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MG53蛋白乳酸化修饰通过介导心肌细胞铁死亡加重小鼠心肌缺血再灌注损伤
1
作者
李小旺
方飞
+3 位作者
陆建忠
强鑫华
卢凯
廖俊
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025年第4期653-660,共8页
目的:探究mitsugumin 53(MG53)蛋白乳酸化水平在小鼠心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)中的变化,并进一步探索MG53乳酸化影响心肌细胞I/R损伤的潜在分子机制。方法:16只C57BL/6小鼠随机分为假手术组和I/R组,每组8只。使用左前...
目的:探究mitsugumin 53(MG53)蛋白乳酸化水平在小鼠心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)中的变化,并进一步探索MG53乳酸化影响心肌细胞I/R损伤的潜在分子机制。方法:16只C57BL/6小鼠随机分为假手术组和I/R组,每组8只。使用左前降之冠状动脉结扎后再灌注的方法构建小鼠心肌I/R模型,对假手术组小鼠开胸但不进行结扎和再灌注。将H9C2大鼠心肌细胞随机分为对照组、缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)组、H/R+2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)组和H/R+2-DG+乳酸(lactate)组。对照组细胞在DMEM完全培养液中常氧培养;H/R组细胞先置于厌氧室(95%N_(2)和5%CO_(2))中,37℃培养2 h,随后转移至95%空气和5%CO_(2)的常氧再培养24 h;H/R+2-DG组细胞在培养液中添加5 mmol/L 2-DG并进行H/R操作;H/R+2-DG+lactate组细胞培养基中添加5 mmol/L 2-DG和20 mmol/L lactate并进行H/R操作。在小鼠模型中,用TTC染色和HE染色观察小鼠心肌缺血和损伤情况;用ELISA检测小鼠心肌损伤相关蛋白肌酸激酶和心肌钙蛋白I的表达情况;用免疫荧光检测MG53表达情况。在体外细胞模型中,CCK-8试剂盒和流式细胞术分别被用于检测细胞活力和凋亡水平。使用免疫沉淀和Western blot检测小鼠心肌组织和H9C2细胞中MG53蛋白、乳酸化MG53蛋白和铁死亡相关蛋白的表达情况;使用相应试剂盒检测小鼠心肌组织和H9C2细胞中活性氧、亚铁离子、乳酸脱氢酶和丙二醛水平。结果:I/R组小鼠心肌组织出现明显损伤,MG53蛋白表达水平下降,MG53蛋白乳酸化水平上升,细胞铁死亡水平上升。在体外心肌细胞中,H/R组细胞活力显著下降,凋亡水平显著升高,铁死亡水平显著升高,MG53蛋白表达量显著下降,MG53乳酸化水平显著上升。与H/R组相比,H/R+2-DG组细胞活力上升,凋亡水平下降,铁死亡水平下降,MG53表达量上升,MG53乳酸化水平下降。与H/R+2-DG组相比,H/R+2-DG+lactate组细胞活力显著下降,细胞凋亡水平、铁死亡水平和MG53乳酸化水平显著上升,MG53表达水平显著下降。结论:在小鼠心肌I/R过程中,MG53蛋白表达下调且MG53蛋白乳酸化水平上升。MG53乳酸化水平的上升可能通过介导心肌细胞铁死亡而加重小鼠心肌I/R损伤。
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关键词
心肌缺血
再灌注损伤
铁死亡
MG53蛋白
非组蛋白乳酸化
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职称材料
题名
MG53蛋白乳酸化修饰通过介导心肌细胞铁死亡加重小鼠心肌缺血再灌注损伤
1
作者
李小旺
方飞
陆建忠
强鑫华
卢凯
廖俊
机构
湖州
师范学院附属第一
医院
心
内科
湖州
师范学院附属第一
医院
检验科
湖州市第三人民医院老年内科
出处
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025年第4期653-660,共8页
基金
湖州市科技计划公益性应用研究项目(No.2023GY23)。
文摘
目的:探究mitsugumin 53(MG53)蛋白乳酸化水平在小鼠心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)中的变化,并进一步探索MG53乳酸化影响心肌细胞I/R损伤的潜在分子机制。方法:16只C57BL/6小鼠随机分为假手术组和I/R组,每组8只。使用左前降之冠状动脉结扎后再灌注的方法构建小鼠心肌I/R模型,对假手术组小鼠开胸但不进行结扎和再灌注。将H9C2大鼠心肌细胞随机分为对照组、缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)组、H/R+2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)组和H/R+2-DG+乳酸(lactate)组。对照组细胞在DMEM完全培养液中常氧培养;H/R组细胞先置于厌氧室(95%N_(2)和5%CO_(2))中,37℃培养2 h,随后转移至95%空气和5%CO_(2)的常氧再培养24 h;H/R+2-DG组细胞在培养液中添加5 mmol/L 2-DG并进行H/R操作;H/R+2-DG+lactate组细胞培养基中添加5 mmol/L 2-DG和20 mmol/L lactate并进行H/R操作。在小鼠模型中,用TTC染色和HE染色观察小鼠心肌缺血和损伤情况;用ELISA检测小鼠心肌损伤相关蛋白肌酸激酶和心肌钙蛋白I的表达情况;用免疫荧光检测MG53表达情况。在体外细胞模型中,CCK-8试剂盒和流式细胞术分别被用于检测细胞活力和凋亡水平。使用免疫沉淀和Western blot检测小鼠心肌组织和H9C2细胞中MG53蛋白、乳酸化MG53蛋白和铁死亡相关蛋白的表达情况;使用相应试剂盒检测小鼠心肌组织和H9C2细胞中活性氧、亚铁离子、乳酸脱氢酶和丙二醛水平。结果:I/R组小鼠心肌组织出现明显损伤,MG53蛋白表达水平下降,MG53蛋白乳酸化水平上升,细胞铁死亡水平上升。在体外心肌细胞中,H/R组细胞活力显著下降,凋亡水平显著升高,铁死亡水平显著升高,MG53蛋白表达量显著下降,MG53乳酸化水平显著上升。与H/R组相比,H/R+2-DG组细胞活力上升,凋亡水平下降,铁死亡水平下降,MG53表达量上升,MG53乳酸化水平下降。与H/R+2-DG组相比,H/R+2-DG+lactate组细胞活力显著下降,细胞凋亡水平、铁死亡水平和MG53乳酸化水平显著上升,MG53表达水平显著下降。结论:在小鼠心肌I/R过程中,MG53蛋白表达下调且MG53蛋白乳酸化水平上升。MG53乳酸化水平的上升可能通过介导心肌细胞铁死亡而加重小鼠心肌I/R损伤。
关键词
心肌缺血
再灌注损伤
铁死亡
MG53蛋白
非组蛋白乳酸化
Keywords
myocardial ischemia
reperfusion injury
ferroptosis
MG53 protein
non-histone lactylation
分类号
R542.2 [医药卫生—心血管疾病]
R363 [医药卫生—病理学]
Q51 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
MG53蛋白乳酸化修饰通过介导心肌细胞铁死亡加重小鼠心肌缺血再灌注损伤
李小旺
方飞
陆建忠
强鑫华
卢凯
廖俊
《中国病理生理杂志》
北大核心
2025
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