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PadR对须糖多孢菌丁烯基多杀菌素生物合成及转运相关蛋白表达的影响
被引量:
4
1
作者
何思颖
柏丹
+4 位作者
夏伦
万千千
罗粤雯
邱玉玲
夏立秋
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2019年第5期44-51,共8页
为研究padR基因表达对须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)次级代谢产物生物合成及相关蛋白表达的影响,在对须糖多孢菌基因组测序结果的基础上,从基因组中克隆了padR基因上、下游同源臂,利用融合PCR将硫链丝菌素抗性基因插入上、下游...
为研究padR基因表达对须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)次级代谢产物生物合成及相关蛋白表达的影响,在对须糖多孢菌基因组测序结果的基础上,从基因组中克隆了padR基因上、下游同源臂,利用融合PCR将硫链丝菌素抗性基因插入上、下游同源臂之间,将融合片段与穿梭载体pOJ260连接,构建敲除载体pOJ260-UHA-tsr-DHA。通过接合转移将其导入野生型须糖多孢菌中,通过同源臂双交换获得须糖多孢菌敲除菌株S.pogona-ΔpadR。经HPLC检测分析,敲除菌株次级代谢产物丁烯基多杀菌素产量与原始菌株相比提高了27.3%,且有7个转运相关蛋白出现表达上调。这一研究表明padR基因的敲除能够有效促进须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成。该研究对优化须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成途径具有一定的指导意义,为研究padR基因表达在链霉菌次级代谢产物合成中的作用打下了基础。
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关键词
须糖多孢菌
PadR
转录调控因子
转运蛋白
丁烯基多杀菌素
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职称材料
大孢粘球菌抗肿瘤活性蛋白WGF5分离方法的优化与活性分析
被引量:
1
2
作者
魏慧
黄海燕
+3 位作者
于芳楠
刘熊
丁学知
夏立秋
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2017年第6期44-48,共5页
为从Myxococcus macrosporus STXZ54发酵液中高效地分离纯化出抗肿瘤活性蛋白WGF5,收集STXZ54发酵上清液,先后利用优化后的硫酸铵沉淀方法沉淀蛋白,强阳离子交换、分子筛色谱分离等方法对蛋白粗提物进行精细分离.利用CCK-8试剂盒,倒置...
为从Myxococcus macrosporus STXZ54发酵液中高效地分离纯化出抗肿瘤活性蛋白WGF5,收集STXZ54发酵上清液,先后利用优化后的硫酸铵沉淀方法沉淀蛋白,强阳离子交换、分子筛色谱分离等方法对蛋白粗提物进行精细分离.利用CCK-8试剂盒,倒置显微镜、扫描电子显微镜等观察WGF5对肿瘤细胞形态的影响,台盼蓝染色进一步检测WGF5对肿瘤细胞的毒力.实验结果观察到WGF5能够显著改变肿瘤细胞形态,与原分离体系相比较,优化后的抗肿瘤活性蛋白分离方法更为高效,简便易行.
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关键词
大孢粘球菌
抗肿瘤活性蛋白
方法优化
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职称材料
叶柄粘球菌CA3的分离鉴定及其抗肿瘤活性初步研究
被引量:
2
3
作者
廖继燕
吴雨婧
+2 位作者
周偲
龚亮
夏立秋
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2018年第1期24-29,共6页
为寻找新的粘细菌次级代谢产物,分别采用滤纸片和大肠杆菌两种诱导法诱导粘细菌子实体的形成,挑取子实体多次转接以纯化菌株,从中筛选获得1株粘细菌CA3.通过菌体形态观察、生理生化试验和16S rDNA同源性分析的方法对其进行鉴定归类,确...
为寻找新的粘细菌次级代谢产物,分别采用滤纸片和大肠杆菌两种诱导法诱导粘细菌子实体的形成,挑取子实体多次转接以纯化菌株,从中筛选获得1株粘细菌CA3.通过菌体形态观察、生理生化试验和16S rDNA同源性分析的方法对其进行鉴定归类,确认其为叶柄粘球菌(Myxococcus stipitatus)新菌CA3.对粘球菌CA3发酵上清液进行细胞毒性试验,结果表明其对肿瘤细胞B16和SMMC-7721有很强的抑制效果,为后续的抗肿瘤活性组分结构解析和抗肿瘤机制的研究提供了重要基础.
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关键词
粘细菌
粘球菌
16S
RDNA
抗肿瘤活性
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职称材料
题名
PadR对须糖多孢菌丁烯基多杀菌素生物合成及转运相关蛋白表达的影响
被引量:
4
1
作者
何思颖
柏丹
夏伦
万千千
罗粤雯
邱玉玲
夏立秋
机构
湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室淡水鱼类发育生物国家重点实验室
出处
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2019年第5期44-51,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(31770106)
湖南省“生物发育工程及新产品研发协同创新中心”项目(20134486)
文摘
为研究padR基因表达对须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)次级代谢产物生物合成及相关蛋白表达的影响,在对须糖多孢菌基因组测序结果的基础上,从基因组中克隆了padR基因上、下游同源臂,利用融合PCR将硫链丝菌素抗性基因插入上、下游同源臂之间,将融合片段与穿梭载体pOJ260连接,构建敲除载体pOJ260-UHA-tsr-DHA。通过接合转移将其导入野生型须糖多孢菌中,通过同源臂双交换获得须糖多孢菌敲除菌株S.pogona-ΔpadR。经HPLC检测分析,敲除菌株次级代谢产物丁烯基多杀菌素产量与原始菌株相比提高了27.3%,且有7个转运相关蛋白出现表达上调。这一研究表明padR基因的敲除能够有效促进须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成。该研究对优化须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成途径具有一定的指导意义,为研究padR基因表达在链霉菌次级代谢产物合成中的作用打下了基础。
关键词
须糖多孢菌
PadR
转录调控因子
转运蛋白
丁烯基多杀菌素
Keywords
Saccharopolyspora pogona
PadR
transcriptional regulator
transporter
butenyl-spinosyn
分类号
Q939 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
大孢粘球菌抗肿瘤活性蛋白WGF5分离方法的优化与活性分析
被引量:
1
2
作者
魏慧
黄海燕
于芳楠
刘熊
丁学知
夏立秋
机构
湖南师范大学
生命科学
学院
微生物
分子生物学
湖南省
重点
实验室
淡水鱼
类
发育
生物学
国家
重点
实验室
出处
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2017年第6期44-48,共5页
基金
国家"973"基础研究计划资助项目(2012CB722301)
湖南省"生物发育工程及新产品研发协同创新中心"资助项目(20134486)
文摘
为从Myxococcus macrosporus STXZ54发酵液中高效地分离纯化出抗肿瘤活性蛋白WGF5,收集STXZ54发酵上清液,先后利用优化后的硫酸铵沉淀方法沉淀蛋白,强阳离子交换、分子筛色谱分离等方法对蛋白粗提物进行精细分离.利用CCK-8试剂盒,倒置显微镜、扫描电子显微镜等观察WGF5对肿瘤细胞形态的影响,台盼蓝染色进一步检测WGF5对肿瘤细胞的毒力.实验结果观察到WGF5能够显著改变肿瘤细胞形态,与原分离体系相比较,优化后的抗肿瘤活性蛋白分离方法更为高效,简便易行.
关键词
大孢粘球菌
抗肿瘤活性蛋白
方法优化
Keywords
Myxococcus macrosporus
antitumor activity, separation method optimization
分类号
Q936 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
叶柄粘球菌CA3的分离鉴定及其抗肿瘤活性初步研究
被引量:
2
3
作者
廖继燕
吴雨婧
周偲
龚亮
夏立秋
机构
湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室淡水鱼类发育生物国家重点实验室
出处
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2018年第1期24-29,共6页
基金
2015湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划资助项目(043-0040)
湖南省“生物发育工程及新产品研发协同创新中心”资助项目(20134486)
文摘
为寻找新的粘细菌次级代谢产物,分别采用滤纸片和大肠杆菌两种诱导法诱导粘细菌子实体的形成,挑取子实体多次转接以纯化菌株,从中筛选获得1株粘细菌CA3.通过菌体形态观察、生理生化试验和16S rDNA同源性分析的方法对其进行鉴定归类,确认其为叶柄粘球菌(Myxococcus stipitatus)新菌CA3.对粘球菌CA3发酵上清液进行细胞毒性试验,结果表明其对肿瘤细胞B16和SMMC-7721有很强的抑制效果,为后续的抗肿瘤活性组分结构解析和抗肿瘤机制的研究提供了重要基础.
关键词
粘细菌
粘球菌
16S
RDNA
抗肿瘤活性
Keywords
Myxobacteria
Myxococcus stipitatus
16S rDNA
antitumor activity
分类号
Q939 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PadR对须糖多孢菌丁烯基多杀菌素生物合成及转运相关蛋白表达的影响
何思颖
柏丹
夏伦
万千千
罗粤雯
邱玉玲
夏立秋
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2019
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
大孢粘球菌抗肿瘤活性蛋白WGF5分离方法的优化与活性分析
魏慧
黄海燕
于芳楠
刘熊
丁学知
夏立秋
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2017
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
叶柄粘球菌CA3的分离鉴定及其抗肿瘤活性初步研究
廖继燕
吴雨婧
周偲
龚亮
夏立秋
《湖南师范大学自然科学学报》
CAS
北大核心
2018
2
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职称材料
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