目的探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)通过受体相互作用蛋白激酶(receptor interacting protein kinase,RIPK)-1/RIPK3/混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)通路对帕金森病(Parkinson's d...目的探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)通过受体相互作用蛋白激酶(receptor interacting protein kinase,RIPK)-1/RIPK3/混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)通路对帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠神经功能的影响。方法构建PD大鼠模型,将建模成功的30只大鼠分为PD组、L-Dex组、M-Dex组、H-Dex组(腹腔分别注射25、50、100μg/kg的Dex)、Dex+重组RIPK1(rRIPK1)组(腹腔注射100μg/kg的Dex+8μg/kg rRIPK1),每组6只;另选取6只大鼠作为假手术组。假手术组和PD组灌胃和注射等量的生理盐水,1次/d,连续21 d。检测各组大鼠的旋转行为;苏木精-伊红染色检测黑质区多巴胺能神经元的病理变化;TUNEL染色检测多巴胺能神经元凋亡;酶联免疫吸附测定检测大鼠黑质区神经递质[多巴胺(dopamine,DA)、高香草酸(homovanillic acid,HVA)、3,4-二羟基苯乙酸(3,4-dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)、5-羟色胺(5-hydroxytrptamine,5-HT)]和炎性因子[肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)]表达;Western blot检测大鼠黑质组织中RIPK1/RIPK3/MLKL通路相关蛋白的表达。结果假手术组神经元形态结构完整且排列整齐;PD组神经元数量显著变少,排列散乱且体积明显缩小,细胞核发生不规则形变,出现显著的神经元损伤;L-Dex组、M-Dex组、H-Dex组神经元的损伤程度依次减轻;Dex+rRIPK1组神经元损伤程度进一步加重。PD组旋转圈数、逃避潜伏期、凋亡率、TNF-α、IL-1β、磷酸化RIPK1(p-RIPK1)/RIPK1(1.07±0.18 vs 0.36±0.11)、磷酸化RIPK3(p-RIPK3)/RIPK3(1.32±0.21 vs 0.47±0.14)、磷酸化MLKL(p-MLKL)/MLKL(0.79±0.11 vs 0.18±0.05)表达显著高于假手术组,DA、DOPAC、5-HT、HVA表达显著低于假手术组(P<0.05);L-Dex组、M-Dex组、H-Dex组旋转圈数、逃避潜伏期、凋亡率、TNF-α、IL-1β、p-RIPK1/RIPK1、p-RIPK3/RIPK3、p-MLKL/MLKL表达显著低于PD组,DA、DOPAC、5-HT、HVA表达显著高于PD组(P<0.05);Dex+rRIPK1组旋转圈数、逃避潜伏期、凋亡率、TNF-α、IL-1β、p-RIPK1/RIPK1(0.95±0.17 vs 0.41±0.12)、p-RIPK3/RIPK3(1.14±0.20 vs 0.51±0.15)、p-MLKL/MLKL(0.72±0.09 vs 0.24±0.06)表达显著高于H-Dex组,DA、DOPAC、5-HT、HVA表达显著低于H-Dex组(P<0.05)。结论Dex通过抑制RIPK1/RIPK3/MLKL通路,保护PD大鼠的神经功能。展开更多
文摘目的探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)通过受体相互作用蛋白激酶(receptor interacting protein kinase,RIPK)-1/RIPK3/混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)通路对帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠神经功能的影响。方法构建PD大鼠模型,将建模成功的30只大鼠分为PD组、L-Dex组、M-Dex组、H-Dex组(腹腔分别注射25、50、100μg/kg的Dex)、Dex+重组RIPK1(rRIPK1)组(腹腔注射100μg/kg的Dex+8μg/kg rRIPK1),每组6只;另选取6只大鼠作为假手术组。假手术组和PD组灌胃和注射等量的生理盐水,1次/d,连续21 d。检测各组大鼠的旋转行为;苏木精-伊红染色检测黑质区多巴胺能神经元的病理变化;TUNEL染色检测多巴胺能神经元凋亡;酶联免疫吸附测定检测大鼠黑质区神经递质[多巴胺(dopamine,DA)、高香草酸(homovanillic acid,HVA)、3,4-二羟基苯乙酸(3,4-dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)、5-羟色胺(5-hydroxytrptamine,5-HT)]和炎性因子[肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)]表达;Western blot检测大鼠黑质组织中RIPK1/RIPK3/MLKL通路相关蛋白的表达。结果假手术组神经元形态结构完整且排列整齐;PD组神经元数量显著变少,排列散乱且体积明显缩小,细胞核发生不规则形变,出现显著的神经元损伤;L-Dex组、M-Dex组、H-Dex组神经元的损伤程度依次减轻;Dex+rRIPK1组神经元损伤程度进一步加重。PD组旋转圈数、逃避潜伏期、凋亡率、TNF-α、IL-1β、磷酸化RIPK1(p-RIPK1)/RIPK1(1.07±0.18 vs 0.36±0.11)、磷酸化RIPK3(p-RIPK3)/RIPK3(1.32±0.21 vs 0.47±0.14)、磷酸化MLKL(p-MLKL)/MLKL(0.79±0.11 vs 0.18±0.05)表达显著高于假手术组,DA、DOPAC、5-HT、HVA表达显著低于假手术组(P<0.05);L-Dex组、M-Dex组、H-Dex组旋转圈数、逃避潜伏期、凋亡率、TNF-α、IL-1β、p-RIPK1/RIPK1、p-RIPK3/RIPK3、p-MLKL/MLKL表达显著低于PD组,DA、DOPAC、5-HT、HVA表达显著高于PD组(P<0.05);Dex+rRIPK1组旋转圈数、逃避潜伏期、凋亡率、TNF-α、IL-1β、p-RIPK1/RIPK1(0.95±0.17 vs 0.41±0.12)、p-RIPK3/RIPK3(1.14±0.20 vs 0.51±0.15)、p-MLKL/MLKL(0.72±0.09 vs 0.24±0.06)表达显著高于H-Dex组,DA、DOPAC、5-HT、HVA表达显著低于H-Dex组(P<0.05)。结论Dex通过抑制RIPK1/RIPK3/MLKL通路,保护PD大鼠的神经功能。
