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His标记STAT4(565-748氨基酸)肽段融合蛋白原核表达及纯化
被引量：
1
1
作者
贺美
徐艳
+3 位作者
姚芳玲
邹纯
于颍
黎明
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期708-711,717,共5页
目的:构建His标记的人STAT4 C-端565-748氨基酸肽段原核表达载体,埃希氏菌中诱导表达,并纯化蛋白。方法:PCR扩增编码STAT4 C-端565-748氨基酸肽段的基因片段,克隆到pET-28a原核表达载体,转化感受态细菌BL21,IPTG诱导蛋白表达,经包涵体...
目的:构建His标记的人STAT4 C-端565-748氨基酸肽段原核表达载体,埃希氏菌中诱导表达,并纯化蛋白。方法:PCR扩增编码STAT4 C-端565-748氨基酸肽段的基因片段,克隆到pET-28a原核表达载体,转化感受态细菌BL21,IPTG诱导蛋白表达,经包涵体变性、复性、树脂纯化、透析。免疫印迹鉴定纯化的融合蛋白。结果:PCR扩增获得目的片段,克隆到pET-28a,转化感受态细胞,IPTG诱导发现融合蛋白存在于包涵体。经变性、复性、树脂纯化和透析,免疫印迹实验发现融合蛋白表达、被纯化。结论:成功构建人STAT4(565-748aa)肽段原核表达质粒并获纯化融合蛋白。
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关键词
STAT4
基因克隆
蛋白表达
融合蛋白纯化
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职称材料
题名
His标记STAT4(565-748氨基酸)肽段融合蛋白原核表达及纯化
被引量：
1
1
作者
贺美
徐艳
姚芳玲
邹纯
于颍
黎明
机构
中南大学基础医学院免疫学系
湖南航天医院检验科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期708-711,717,共5页
基金
湖南省自然科学基金重点项目(12JJ2016)
中南大学研究生科研创新项目(1053320171363)资助
文摘
目的:构建His标记的人STAT4 C-端565-748氨基酸肽段原核表达载体,埃希氏菌中诱导表达,并纯化蛋白。方法:PCR扩增编码STAT4 C-端565-748氨基酸肽段的基因片段,克隆到pET-28a原核表达载体,转化感受态细菌BL21,IPTG诱导蛋白表达,经包涵体变性、复性、树脂纯化、透析。免疫印迹鉴定纯化的融合蛋白。结果:PCR扩增获得目的片段,克隆到pET-28a,转化感受态细胞,IPTG诱导发现融合蛋白存在于包涵体。经变性、复性、树脂纯化和透析,免疫印迹实验发现融合蛋白表达、被纯化。结论:成功构建人STAT4(565-748aa)肽段原核表达质粒并获纯化融合蛋白。
关键词
STAT4
基因克隆
蛋白表达
融合蛋白纯化
Keywords
STAT4
Gene cloning
Protein expression
Fusion protein purification
分类号
R31 [医药卫生—基础医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
His标记STAT4(565-748氨基酸)肽段融合蛋白原核表达及纯化
贺美
徐艳
姚芳玲
邹纯
于颍
黎明
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
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