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TIPE2通过抑制Akt磷酸化促进LPS活化的巨噬细胞凋亡
被引量：
6
1
作者
丛丽
谢小林
+2 位作者
刘素娟
向丽萍
符晓华(指导)
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期135-141,共7页
目的:探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)对脂多糖(LPS)活化的巨噬细胞凋亡的影响及作用机制。方法:采用LPS(1.0 mg/L)处理RAW264.7细胞24 h,RT-qPCR检测IL-6、TNF-α、TIPE2 mRNA表达,Western blot检测TIPE2蛋白表达。采用LPS...
目的:探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)对脂多糖(LPS)活化的巨噬细胞凋亡的影响及作用机制。方法:采用LPS(1.0 mg/L)处理RAW264.7细胞24 h,RT-qPCR检测IL-6、TNF-α、TIPE2 mRNA表达,Western blot检测TIPE2蛋白表达。采用LPS处理稳定过表达或敲降TIPE2细胞系24 h,CCK-8检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率,Tunel染色检测细胞凋亡指数,Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved Caspase-8、Bcl-2、Bax、CHOP、cleaved Caspase-3及Akt、p-Akt^(Ser473)蛋白表达。采用类胰岛素生长因子(IGF-1,100μg/L)预孵育过表达TIPE2细胞系2 h,LPS共处理24 h,CCK-8检测细胞活力,Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果:LPS可活化巨噬细胞,上调IL-6、TNF-αmRNA表达,下调TIPE2 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。过表达TIPE2明显降低活化巨噬细胞活力,升高凋亡率和凋亡指数,促进cleaved Caspase-8、Bax、CHOP、cleaved Caspase-3蛋白表达,抑制Bcl-2、p-Akt^(Ser473)蛋白表达(P<0.05);敲降TIPE2作用与之相反。此外,Akt磷酸化激动剂IGF-1可有效减弱TIPE2对活化巨噬细胞活力及凋亡相关蛋白的作用(P<0.05)。结论:TIPE2可能通过抑制Akt磷酸化,进而激活死亡受体途径、线粒体途径和内质网应激途径,促进LPS活化的巨噬细胞凋亡。
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关键词
肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2
AKT
脂多糖
巨噬细胞
凋亡
在线阅读
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职称材料
染料木素通过TIPE 2负性调控Akt活性促进脂多糖活化的巨噬细胞凋亡
被引量：
1
2
作者
刘素娟
丛丽
+5 位作者
张勇
向丽萍
谢小林
柏萍娟
向雪萍
符晓华
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期69-74,共6页
目的探究染料木素(genistein,GEN)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)活化的RAW264.7细胞凋亡的影响及其可能的药理学作用机制。方法GEN预孵育RAW264.7细胞或慢病毒介导的肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(tumor necrosis factor-α-induc...
目的探究染料木素(genistein,GEN)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)活化的RAW264.7细胞凋亡的影响及其可能的药理学作用机制。方法GEN预孵育RAW264.7细胞或慢病毒介导的肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(tumor necrosis factor-α-induced protein 8-like 2,TIPE 2)过表达细胞2 h,再与LPS共孵育24 h,采用CCK 8试剂盒检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡水平,qRT-PCR检测TNF-α、IL-6、caspase-8、caspase-3和TIPE 2 mRNA,Western blot检测iNOS、COX-2、caspase-8、caspase-3、TIPE 2、Akt和p-Akt蛋白表达。结果LPS促进RAW264.7细胞TNF-α、IL-6、iNOS、COX-2合成;GEN抑制LPS活化的RAW264.7细胞活力,凋亡细胞增多,并上调caspase-8、caspase-3、TIPE 2 mRNA及蛋白表达;TIPE 2过表达上调活化RAW264.7细胞caspase-8、caspase-3 mRNA及蛋白表达,减少Akt磷酸化,且与GEN具有协同作用。结论GEN可能通过上调TIPE 2抑制Akt活性,激活外源性凋亡途径,促进LPS活化的RAW264.7细胞凋亡。
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关键词
染料木素
TIPE
2
AKT
RAW264.7细胞
凋亡
脂多糖
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职称材料
题名
TIPE2通过抑制Akt磷酸化促进LPS活化的巨噬细胞凋亡
被引量：
6
1
作者
丛丽
谢小林
刘素娟
向丽萍
符晓华(指导)
机构
湖南师范大学小分子靶向药物研究与创制实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期135-141,共7页
基金
国家自然科学基金项目(82100490)
湖南省自然科学基金项目(2020JJ5381)
湖南省卫生健康委科研课题项目(202103011683)。
文摘
目的:探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)对脂多糖(LPS)活化的巨噬细胞凋亡的影响及作用机制。方法:采用LPS(1.0 mg/L)处理RAW264.7细胞24 h,RT-qPCR检测IL-6、TNF-α、TIPE2 mRNA表达,Western blot检测TIPE2蛋白表达。采用LPS处理稳定过表达或敲降TIPE2细胞系24 h,CCK-8检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率,Tunel染色检测细胞凋亡指数,Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved Caspase-8、Bcl-2、Bax、CHOP、cleaved Caspase-3及Akt、p-Akt^(Ser473)蛋白表达。采用类胰岛素生长因子(IGF-1,100μg/L)预孵育过表达TIPE2细胞系2 h,LPS共处理24 h,CCK-8检测细胞活力,Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果:LPS可活化巨噬细胞,上调IL-6、TNF-αmRNA表达,下调TIPE2 mRNA和蛋白表达(P<0.05)。过表达TIPE2明显降低活化巨噬细胞活力,升高凋亡率和凋亡指数,促进cleaved Caspase-8、Bax、CHOP、cleaved Caspase-3蛋白表达,抑制Bcl-2、p-Akt^(Ser473)蛋白表达(P<0.05);敲降TIPE2作用与之相反。此外,Akt磷酸化激动剂IGF-1可有效减弱TIPE2对活化巨噬细胞活力及凋亡相关蛋白的作用(P<0.05)。结论:TIPE2可能通过抑制Akt磷酸化,进而激活死亡受体途径、线粒体途径和内质网应激途径,促进LPS活化的巨噬细胞凋亡。
关键词
肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2
AKT
脂多糖
巨噬细胞
凋亡
Keywords
TIPE2
Akt
LPS
Macrophage
Apoptosis
分类号
R392.32 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
染料木素通过TIPE 2负性调控Akt活性促进脂多糖活化的巨噬细胞凋亡
被引量：
1
2
作者
刘素娟
丛丽
张勇
向丽萍
谢小林
柏萍娟
向雪萍
符晓华
机构
湖南师范大学小分子靶向药物研究与创制实验室
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第1期69-74,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No 81370382)
文摘
目的探究染料木素(genistein,GEN)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)活化的RAW264.7细胞凋亡的影响及其可能的药理学作用机制。方法GEN预孵育RAW264.7细胞或慢病毒介导的肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(tumor necrosis factor-α-induced protein 8-like 2,TIPE 2)过表达细胞2 h,再与LPS共孵育24 h,采用CCK 8试剂盒检测细胞活力,Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡水平,qRT-PCR检测TNF-α、IL-6、caspase-8、caspase-3和TIPE 2 mRNA,Western blot检测iNOS、COX-2、caspase-8、caspase-3、TIPE 2、Akt和p-Akt蛋白表达。结果LPS促进RAW264.7细胞TNF-α、IL-6、iNOS、COX-2合成;GEN抑制LPS活化的RAW264.7细胞活力,凋亡细胞增多,并上调caspase-8、caspase-3、TIPE 2 mRNA及蛋白表达;TIPE 2过表达上调活化RAW264.7细胞caspase-8、caspase-3 mRNA及蛋白表达,减少Akt磷酸化,且与GEN具有协同作用。结论GEN可能通过上调TIPE 2抑制Akt活性,激活外源性凋亡途径,促进LPS活化的RAW264.7细胞凋亡。
关键词
染料木素
TIPE
2
AKT
RAW264.7细胞
凋亡
脂多糖
Keywords
genistein
TIPE 2
Akt
RAW264.7 cells
apoptosis
lipopolysaccharide
分类号
R329.25 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R392.12 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TIPE2通过抑制Akt磷酸化促进LPS活化的巨噬细胞凋亡
丛丽
谢小林
刘素娟
向丽萍
符晓华(指导)
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
6
在线阅读
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职称材料
2
染料木素通过TIPE 2负性调控Akt活性促进脂多糖活化的巨噬细胞凋亡
刘素娟
丛丽
张勇
向丽萍
谢小林
柏萍娟
向雪萍
符晓华
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
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