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miR-9-5p靶向调控ZAK对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
被引量：
1
1
作者
宋北平
蔡梦婷
+1 位作者
李光义
易丹
《暨南大学学报（自然科学与医学版）》
CAS
北大核心
2023年第3期248-258,共11页
目的:阐明miR-9-5p通过靶向调控ZAK表达从而影响结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的分子机制。方法:通过qPCR、Western blot检测结直肠癌细胞系(HCT116、SW260、HT29及LoVo)及结直肠癌患者组织样本中miR-9-5p表达水平及ZAK的mRNA和蛋...
目的:阐明miR-9-5p通过靶向调控ZAK表达从而影响结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的分子机制。方法:通过qPCR、Western blot检测结直肠癌细胞系(HCT116、SW260、HT29及LoVo)及结直肠癌患者组织样本中miR-9-5p表达水平及ZAK的mRNA和蛋白表达水平。生物信息学方法分析miR-9-5p与ZAK结合的靶向序列。双荧光素酶基因报告实验检测miR-9-5p对ZAK的靶向调控关系。脂质体法将miR-9-5p mimic或/和ZAK质粒共转染结直肠癌细胞系HCT116及SW620,通过CCK-8及克隆形成实验观察miR-9-5p/ZAK信号轴对细胞增殖的影响,通过Transwell观察对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:与人正常上皮细胞系相比,在结直肠癌细胞系中ZAK的mRNA及蛋白水平显著上调(P<0.05);在结直肠癌临床组织样本中,ZAK蛋白水平亦显著上调(P<0.05);miR-9-5p的表达水平在癌细胞系及组织样本中下调(P<0.05)。双荧光素酶报道基因实验显示miR-9-5p能显著影响ZAK 3’UTR野生型表达载体的荧光素酶活性(P<0.05),过表达miR-9-5p mimic片段可抑制ZAK蛋白表达,而inhibitor片段促进ZAK蛋白表达。CCK-8、克隆形成实验及Transwell实验表明,过表达ZAK可显著促进结直肠癌细胞系细胞的增殖、克隆形成、细胞迁移和侵袭能力(均P<0.05),而同时过表达miR-9-5p则可抵消ZAK对细胞功能的促进作用(均P<0.05)。结论:结直肠癌中ZAK呈高表达,而miR-9-5p呈低表达;ZAK是miR-9-5p的靶向调控基因;miR-9-5p/ZAK信号轴共同调控结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,参与结直肠癌的发生发展。
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关键词
miR-9-5p
ZAK
结直肠癌
增殖
迁移
侵袭
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题名
miR-9-5p靶向调控ZAK对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
被引量：
1
1
作者
宋北平
蔡梦婷
李光义
易丹
机构
湖南省人民医院/湖南师范大学附属第一医院核医学科
湖南省
人民医院
/湖南师范大学
附属
第一
医院
胃肠外科
出处
《暨南大学学报（自然科学与医学版）》
CAS
北大核心
2023年第3期248-258,共11页
基金
湖南省卫生健康委科研计划项目(202102061339)。
文摘
目的:阐明miR-9-5p通过靶向调控ZAK表达从而影响结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的分子机制。方法:通过qPCR、Western blot检测结直肠癌细胞系(HCT116、SW260、HT29及LoVo)及结直肠癌患者组织样本中miR-9-5p表达水平及ZAK的mRNA和蛋白表达水平。生物信息学方法分析miR-9-5p与ZAK结合的靶向序列。双荧光素酶基因报告实验检测miR-9-5p对ZAK的靶向调控关系。脂质体法将miR-9-5p mimic或/和ZAK质粒共转染结直肠癌细胞系HCT116及SW620,通过CCK-8及克隆形成实验观察miR-9-5p/ZAK信号轴对细胞增殖的影响,通过Transwell观察对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果:与人正常上皮细胞系相比,在结直肠癌细胞系中ZAK的mRNA及蛋白水平显著上调(P<0.05);在结直肠癌临床组织样本中,ZAK蛋白水平亦显著上调(P<0.05);miR-9-5p的表达水平在癌细胞系及组织样本中下调(P<0.05)。双荧光素酶报道基因实验显示miR-9-5p能显著影响ZAK 3’UTR野生型表达载体的荧光素酶活性(P<0.05),过表达miR-9-5p mimic片段可抑制ZAK蛋白表达,而inhibitor片段促进ZAK蛋白表达。CCK-8、克隆形成实验及Transwell实验表明,过表达ZAK可显著促进结直肠癌细胞系细胞的增殖、克隆形成、细胞迁移和侵袭能力(均P<0.05),而同时过表达miR-9-5p则可抵消ZAK对细胞功能的促进作用(均P<0.05)。结论:结直肠癌中ZAK呈高表达,而miR-9-5p呈低表达;ZAK是miR-9-5p的靶向调控基因;miR-9-5p/ZAK信号轴共同调控结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭,参与结直肠癌的发生发展。
关键词
miR-9-5p
ZAK
结直肠癌
增殖
迁移
侵袭
Keywords
miR-9-5p
ZAK
colorectal cancer
proliferation
migration
invasion
分类号
R735.35 [医药卫生—肿瘤]
R735.37 [医药卫生—肿瘤]
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出处
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1
miR-9-5p靶向调控ZAK对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
宋北平
蔡梦婷
李光义
易丹
《暨南大学学报（自然科学与医学版）》
CAS
北大核心
2023
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