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芹菜素对NCI-H446细胞系球细胞自我更新和uPAR表达的影响 被引量：5
1
作者 舒玲 袁庆 +5 位作者 崔迎红 孙姝雯 陈阿 陈丹 曹建国 张坚松 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1124-1127,共4页
目的:研究芹菜素对人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞自我更新的影响及机制。方法:采用干细胞条件培养基超低黏附板悬浮培养法从体外培养NCI-H446细胞系得到球细胞。测定球形成率用以评价0(0.1%DMSO对照组),5.0,10.0,20.0μmol/L芹菜素... 目的:研究芹菜素对人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞自我更新的影响及机制。方法:采用干细胞条件培养基超低黏附板悬浮培养法从体外培养NCI-H446细胞系得到球细胞。测定球形成率用以评价0(0.1%DMSO对照组),5.0,10.0,20.0μmol/L芹菜素对NCI-H446细胞系球细胞自我更新的抑制作用;Western印迹分析球细胞尿激酶型纤维蛋白酶原激活物受体(urokinase-type plasminogen activator receptor,u PAR)的表达。结果:0,5.0,10.0,20.0μmol/L芹菜素呈剂量依赖性抑制NCI-H446细胞系第2代球细胞的球形成率[球形成率分别为(18.2±1.9)%,(13.6±1.7)%,(10.6±1.6),(6.9±1.3)%],并呈浓度依赖性下调u PAR蛋白的表达(P<0.05)。结论:芹菜素抑制人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞自我更新作用,可能与下调u PAR表达相关。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 肺癌干细胞 芹菜素 自我更新 尿激酶型纤维蛋白酶原激活物受体
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MnSOD沉默对NCI-H446细胞系球细胞体外致瘤性的影响 被引量：1
2
作者 袁庆 文敏 +3 位作者 李翔 舒玲 曹建国 张坚松 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期583-588,共6页
目的:研究锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)沉默对人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞体外致瘤性的影响及其潜在的机制。方法:采用悬浮培养法得到人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞,用Western印迹分析MnSOD和尿... 目的:研究锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)沉默对人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞体外致瘤性的影响及其潜在的机制。方法:采用悬浮培养法得到人小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞,用Western印迹分析MnSOD和尿激酶型纤溶原酶激活物(urokinase type plasminogen activator,uPAR)表达。利用腺病毒感染技术沉默NCI-H446细胞MnSOD,球形成法和软琼脂集落形成法评价MnSOD沉默对NCI-H446球细胞体外致瘤性的影响,用Western印迹检测uPAR的表达。结果:与NCI-H446细胞比较,NCI-H446细胞第2代球细胞的球形成率和集落形成率及MnSOD和uPAR表达明显增加(P<0.05)。表达shMnSOD的腺病毒抑制NCI-H446细胞第2代球细胞球形成率、集落形成率及uPAR的表达。结论:MnSOD可能通过调控uPAR表达维持小细胞肺癌NCI-H446细胞系球细胞的体外高致瘤性。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 集落形成 球形成 致瘤性 锰超氧化物歧化酶 尿激酶型纤溶原酶激活物
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基于GINS家族成员在胶质瘤组织中的表达水平对其进行分型及其临床意义
3
作者 廖永珍 梁禄 +1 位作者 李意 丛丽 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期261-270,共10页
目的:基于GINS家族成员在胶质瘤组织中表达水平对其分型,探究此分型预测胶质瘤患者的预后、免疫治疗疗效的有效性,采用TCMOI数据库虚拟筛选可靶向GINS的中药小分子。方法:数据库分析GINS基因组学、胶质瘤组织中差异表达基因与患者预后... 目的:基于GINS家族成员在胶质瘤组织中表达水平对其分型,探究此分型预测胶质瘤患者的预后、免疫治疗疗效的有效性,采用TCMOI数据库虚拟筛选可靶向GINS的中药小分子。方法:数据库分析GINS基因组学、胶质瘤组织中差异表达基因与患者预后的关系,基于GINS家族成员基因表达对胶质瘤进行分型并分析各亚型的预后情况,数据库数据分析各亚型中的基因突变、基因富集、肿瘤纯度和免疫细胞浸润评分,以及与GINS2可能相互作用的中药小分子,最后用qPCR法检测中国人胶质瘤组织中GINS1~4 mRNA的表达水平以验证其与数据库数据的一致性。结果:GINS家族各成员间的基因、蛋白结构和功能相似,胶质瘤组织中GINS家族成员呈高表达且与患者不良预后密切相关(P<0.05),基于GINS家族成员在胶质瘤组织中表达水平的S1、S2亚型分类能较好地预测胶质瘤患者的预后,S1亚型主要突变基因为CDKN2A/B、EGFR、PTEN而S2亚型的突变基因为IDH1、TP53和ATRX,GINS家族可能通过调控免疫微环境影响胶质瘤患者预后,CD276和CX3CL1可能是S1亚型胶质瘤患者实施免疫治疗的潜在靶点,CHEMBL66033、266935、293914、436859、1594881可能是潜在的靶向GINS2的中药小分子。结论:基于GINS家族构建的胶质瘤分子分型有助于识别更适合免疫治疗的高风险患者,筛选出的中药小分子可为胶质瘤患者分子靶向治疗和免疫治疗提供参考。 展开更多
关键词 胶质瘤 GINS家族 分子分型 预后 分子对接 中药
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大数据库批量单因素Cox回归分析的SAS宏程序
4
作者 杨仁东 熊杰 +2 位作者 彭扬琴 彭小宁 曾小敏 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期194-197,共4页
目的:利用SAS宏程序实现批量单因素Cox回归分析。方法:利用SAS9.2软件,结合实例,编写SAS宏程序,进行批量单因素Cox回归分析,筛选输出P值,整合、导出到Excel表中。结果:给出了批量单因素Cox回归分析、结果筛选和导出的SAS宏程序语言。结... 目的:利用SAS宏程序实现批量单因素Cox回归分析。方法:利用SAS9.2软件,结合实例,编写SAS宏程序,进行批量单因素Cox回归分析,筛选输出P值,整合、导出到Excel表中。结果:给出了批量单因素Cox回归分析、结果筛选和导出的SAS宏程序语言。结论:该SAS宏程序具有良好的应用性,可以减少统计分析工作量,为批量单因素Cox回归分析提供了参考。 展开更多
关键词 生存分析 COX回归 SAS 宏程序
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地塞米松对急性肺损伤中TREM-1表达的影响 被引量：6
5
作者 骆凤 郑浩翔 +5 位作者 董良 李年旺 周琴 贾哲 贺丽萍 孙国瑛 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第5期523-527,共5页
目的探讨地塞米松(Dexamethasone,Dex)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠肺组织中髓样细胞表达的触发受体1(triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1)表达的影响。方法以... 目的探讨地塞米松(Dexamethasone,Dex)对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠肺组织中髓样细胞表达的触发受体1(triggering receptor expressed on myeloid cells-1,TREM-1)表达的影响。方法以昆明小鼠为研究对象,腹腔注射LPS(10 mg/kg)建立ALI模型,30 min后给予不同浓度的Dex(5、10、20、40 mg/kg)处理6 h;选用Dex(10 mg/kg)处理不同的时间(6、12、24、36 h)。HE染色法观察肺组织病理损伤程度;RT-PCR检测肺组织TREM-1mRNA的表达;ELISA检测小鼠支气管肺泡灌洗液中可溶性TREM-1(s TREM-1)蛋白水平。结果 Dex可减轻肺病理损伤;Dex呈时间依赖性地下调ALI小鼠肺组织的TREM-1 mRNA的表达,且在6 h即可降低;Dex呈剂量依赖地下调ALI小鼠肺组织中TREM-1 mRNA的表达,并在10 mg/kg时开始降低。Dex可降低ALI小鼠支气管肺泡灌洗液中sTREM-1的蛋白水平。结论 Dex可呈剂量及时间依赖性下调ALI小鼠肺组织中的TREM-1mRNA的表达,并减少肺内髓样细胞胞膜TREM-1的脱落,提示Dex可能通过调节TREM-1的表达,从而抑制ALI早期的炎症级联反应,参与保护肺组织。 展开更多
关键词 髓样细胞表达的触发受体-1 急性肺损伤 地塞米松 脂多糖
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人脐带间充质干细胞来源外泌体对小鼠压疮的治疗作用及机制 被引量：4
6
作者 罗雅婷 解婧 +3 位作者 许涛 谢水林 张坚松 刘劼 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期622-632,共11页
目的探索人脐带间充质干细胞(huc MSC)来源外泌体(huc MSC-Exo)对小鼠4期压疮创面愈合的作用及其机制。方法原代分离、培养人脐带间充质干细胞,取第5代(P5代)细胞培养上清,通过差速离心法提取huc MSC-Exo。将27只成功制备4期压疮模型的B... 目的探索人脐带间充质干细胞(huc MSC)来源外泌体(huc MSC-Exo)对小鼠4期压疮创面愈合的作用及其机制。方法原代分离、培养人脐带间充质干细胞,取第5代(P5代)细胞培养上清,通过差速离心法提取huc MSC-Exo。将27只成功制备4期压疮模型的BALB/c小鼠随机分为huc MSC-Exo治疗组(创周皮下注射100μg溶解于100μL PBS中的huc MSC-Exo)、PBS对照组(创周皮下注射100μL PBS)及模型对照组(未给予huc MSC-Exo和PBS处理)。治疗后评估压疮创面愈合情况,于0、3、7、10、14d拍照并计算创面愈合率;取治疗后7、14 d皮肤样本行H-E染色和Masson染色观察创面病理变化;取治疗后7 d皮肤样本行免疫组织化学染色检测与瘢痕形成相关的α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;取治疗后7、14 d血清检测氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的动态变化。结果huc MSC-Exo治疗组较PBS对照组及模型对照组创面愈合速度加快,瘢痕形成减少,创面愈合率升高。组织病理学结果显示,与PBS对照组及模型对照组比较,huc MSC-Exo治疗组创面损伤程度、炎性浸润情况明显减轻,胶原沉积量增多,胶原纤维排列分布有序。免疫组织化学染色结果显示,huc MSC-Exo治疗组α-SMA蛋白表达少于PBS对照组及模型对照组。血清生物化学检测结果示,huc MSC-Exo治疗组SOD活性在治疗后7 d高于PBS对照组及模型对照组(P均<0.05),到14 d接近正常水平;MDA含量在7 d和14 d均低于PBS对照组及模型对照组(P均<0.05)。结论皮下注射huc MSC-Exo可促进小鼠4期压疮创面愈合,减少瘢痕形成,其机制可能与huc MSC-Exo改善体内氧化应激水平有关。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 外泌体 压疮 伤口愈合 氧化性应激
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髓样细胞表达的触发受体1抑制LPS应激下巨噬细胞的自噬 被引量：2
7
作者 朱爱萍 梁道淼 +5 位作者 粟青 李莉芳 贾哲 贺丽萍 任翔 孙国瑛 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期642-647,共6页
目的观察髓样细胞表达的触发受体1(TREM-1)对脂多糖(LPS)应激下巨噬细胞自噬相关基因表达的影响。方法观察LPS应激下的巨噬细胞TREM-1蛋白的表达。分别选用TREM-1的激动剂(MAB1187)和TREM-1的拮抗剂(LR12)作用于巨噬细胞,利用qPCR检测... 目的观察髓样细胞表达的触发受体1(TREM-1)对脂多糖(LPS)应激下巨噬细胞自噬相关基因表达的影响。方法观察LPS应激下的巨噬细胞TREM-1蛋白的表达。分别选用TREM-1的激动剂(MAB1187)和TREM-1的拮抗剂(LR12)作用于巨噬细胞,利用qPCR检测巨噬细胞自噬相关基因ATG7、ATG5、ATG12及自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)mRNA的表达;采用WesternBlot检测巨噬细胞TREM-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、ATG7蛋白的表达;采用免疫荧光检测在LPS应激与TREM-1激活的情况下,巨噬细胞的自噬标志蛋白LC3表达。结果LPS(400ng/mL、1000ng/mL)应激下巨噬细胞TREM-1蛋白表达明显增加;LPS(1000ng/mL)作用巨噬细胞24h,巨噬细胞TREM-1蛋白表达达到峰值。LPS应激的巨噬细胞自噬基因ATG7、ATG5、ATG12及自噬标志分子LC3mRNA表达均降低;当给予TREM-1拮抗剂后,巨噬细胞的ATG7、ATG5、ATG12、LC3mRNA表达均升高,而采用TREM-1激动剂后,自噬基因表达被抑制。WesternBlot检测结果显示,TREM-1可抑制LPS应激下巨噬细胞LC3Ⅱ/Ⅰ、ATG7蛋白的表达。免疫荧光检测表明TREM-1激动剂可使巨噬细胞胞内的LC3蛋白表达量减少。结论巨噬细胞胞膜上TREM-1激活后,可使巨噬细胞自噬减弱,提示LPS应激下的巨噬细胞TREM-1可能通过抑制巨噬细胞的正常自噬从而发挥炎症放大作用。 展开更多
关键词 髓样细胞表达的触发受体-1 巨噬细胞 脂多糖 自噬
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少腹逐瘀汤对原发性痛经大鼠作用 被引量：19
8
作者 袁立明 周纤纤 +6 位作者 杨梦洁 欧阳婉欣 贾诗杰 刘向光 毛豪初 陶晓军 杨华中 《医药导报》 CAS 2017年第12期1350-1354,共5页
目的探讨少腹逐瘀汤对原发性痛经大鼠扭体行为、炎症反应及环氧化酶2(COX-2)表达的影响。方法将50只SD雌性大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,少腹逐瘀汤大、中、小剂量组,每组10只。采用苯甲酸雌二醇和缩宫素联合制备痛经大鼠模型,观... 目的探讨少腹逐瘀汤对原发性痛经大鼠扭体行为、炎症反应及环氧化酶2(COX-2)表达的影响。方法将50只SD雌性大鼠随机分为空白对照组,模型对照组,少腹逐瘀汤大、中、小剂量组,每组10只。采用苯甲酸雌二醇和缩宫素联合制备痛经大鼠模型,观察少腹逐瘀汤各剂量组对痛经大鼠扭体行为、子宫内膜炎症细胞含量变化、子宫平滑肌COX-2表达的影响。结果模型对照组大鼠扭体潜伏期缩短,总分较高;子宫内膜及平滑肌可见大量以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润;免疫组化子宫平滑肌细胞胞浆内可见棕黄色颗粒,COX-2表达呈阳性。与模型对照组比较,少腹逐瘀汤大、中剂量组SD大鼠扭体潜伏期增长,总分降低;子宫内膜及平滑肌可见极少量炎症细胞浸润,较模型对照组减少(P<0.01);COX-2表达减弱(P<0.01),其中以大剂量组最为显著。与模型对照组比较,小剂量组扭体潜伏期较长,总分较低(P<0.01),子宫内膜及平滑肌有部分炎症细胞浸润,差异无统计学意义(P>0.05);COX-2表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论少腹逐瘀汤治疗原发性痛经可能潜在机制为缓解疼痛、抑制炎症反应、下调COX-2的表达。 展开更多
关键词 少腹逐瘀汤 痛经 原发性 环氧化酶2 免疫组化
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紫花牡荆素通过miR-148a-3p/Wnt1信号通路抑制肝癌MHCC97H细胞的迁移和侵袭 被引量：5
9
作者 娄磊 王靓厚 +1 位作者 王智 李翔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期868-875,共8页
目的用紫花牡荆素(casticin,CAS)处理MHCC97H细胞,观察其迁移和侵袭能力的变化,并初步探讨CAS的分子作用机制。方法CCK-8试剂盒检测不同浓度CAS对MHCC97H细胞活力的影响;分组开展细胞迁移和侵袭实验,评估MHCC97H细胞的迁移和侵袭能力;... 目的用紫花牡荆素(casticin,CAS)处理MHCC97H细胞,观察其迁移和侵袭能力的变化,并初步探讨CAS的分子作用机制。方法CCK-8试剂盒检测不同浓度CAS对MHCC97H细胞活力的影响;分组开展细胞迁移和侵袭实验,评估MHCC97H细胞的迁移和侵袭能力;逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CAS处理后,MHCC97H细胞的miR-148a-3p和Wnt1 mRNA表达变化;迁移侵袭相关蛋白(MMP2、MMP9)和Wnt1蛋白表达量采用Western blot检测;Dual-Luciferase报告基因检测miR-148a-3p与Wnt13′-UTR的结合情况。结果CAS明显抑制MHCC97H细胞的生存活力,其对这种细胞的IC_(50)约为10.0μmol·L^(-1),亚细胞毒浓度的CAS(3.0μmol·L^(-1))可减弱这种细胞的迁移和侵袭能力;miR-148a-3p mimic或CAS均能抑制MHCC97H细胞迁移和侵袭能力,且两者联合处理后的抑制作用强于单独使用;过表达Wnt1能有效减弱CAS的抑制作用;CAS能明显上调MHCC97H细胞miR-148a-3p表达,同时Wnt1、MMP2和MMP9的表达呈现下降;Dual-Luciferase报告基因发现,miR-148a-3p可以直接靶向Wnt13′-UTR。结论CAS可通过miR-148a-3p/Wnt1信号通路减弱肝癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 紫花牡荆素 肝癌 MHCC97H细胞 miR-148a-3p/Wnt1信号通路 细胞迁移 细胞侵袭
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