣泉 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期451-456,共6页
为防止和修复湖泊水库富营养化,通过渔业操纵实现营养物质的上岸,找到适合所有水体的生态治理方式,本研究中系统归纳了在不同营养类型、不同水体形态和不同营养物质输入节奏水体的渔业操纵对策。结果表明:对于受面源污染较小,营养物质... 为防止和修复湖泊水库富营养化,通过渔业操纵实现营养物质的上岸,找到适合所有水体的生态治理方式,本研究中系统归纳了在不同营养类型、不同水体形态和不同营养物质输入节奏水体的渔业操纵对策。结果表明:对于受面源污染较小,营养物质输入分散的贫、中营养水体,应以保护生物多样性的长食物链的渔业形式为主,即实行以肉食性鱼类为主要对象的渔业操纵;随着水体富营养化程度的提高或营养物质输入集中度的提高,逐渐增加杂食性鱼类的比例,其中滤食性鱼类和底层杂食性鱼类的放养比例应根据水体深度和面积进行调整,不应夸大滤食性鱼类在所有形态水体中的除藻效果,尤其在浅而大的湖泊中,底层杂食性鱼类可通过吞食或刮食被湖盆吸附的藻类,实现除藻作用;对于超富营养水体,除了以杂食性鱼类为主的渔业操纵方式外,还需要增加水体的异质性,以提高水体的生物多样性,以及水中营养物质(鱼产量)被浓缩上岸的速度。本研究中首次提出对大而浅的富营养水体进行围栏分割,将大生态系统分割为互相依托的小生态系统景观集合体的生态修复方法,同时还阐述了渔业操纵效果的评价方法。 展开更多
关键词 渔业操纵 富营养化 异质性 生态修复
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凡纳滨对虾在低氧环境下存活性状的遗传参数评估 被引量：1
5
作者 段毓佳 谭建 +5 位作者 栾生 罗坤 王宏杰 隋娟 孟宪红 孔杰 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2024年第1期138-147,共10页
在水产养殖中,尤其是高密度养殖情况下,缺氧会短期内造成个体的大量死亡,从而影响生产效益。本研究以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)高抗和快大2个品系作为研究对象,利用高致死溶解氧(DO)胁迫的方式,对2个品系各41个家系共计6560尾... 在水产养殖中,尤其是高密度养殖情况下,缺氧会短期内造成个体的大量死亡,从而影响生产效益。本研究以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)高抗和快大2个品系作为研究对象,利用高致死溶解氧(DO)胁迫的方式,对2个品系各41个家系共计6560尾幼虾进行低氧耐受性测试,统计高致死溶解氧水平下幼虾的存活性状,分析不同品系间及同一品系不同家系间耐低氧性状的差异,评估其遗传参数;对耐受性有显著差异的家系个体的鳃、肌肉、肝胰腺组织进行组织学观察,并比较其细胞水平上的差异。结果显示,在0.3mg/L低氧条件下,高抗品系和快大品系的家系半致死存活率SS50均表现出显著差异(P<0.05),高抗品系SS50为49.30%,快大品系SS50为42.52%;家系间存活时间的变异系数分别为60%和45%。利用阈值性状动物模型,以半致死时的个体存活状态作为观测值(存活为1,死亡为0)估算的遗传参数为(0.345±0.031)~(0.378±0.029),经过转换后在连续变化的观测值尺度上的遗传力为(0.219±0.031)~(0.237±0.029),表现为中等遗传力水平。高抗品系中低氧耐受家系和低氧敏感家系的鳃、肌肉和肝胰腺组织均出现不同程度的损伤,但不同的家系间表现出不同程度的抗逆生理特征差异,这可能与高抗不同家系抗逆耐受力强弱有关。不同家系间在低氧胁迫下的存活时间、生理特性差异以及各品系遗传力估算结果表明,凡纳滨对虾对高致死溶解氧水平的耐受性状存在丰富的遗传变异,具有选育的可行性。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 低溶解氧 遗传力 组织损伤 选育
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五个罗氏沼虾群体遗传多样性的微卫星分析 被引量：9
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作者 李景芬 夏正龙 +6 位作者 栾生 蔡缪荧 罗坤 唐琼英 高权新 孔杰 杨国梁 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1208-1214,共7页
利用16对微卫星标记对来自泰国(CP)、缅甸(MN)、孟加拉(BD)和中国(MP和DP)的共5个罗氏沼虾群体进行了遗传多样性和遗传结构的分析。结果显示,16个微卫星位点均具有较高的多态性,平均等位基因数(Na)、期望杂合度(He)、Shannon信息指数(I... 利用16对微卫星标记对来自泰国(CP)、缅甸(MN)、孟加拉(BD)和中国(MP和DP)的共5个罗氏沼虾群体进行了遗传多样性和遗传结构的分析。结果显示,16个微卫星位点均具有较高的多态性,平均等位基因数(Na)、期望杂合度(He)、Shannon信息指数(I)和多态信息含量(PIC)分别为17.563、0.8316、2.1662和0.7328。5个群体的期望杂合度(He)介于0.7025—0.8594,多态信息含量(PIC)介于0.6538—0.8048,表明所有群体均具有高度遗传多样性,遗传多样性水平CP>MP>BD>MN>DP。遗传分化指数(Fst)值介于0.03430—0.17333,表明所有群体间均有不同程度的遗传分化。16个微卫星位点的Fst值均大于0.05,均值为0.0977,与群体间有遗传分化相符。AMOVA分析显示群体间变异占总变异的6.22%,群体内个体间的变异占总变异的40.72%,个体内部的遗传变异占总变异的53.07%。基于Nei氏遗传距离构建的UPGMA系统进化树显示,MN群体首先与MP群体聚为一类,再与DP群体聚为一类,之后再与BD群体聚为一类,最后与CP群体聚为一类,表明中国群体与泰国群体亲缘关系较远。遗传结构分析显示,参试样本被划分为5个理论群体,除MP群体中个体遗传结构混杂外,其余群体中个体遗传结构相对独立。研究为罗氏沼虾种质资源的开发利用和优良品种的选育提供了参考数据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 微卫星标记 遗传多样性 群体遗传结构
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罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)初次性成熟性腺发育的组织学观察 被引量：2
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作者 陈国柱 钟镇霄 +7 位作者 杨旻珉 邢钱钱 夏正龙 唐琼英 易少奎 蔡缪荧 杨杰 杨国梁 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1208-1218,共11页
性腺发育是罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)个体生长及繁育的重要生物学过程,是良种培育的基础。采用外部形态观察及常规石蜡切片的方法,分析了罗氏沼虾初次性成熟过程中性腺外部形态及内部组织学变化的规律。结果表明,性腺颜色、... 性腺发育是罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)个体生长及繁育的重要生物学过程,是良种培育的基础。采用外部形态观察及常规石蜡切片的方法,分析了罗氏沼虾初次性成熟过程中性腺外部形态及内部组织学变化的规律。结果表明,性腺颜色、体积及细胞组成、分布均随性腺发育表现出规律性变化,卵巢发育划分为8个时期,精巢发育分为4个时期。卵巢外部形态发育与内部组织学变化同步性高,随卵巢成熟度增加,不同阶段生殖细胞由生发区向外形成环状分区,Ⅰ~Ⅲ期卵巢体积、生殖细胞大小及性腺指数(GIS)增长缓慢,主要进行生殖细胞数量积累,Ⅳ~Ⅳ期卵巢体积、生殖细胞大小及GIS增长迅速,生殖细胞在增殖同时,营养物质积累迅速。可根据卵巢颜色、体积、色素分布等推测其内部组织细胞的发育情况。精巢形态发育和组织发育同步性较差,精巢体积、生殖细胞大小、种类及GIS在精巢成熟过程中变化较小,Ⅰ期精巢主要进行个体生殖功能的完善,Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期精巢则整体表现为个体生殖能力的强化过程。研究结果丰富了罗氏沼虾繁殖生物学内容,从形态及组织学方面初步探明了罗氏沼虾性腺的基本发育过程,可为其良种选育和虾苗繁育提供参考依据。 展开更多
关键词 罗氏沼虾 精巢 卵巢 周期划分 性成熟
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