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GlnA基因对刺糖多孢菌生长发育及多杀菌素合成的影响
被引量：
7
1
作者
肖洁
刘朱东
+5 位作者
彭胜男
何昊城
穰杰
刘熊
丁学知
夏立秋
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2018年第4期625-638,共14页
谷氨酰胺合成酶(GS,glutamine synthetase)是由Gln A基因编码的生物体中最古老也是最广泛存在的酶,它参与许多生物体中的氮和碳代谢,是生物体氮代谢的关键酶之一,对微生物的生命活动起着重要作用。本文研究了Gln A基因对刺糖多孢菌Sacch...
谷氨酰胺合成酶(GS,glutamine synthetase)是由Gln A基因编码的生物体中最古老也是最广泛存在的酶,它参与许多生物体中的氮和碳代谢,是生物体氮代谢的关键酶之一,对微生物的生命活动起着重要作用。本文研究了Gln A基因对刺糖多孢菌Saccharopolyspora spinosa的生长发育及次级代谢产物合成的影响,从刺糖多孢菌基因组中克隆了gln A基因的部分片段,将其与穿梭载体p OJ260连接,构建敲除载体p OJ260-gln A,通过接合转移将其导入刺糖多孢菌野生菌中,获得刺糖多孢菌敲除菌株S.spinosa-△gln A;同时,利用重叠延伸PCR将gln A基因置于红霉素强启动子Perm E下,并将融合片段Perm E-gln A与穿梭载体p OJ260进行酶切酶连,构建过量表达载体p OJ260-Perm E-gln A,通过接合转移将其导入刺糖多孢菌中,获得了刺糖多孢菌过量表达菌株S.spinosa-gln A。表型分析发现,gln A基因的敲除对刺糖多孢菌的菌丝形态、孢子萌发等方面都有显著的抑制作用。HPLC检测分析发现,过量表达菌株中多杀菌素产量相比原始菌株提高到170%;该研究表明gln A基因对刺糖多孢菌的生长发育与多杀菌素的合成有一定的影响,为研究其在链霉菌次级代谢过程中的作用奠定了重要基础。
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关键词
刺糖多孢菌
多杀菌素
谷氨酰胺合成酶
阻断
过量表达
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题名
GlnA基因对刺糖多孢菌生长发育及多杀菌素合成的影响
被引量：
7
1
作者
肖洁
刘朱东
彭胜男
何昊城
穰杰
刘熊
丁学知
夏立秋
机构
湖南师范大学生命科学学院/微生物分子生物学湖南省重点实验室/省部共建淡水鱼类发育生物学国家重点实验室
出处
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2018年第4期625-638,共14页
基金
国家"863"计划(2011AA10A203)
国家"973"计划(2012CB722301)
+2 种基金
国家自然科学基金(31770106)
湖南省协同创新中心项目(20134486)
湖南省教育厅项目(10CY013)
文摘
谷氨酰胺合成酶(GS,glutamine synthetase)是由Gln A基因编码的生物体中最古老也是最广泛存在的酶,它参与许多生物体中的氮和碳代谢,是生物体氮代谢的关键酶之一,对微生物的生命活动起着重要作用。本文研究了Gln A基因对刺糖多孢菌Saccharopolyspora spinosa的生长发育及次级代谢产物合成的影响,从刺糖多孢菌基因组中克隆了gln A基因的部分片段,将其与穿梭载体p OJ260连接,构建敲除载体p OJ260-gln A,通过接合转移将其导入刺糖多孢菌野生菌中,获得刺糖多孢菌敲除菌株S.spinosa-△gln A;同时,利用重叠延伸PCR将gln A基因置于红霉素强启动子Perm E下,并将融合片段Perm E-gln A与穿梭载体p OJ260进行酶切酶连,构建过量表达载体p OJ260-Perm E-gln A,通过接合转移将其导入刺糖多孢菌中,获得了刺糖多孢菌过量表达菌株S.spinosa-gln A。表型分析发现,gln A基因的敲除对刺糖多孢菌的菌丝形态、孢子萌发等方面都有显著的抑制作用。HPLC检测分析发现,过量表达菌株中多杀菌素产量相比原始菌株提高到170%;该研究表明gln A基因对刺糖多孢菌的生长发育与多杀菌素的合成有一定的影响,为研究其在链霉菌次级代谢过程中的作用奠定了重要基础。
关键词
刺糖多孢菌
多杀菌素
谷氨酰胺合成酶
阻断
过量表达
Keywords
Saccharopolyspora spinosa
spinosad
glutamine synthetase
knockout
overexpression
分类号
S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
GlnA基因对刺糖多孢菌生长发育及多杀菌素合成的影响
肖洁
刘朱东
彭胜男
何昊城
穰杰
刘熊
丁学知
夏立秋
《中国生物防治学报》
CSCD
北大核心
2018
7
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