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GlnA基因对刺糖多孢菌生长发育及多杀菌素合成的影响
被引量：
7
1
作者
肖洁
刘朱东
+5 位作者
彭胜男
何昊城
穰杰
刘熊
丁学知
夏立秋
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2018年第4期625-638,共14页
谷氨酰胺合成酶(GS,glutamine synthetase)是由Gln A基因编码的生物体中最古老也是最广泛存在的酶,它参与许多生物体中的氮和碳代谢,是生物体氮代谢的关键酶之一,对微生物的生命活动起着重要作用。本文研究了Gln A基因对刺糖多孢菌Sacch...
谷氨酰胺合成酶(GS,glutamine synthetase)是由Gln A基因编码的生物体中最古老也是最广泛存在的酶,它参与许多生物体中的氮和碳代谢,是生物体氮代谢的关键酶之一,对微生物的生命活动起着重要作用。本文研究了Gln A基因对刺糖多孢菌Saccharopolyspora spinosa的生长发育及次级代谢产物合成的影响,从刺糖多孢菌基因组中克隆了gln A基因的部分片段,将其与穿梭载体p OJ260连接,构建敲除载体p OJ260-gln A,通过接合转移将其导入刺糖多孢菌野生菌中,获得刺糖多孢菌敲除菌株S.spinosa-△gln A;同时,利用重叠延伸PCR将gln A基因置于红霉素强启动子Perm E下,并将融合片段Perm E-gln A与穿梭载体p OJ260进行酶切酶连,构建过量表达载体p OJ260-Perm E-gln A,通过接合转移将其导入刺糖多孢菌中,获得了刺糖多孢菌过量表达菌株S.spinosa-gln A。表型分析发现,gln A基因的敲除对刺糖多孢菌的菌丝形态、孢子萌发等方面都有显著的抑制作用。HPLC检测分析发现,过量表达菌株中多杀菌素产量相比原始菌株提高到170%;该研究表明gln A基因对刺糖多孢菌的生长发育与多杀菌素的合成有一定的影响,为研究其在链霉菌次级代谢过程中的作用奠定了重要基础。
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关键词
刺糖多孢菌
多杀菌素
谷氨酰胺合成酶
阻断
过量表达
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职称材料
通过两种糖多孢菌属菌株原生质体融合提高多杀菌素产量研究
被引量：
7
2
作者
易卓
夏立秋
+5 位作者
丁学知
胡胜标
罗玉双
王海龙
唐滢
黄鑫
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
2019年第10期1148-1155,共8页
多杀菌素是由放线菌刺糖多孢菌产生的一种新型绿色环保杀虫剂,兼具化学农药的高效性与生物农药的安全性。本研究通过将红色糖多孢菌和刺糖多孢菌两种菌株做原生质体融合探究来得到高产多杀菌素的菌株。首先构建了不产红霉素的红色糖多...
多杀菌素是由放线菌刺糖多孢菌产生的一种新型绿色环保杀虫剂,兼具化学农药的高效性与生物农药的安全性。本研究通过将红色糖多孢菌和刺糖多孢菌两种菌株做原生质体融合探究来得到高产多杀菌素的菌株。首先构建了不产红霉素的红色糖多孢菌工程菌株,然后将其与刺糖多孢菌做原生质体融合,经加有抗生素平板培养基及发酵液HPLC分析筛选,得到了产多杀菌素的4株融合菌株。基于4株融合菌株多杀菌素产量都不及起始菌株高,接着采用不加抗生素直接筛选的方法,成功筛选到若干高产多杀菌素的融合菌株,其中菌株B-2多杀菌素产量提高最为明显,较原始菌株增加了331%,并用质谱分析做了进一步的验证。融合菌株B-2后续传代培养多杀菌素产量稳定,表明遗传稳定性较好。本文对红色糖多孢菌和刺糖多孢菌原生质体融合进行了探究并且成功提高了多杀菌素的产量,这为具有优良发酵特性的红色糖多孢菌和刺糖多孢菌融合菌株的构建提供了重要基础。
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关键词
多杀菌素
生物农药
红霉素阻断
原生质体融合
融合菌株
质谱分析
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职称材料
题名
GlnA基因对刺糖多孢菌生长发育及多杀菌素合成的影响
被引量：
7
1
作者
肖洁
刘朱东
彭胜男
何昊城
穰杰
刘熊
丁学知
夏立秋
机构
湖南师范大学
生命科学
学院
/
微生物
分子生物学
湖南省
重点
实验室
/省
部
共建
淡水鱼
类
发育
生物学
国家
重点
实验室
出处
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2018年第4期625-638,共14页
基金
国家"863"计划(2011AA10A203)
国家"973"计划(2012CB722301)
+2 种基金
国家自然科学基金(31770106)
湖南省协同创新中心项目(20134486)
湖南省教育厅项目(10CY013)
文摘
谷氨酰胺合成酶(GS,glutamine synthetase)是由Gln A基因编码的生物体中最古老也是最广泛存在的酶,它参与许多生物体中的氮和碳代谢,是生物体氮代谢的关键酶之一,对微生物的生命活动起着重要作用。本文研究了Gln A基因对刺糖多孢菌Saccharopolyspora spinosa的生长发育及次级代谢产物合成的影响,从刺糖多孢菌基因组中克隆了gln A基因的部分片段,将其与穿梭载体p OJ260连接,构建敲除载体p OJ260-gln A,通过接合转移将其导入刺糖多孢菌野生菌中,获得刺糖多孢菌敲除菌株S.spinosa-△gln A;同时,利用重叠延伸PCR将gln A基因置于红霉素强启动子Perm E下,并将融合片段Perm E-gln A与穿梭载体p OJ260进行酶切酶连,构建过量表达载体p OJ260-Perm E-gln A,通过接合转移将其导入刺糖多孢菌中,获得了刺糖多孢菌过量表达菌株S.spinosa-gln A。表型分析发现,gln A基因的敲除对刺糖多孢菌的菌丝形态、孢子萌发等方面都有显著的抑制作用。HPLC检测分析发现,过量表达菌株中多杀菌素产量相比原始菌株提高到170%;该研究表明gln A基因对刺糖多孢菌的生长发育与多杀菌素的合成有一定的影响,为研究其在链霉菌次级代谢过程中的作用奠定了重要基础。
关键词
刺糖多孢菌
多杀菌素
谷氨酰胺合成酶
阻断
过量表达
Keywords
Saccharopolyspora spinosa
spinosad
glutamine synthetase
knockout
overexpression
分类号
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
通过两种糖多孢菌属菌株原生质体融合提高多杀菌素产量研究
被引量：
7
2
作者
易卓
夏立秋
丁学知
胡胜标
罗玉双
王海龙
唐滢
黄鑫
机构
湖南师范大学生命科学学院微生物分子生物学湖南省重点实验室/省部共建淡水鱼类发育生物学国家重点实验室
益阳广播电视
大学
开放教育
学院
出处
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
2019年第10期1148-1155,共8页
基金
国家自然科学基金(No.31070006和No.30870064)
文摘
多杀菌素是由放线菌刺糖多孢菌产生的一种新型绿色环保杀虫剂,兼具化学农药的高效性与生物农药的安全性。本研究通过将红色糖多孢菌和刺糖多孢菌两种菌株做原生质体融合探究来得到高产多杀菌素的菌株。首先构建了不产红霉素的红色糖多孢菌工程菌株,然后将其与刺糖多孢菌做原生质体融合,经加有抗生素平板培养基及发酵液HPLC分析筛选,得到了产多杀菌素的4株融合菌株。基于4株融合菌株多杀菌素产量都不及起始菌株高,接着采用不加抗生素直接筛选的方法,成功筛选到若干高产多杀菌素的融合菌株,其中菌株B-2多杀菌素产量提高最为明显,较原始菌株增加了331%,并用质谱分析做了进一步的验证。融合菌株B-2后续传代培养多杀菌素产量稳定,表明遗传稳定性较好。本文对红色糖多孢菌和刺糖多孢菌原生质体融合进行了探究并且成功提高了多杀菌素的产量,这为具有优良发酵特性的红色糖多孢菌和刺糖多孢菌融合菌株的构建提供了重要基础。
关键词
多杀菌素
生物农药
红霉素阻断
原生质体融合
融合菌株
质谱分析
Keywords
Spinosad
Biological pesticide
Blocked production of erythromycins
Protoplast fusion
Fused strains
Analysis of mass spectrometry
分类号
R978.15 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GlnA基因对刺糖多孢菌生长发育及多杀菌素合成的影响
肖洁
刘朱东
彭胜男
何昊城
穰杰
刘熊
丁学知
夏立秋
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2018
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
通过两种糖多孢菌属菌株原生质体融合提高多杀菌素产量研究
易卓
夏立秋
丁学知
胡胜标
罗玉双
王海龙
唐滢
黄鑫
《中国抗生素杂志》
CAS
CSCD
2019
7
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