小麦TaZFP33基因克隆、生物信息学分析、亚细胞定位与表达分析 被引量：2

1

作者 巫群 李永亮 +4 位作者 邹肖肖 孙傲龙 林晓霞 周苹 郭新红 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期9-14,共6页

C_(2)H_(2)锌指蛋白作为最大的转录因子家族之一,在调节植物生长发育及逆境胁迫应答反应中起着重要作用。以春小麦品种Fielder(Triticum aestivum L.cv.Fielder)为材料克隆到锌指蛋白TaZFP33基因,其编码区全长510 bp,编码169个氨基酸。... C_(2)H_(2)锌指蛋白作为最大的转录因子家族之一,在调节植物生长发育及逆境胁迫应答反应中起着重要作用。以春小麦品种Fielder(Triticum aestivum L.cv.Fielder)为材料克隆到锌指蛋白TaZFP33基因,其编码区全长510 bp,编码169个氨基酸。生物信息学分析得知:TaZFP33蛋白分子质量为17.5 ku,等电点为6.43,属于Q型锌指蛋白,且为不稳定疏水性蛋白。通过系统进化与启动子分析表明该基因可能受ABA诱导的相关胁迫响应。转化烟草进行瞬时表达分析,结果表明TaZFP33定位在细胞核上。实时荧光定量分析组织特异性表达表明,TaZFP33基因在小麦胚、根、茎、叶中均有表达,其中在胚中表达量最高。经不同浓度的ABA、PEG6000和NaCl处理幼苗后,发现TaZFP33基因对上述胁迫均有不同程度的响应。该研究为后续深入探索TaZFP33基因的生物学功能研究奠定了基础,也为小麦的抗逆性研究提供候选基因。 展开更多

关键词 小麦 TaZFP33基因 基因克隆 生物信息学 亚细胞定位 表达分析

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CONSTANS-LIKE 7基因对拟南芥开花的调控分析 被引量：5

2

作者 王宏归 黄晨 +5 位作者 陈鹏 姜雅 张娅 唐冬英 赵小英 刘选明 《湖南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第12期88-94,共7页

为研究CONSTANS-LIKE 7(COL7)在调控植物开花方面的功能,以定量PCR,GUS染色等方法,研究光及生物钟对COL7表达的影响,以及COL7对拟南芥开花的影响.实验结果显示:光及生物钟参与调控COL7的表达;过表达COL7在长日照条件下抑制CONSTANS(CO)... 为研究CONSTANS-LIKE 7(COL7)在调控植物开花方面的功能,以定量PCR,GUS染色等方法,研究光及生物钟对COL7表达的影响,以及COL7对拟南芥开花的影响.实验结果显示:光及生物钟参与调控COL7的表达;过表达COL7在长日照条件下抑制CONSTANS(CO)以及FLOWERING LOCUS T(FT)的表达,进而抑制拟南芥开花;col7突变体不论是在长日照下还是短日照下都没有明显的开花表型,说明COL7在调控拟南芥开化方面可能与其家族基因中的其它成员存在功能冗余. 展开更多

关键词 基因表达 拟南芥 CONSTANS-LIKE7 开花

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仙鹤草收敛止血功能及体外抑菌实验 被引量：15

3

作者 徐威 王耀斌 +3 位作者 周彦宇 赵李剑 刘斌 童春义 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1020-1023,1054,共5页

为了研究仙鹤草的收敛止血功效和抑菌作用,本实验通过构建大鼠皮肤损伤模型、烫伤模型,在探讨添加溶菌酶对仙鹤草新鲜和冻干粉末对两种大鼠模型的收敛止血功效和保存时间影响基础上,进一步考察仙鹤草对表皮葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假... 为了研究仙鹤草的收敛止血功效和抑菌作用,本实验通过构建大鼠皮肤损伤模型、烫伤模型,在探讨添加溶菌酶对仙鹤草新鲜和冻干粉末对两种大鼠模型的收敛止血功效和保存时间影响基础上,进一步考察仙鹤草对表皮葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞杆菌的抑菌效果。实验发现:新鲜仙鹤草粉末对大鼠伤口愈合效果明显强于冻干粉末,略逊于云南白药;粉末中添加溶菌酶对大鼠伤口愈合效果没有明显影响,但可显著延长鲜草存放时间;表皮葡萄球菌、大肠杆菌和铜绿假单胞杆菌对仙鹤草提取物敏感程度依次降低。结果表明:仙鹤草收敛止血的有效活性主要存在于鲜叶中;其提取物可以抑制常见致病菌的生长;溶菌酶可延长仙鹤草的储存时间。 展开更多

关键词 仙鹤草 损伤模型 收敛止血 细菌 抑菌作用

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拟南芥GH3.9基因的过表达及其表型分析 被引量：6

4

作者 周苹 唐冬英 +3 位作者 郭明 谭振华 赵小英 刘选明 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期454-458,共5页

为研究GH3.9基因在植物生长发育过程中的作用,利用RT-PCR成功克隆到GH3.9基因,该基因全长为1 750bp。通过构建pEGAD-GH3.9过表达载体转化拟南芥,获得过表达GH3.9基因纯系转基因株系GH3.9ox-3和GH3.9ox-7。对拟南芥野生型(WT)和转基因株... 为研究GH3.9基因在植物生长发育过程中的作用,利用RT-PCR成功克隆到GH3.9基因,该基因全长为1 750bp。通过构建pEGAD-GH3.9过表达载体转化拟南芥,获得过表达GH3.9基因纯系转基因株系GH3.9ox-3和GH3.9ox-7。对拟南芥野生型(WT)和转基因株系(GH3.9ox-3和GH3.9ox-7)幼苗用不同光强和光质进行处理,结果显示:在蓝光、红光、远红光等不同光照强度下培养,过表达株系幼苗下胚轴的生长均明显受到抑制,且较野生型明显;采用不同光周期处理拟南芥幼苗,过表达幼苗下胚轴的伸长明显低于野生型;对成年植株表型进行观察,发现过表达株系植株矮小、雄蕊变短、果荚短小。研究表明:GH3.9基因参与了拟南芥生长发育调控,过表达GH3.9基因对拟南芥生长有抑制作用。 展开更多

关键词 拟南芥 GH3.9基因 过表达 表型分析

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水稻OsDHHC13基因参与氧化胁迫响应的初步研究 被引量：4

5

作者 刘选明 王文文 +4 位作者 杨远柱 夏妙林 李夏 左栋梁 林建中 《湖南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第12期110-117,共8页

DHHC型锌指蛋白参与细胞内蛋白质的棕榈酰化修饰,对细胞和个体的生长发育起着重要的调控作用.OsDHHC13是典型的DHHC型锌指蛋白基因.生物信息学分析发现,OsDHHC13的启动子区域含有胁迫及光响应元件,而且其编码蛋白是具有4个跨膜结构域的... DHHC型锌指蛋白参与细胞内蛋白质的棕榈酰化修饰,对细胞和个体的生长发育起着重要的调控作用.OsDHHC13是典型的DHHC型锌指蛋白基因.生物信息学分析发现,OsDHHC13的启动子区域含有胁迫及光响应元件,而且其编码蛋白是具有4个跨膜结构域的典型膜蛋白.对OsDHHC13过表达株系进行H2O2的氧化胁迫处理发现,过表达株系幼苗的根显著长于野生型,说明OsDHHC13能解除H2O2对根生长的抑制,提高了抗氧化胁迫的能力.随后H2O2含量测定发现,OsDHHC13过表达株系幼苗根部的H2O2含量显著低于野生型.进一步的qRT-PCR分析发现,与清除H2O2相关的酶基因的转录水平在过表达株系中显著升高,说明OsDHHC13能促进清除H2O2的相关酶基因的表达,调节内源性H2O2的动态平衡.总之,本研究结果初步证明锌指蛋白基因OsDHHC13正调控水稻的抗氧化胁迫能力. 展开更多

关键词 OsDHHC13基因 H2O2含量 根长 锌指蛋白

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拟南芥AtWNK9基因的定位及表达分析 被引量：1

6

作者 赵小英 谢敏敏 +5 位作者 贺热情 段桂芳 王丽群 李秀山 林建中 刘选明 《湖南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第10期87-92,共6页

AtWNK9为拟南芥WNK(With no lysine kinase)激酶家族成员,其功能尚不清楚.采用生物信息学和生物学实验相结合的方法,对AtWNK9蛋白结构、亚细胞定位、启动子元件、基因表达模式进行了分析.研究发现,AtWNK9定位在细胞核中;该基因在拟南芥... AtWNK9为拟南芥WNK(With no lysine kinase)激酶家族成员,其功能尚不清楚.采用生物信息学和生物学实验相结合的方法,对AtWNK9蛋白结构、亚细胞定位、启动子元件、基因表达模式进行了分析.研究发现,AtWNK9定位在细胞核中;该基因在拟南芥根中高效表达,其表达受ABA,NaCl、葡萄糖、热和冷等非生物胁迫处理强烈诱导.结果表明,AtWNK9为非生物胁迫反应相关基因,并可能参与根的生长发育. 展开更多

关键词 基因表达 拟南芥 AtWNK9

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利用CRISPR/Cas9技术编辑水稻温敏不育基因TMS 被引量：10

7

作者 陈日荣 周延彪 +8 位作者 王黛君 赵新辉 唐晓丹 许世冲 唐倩莹 符星学 王凯 刘选明 杨远柱 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1157-1165,共9页

tms5是生产上应用最广泛的温敏不育基因。为创制新型水稻温敏核不育系,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将6个优异的粳稻和4个优异的籼稻的TMS5基因敲除,获得了温敏核不育系。比较发现,粳稻温敏不育系ZG75S、CYGS、YG0618S、ZG07S、T0361S、... tms5是生产上应用最广泛的温敏不育基因。为创制新型水稻温敏核不育系,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将6个优异的粳稻和4个优异的籼稻的TMS5基因敲除,获得了温敏核不育系。比较发现,粳稻温敏不育系ZG75S、CYGS、YG0618S、ZG07S、T0361S、7679S的不育起点温度在28~32°C之间,籼稻温敏核不育系2537S、6150S、6379S的不育起点温度在24~28°C之间,而籼稻温敏核不育系1109S的不育起点温度低于23.5°C。说明不同遗传背景材料获得的tms5突变体的不育起点温度不一样,通过TMS5的敲除可能获得不育起点温度较低的温敏核不育系。利用1109S与优质父本8048选配出优质高产杂交稻组合1109S/8048。大田试验表明, 1109S/8048比区试对照丰两优4号增产13.1%。温敏核不育系1109S及高产杂交稻组合1109S/8048的创制为高产育种提供了新的途径。 展开更多

关键词 水稻 CRISPR/Cas9 温敏不育 TMS5 杂交组合

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基于matK和rbcL序列的石斛属植物亲缘关系研究 被引量：10

8

作者 林晓霞 鹿炎 +3 位作者 李会丽 周苹 郭新红 印丽萍 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期46-50,共5页

采集了中国6个省份的铁皮石斛种质资源共22份,通过叶绿体基因matK和rbcL进行克隆测序,同时结合已报道的近缘物种matK序列33个和rbcL序列30个进行系统进化分析及分子鉴定。序列结果显示:matK基因序列平均长度为1708 bp,GC含量32%,保守位... 采集了中国6个省份的铁皮石斛种质资源共22份,通过叶绿体基因matK和rbcL进行克隆测序,同时结合已报道的近缘物种matK序列33个和rbcL序列30个进行系统进化分析及分子鉴定。序列结果显示:matK基因序列平均长度为1708 bp,GC含量32%,保守位点768个,简约信息位点871个;rbcL基因序列平均长度1332 bp,GC含量42.9%,保守位点802个,简约信息位点24个。遗传多样性分析表明:matK序列单倍型数量(H)32个,单倍型多态性水平(Hd)0.842,核苷酸多态性(π)0.27016;rbcL序列H为10个,Hd为0.664,π为0.02611;序列分析及遗传多样性显示matK序列的分析结果具有更大的遗传多样性。遗传聚类结果显示不同产地的铁皮石斛与已有报道的石斛属各聚一支,相同产地铁皮石斛的聚类结果也与其地理分布基本一致。matK序列作为石斛属系统进化关系及亲缘关系分析具有更高的遗传多样性;中国6个省份铁皮石斛种质资源在进化上也具有一定的地域性特征。 展开更多

关键词 石斛属 铁皮石斛 叶绿体基因 系统进化树

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F-box基因FOF2在拟南芥盐和冷胁迫响应中的功能分析 被引量：5

9

作者 刘选明 孙孟思 +4 位作者 李新梅 贺热情 屈丽娜 唐冬英 赵小英 《湖南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第6期120-127,共8页

FOF2为F-box蛋白家族成员,其生物学功能尚不清楚.采用实时荧光定量PCR和生理学实验相结合的方法,对FOF2基因的表达模式及其在拟南芥抗盐和冷胁迫响应中的作用进行了分析.研究发现,FOF2在拟南芥根、茎生叶和果荚中表达较高,并且其表达受... FOF2为F-box蛋白家族成员,其生物学功能尚不清楚.采用实时荧光定量PCR和生理学实验相结合的方法,对FOF2基因的表达模式及其在拟南芥抗盐和冷胁迫响应中的作用进行了分析.研究发现,FOF2在拟南芥根、茎生叶和果荚中表达较高,并且其表达受盐和冷胁迫诱导.FOF2过表达株系对盐胁迫敏感,与野生型相比种子萌发率低、幼苗主根较短;相反,fof2突变体对盐胁迫的敏感性则减弱.FOF2过表达和缺失突变体种子萌发对冷胁迫无响应,但其主根在冷处理中分别比野生型短或者长.盐处理下,FOF2过表达株系中盐胁迫反应相关基因的表达量显著降低,fof2突变体中则升高;冷处理下,FOF2过表达株系中冷胁迫反应相关基因的表达量显著升高,fof2突变体中则降低.结果表明,FOF2在植物抗盐胁迫响应中起负调控作用,在抗冷胁迫响应中则可能起正调控作用. 展开更多

关键词 功能分析 FOF2 F-box基因 逆境胁迫 拟南芥

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拟南芥F-box蛋白FKF1与转录因子FUL互作调控开花研究 被引量：1

10

作者 周娟 阎晋东 +3 位作者 李新梅 刘雪晴 赵强 赵小英 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期1-8,共8页

F-box蛋白FLAVIN-BINDING KELCH REPEAT F-BOX 1(FKF1)参与调控拟南芥光周期开花,但其分子机制尚不完全清楚。本研究通过体内和体外实验,证明FKF1与转录因子FRUITFULL(FUL)相互作用。qRT-PCR和Western blot结果显示,FKF1正调节FUL的转... F-box蛋白FLAVIN-BINDING KELCH REPEAT F-BOX 1(FKF1)参与调控拟南芥光周期开花,但其分子机制尚不完全清楚。本研究通过体内和体外实验,证明FKF1与转录因子FRUITFULL(FUL)相互作用。qRT-PCR和Western blot结果显示,FKF1正调节FUL的转录水平,但不影响FUL蛋白的稳定性。遗传分析结果显示,35S-FKF1-Myc/ful-8双突变体的开花表型以及开花基因FLOWERING LOCUS T(FT)的转录水平与ful-8突变体相一致。研究结果表明FKF1可通过与FUL互作,在FUL的上游促进FT表达,进而促进开花。 展开更多

关键词 开花 FKF1 FUL 拟南芥

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水稻bHLH转录因子Os11g39000的功能研究 被引量：3

11

作者 刘选明 彭玉冲 +4 位作者 杨远柱 李懿星 夏妙林 王文文 林建中 《湖南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第6期109-116,共8页

水稻Os11g39000为非典型的bHLH家族成员,其功能尚不清楚.酵母双杂交实验表明,转录因子Os11g39000可以形成同源蛋白聚合体.随机结合位点筛选实验表明,转录因子Os11g39000可以与DNA结合,并且其结合位点初步确定为TT/CG/CACC/GT/C.Os11g39... 水稻Os11g39000为非典型的bHLH家族成员,其功能尚不清楚.酵母双杂交实验表明,转录因子Os11g39000可以形成同源蛋白聚合体.随机结合位点筛选实验表明,转录因子Os11g39000可以与DNA结合,并且其结合位点初步确定为TT/CG/CACC/GT/C.Os11g39000基因的组织表达模式分析发现,Os11g39000基因主要在叶片和根中表达,推测该基因可能在叶和根的发育调控中发挥作用.水培实验发现,该基因功能缺陷型转基因株系的根长显著短于野生型,表现出明显的根部发育缺陷,表明Os11g39000在水稻根的发育中起调控作用.Q-PCR分析进一步证明,功能缺陷型转基因植株体内生长素合成和信号转导相关基因表达量显著上升,表明转录因子Os11g39000参与了水稻生长素的合成和信号转导的调控. 展开更多

关键词 水稻 bHLH转录因子 Os11g39000 生长素

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一种简单高效的水稻体细胞诱变育种新方法 被引量：2

12

作者 林建中 杨远柱 +8 位作者 周波 符辰建 杜长青 胡小淳 唐冬英 赵小英 史江伟 朱咏华 刘选明 《湖南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第9期79-85,共7页

多样化种质资源的利用对于培育高产和理想农艺性状水稻品种显得非常重要.在本研究中,通过研究继代时间、2,4-D浓度和不同外植体对诱变和分化频率的影响,建立了幼穗为外植体、继代培养时间为3个周期(约75d)以及2,4-D的最佳诱变浓度为4.0m... 多样化种质资源的利用对于培育高产和理想农艺性状水稻品种显得非常重要.在本研究中,通过研究继代时间、2,4-D浓度和不同外植体对诱变和分化频率的影响,建立了幼穗为外植体、继代培养时间为3个周期(约75d)以及2,4-D的最佳诱变浓度为4.0mg/L的体细胞诱变育种方法.然后利用该方法诱变杂交水稻亲本株1S和中9B,分别成功选育了优良矮化突变株系SV14S和SV9B,为后续的杂交育种提供了优质种质资源.这些育种成果的取得进一步证实了该水稻体细胞诱变育种方法是一种简单高效的新型育种方法. 展开更多

关键词 突变 水稻（Oryza SATIVA L ） 组织培养 2 4-D 育种

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烟草烟碱转化相关蛋白质筛选分析研究

13

作者 童春义 蒋斌 +2 位作者 金立锋 赵冰 杨粤军 《湖南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第6期119-124,共6页

为了研究烟草中烟碱转化机理,应用比较蛋白组学方法研究了高烟碱烟草中烟碱转化相关蛋白质表达情况.采用双向电泳联用质谱技术比较了实验组高烟碱转化烟草叶片和对照组野生型烟草叶片的蛋白质差异,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图... 为了研究烟草中烟碱转化机理,应用比较蛋白组学方法研究了高烟碱烟草中烟碱转化相关蛋白质表达情况.采用双向电泳联用质谱技术比较了实验组高烟碱转化烟草叶片和对照组野生型烟草叶片的蛋白质差异,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.选取了34个差异蛋白质点,采用MALDI-TOF-TOF-MS进行肽质谱指纹图分析,最终有12个蛋白质点得到了可靠鉴定,其中在实验组中相对下调的蛋白有7个,相对上调的蛋白有5个.通过比对蛋白质组库数据,发现这些差异表达的蛋白质主要是参与碳水化合物代谢、能量代谢等功能,而且亚细胞定位主要是在叶绿体和线粒体,表明这些蛋白表达水平与烟碱转化具有密切关系,为研究高烟碱转化率烟叶的形成机理提供了新的依据. 展开更多

关键词 烟草 叶片 烟碱 高转化 差异蛋白质组

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与CRY1相互作用的转录因子蛋白的筛选

14

作者 何志敏 冯盼盼 +2 位作者 荣朵艳 赵小英 刘选明 《生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第5期47-52,86,共7页

拟南芥CRY1(cryptochrome1)通过蛋白相互作用启动蓝光信号的传导,从而促进植物光形态建成。为深入研究CRY1介导蓝光信号传导的机制,以CRY1为诱饵蛋白,通过酵母双杂交系统的营养缺陷型试验、液体显色试验、分段相互作用试验方法,从拟南... 拟南芥CRY1(cryptochrome1)通过蛋白相互作用启动蓝光信号的传导,从而促进植物光形态建成。为深入研究CRY1介导蓝光信号传导的机制,以CRY1为诱饵蛋白,通过酵母双杂交系统的营养缺陷型试验、液体显色试验、分段相互作用试验方法,从拟南芥转录因子酵母库中筛选与其相互作用的转录因子蛋白。结果表明,通过营养缺陷型筛选试验以及以ONPG为底物的液体显色试验初步获得与CRY1相互作用的41个转录因子蛋白;选取与CRY1相互作用蓝光依赖程度较高或酶活性高的转录因子以CPRG为底物的液体显色试验进行进一步验证,发现选取的转录因子蛋白与CRY1的相互作用具有蓝光依赖性且随蓝光处理时间的延长相互作用强度增强;CRY1各分段与转录因子蛋白相互作用试验结果表明转录因子SPL3和IDD4主要与CRY1的N端相互作用,与C端的相互作用比较微弱,但是SPL3与CRY1 C端的相互作用具有蓝光特异性而IDD4与CRY1 C端的蓝光特异性相互作用不明显。 展开更多

关键词 CRY1 酵母双杂交 转录因子 拟南芥

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无蜡粉油菜菜薹绿菜薹1号产量及菜薹营养品质分析 被引量：6

15

作者 王塽 王渝忻 +6 位作者 钟鸣 史非凡 兰宇辉 卓宇红 陈克高 李新梅 赵小英 《现代农业科技》 2019年第14期59-60,64,共3页

通过与白菜薹和红菜薹进行对比试验和化学检测,研究无蜡粉绿菜薹1号在长沙生态条件下的生育进程、产量和菜薹品质。结果表明,绿菜薹1号菜薹平均单产为14360.36kg/hm^2,菜薹干物质、VC含量、总氨基酸和粗蛋白的含量比红菜薹高,分别为10.7... 通过与白菜薹和红菜薹进行对比试验和化学检测,研究无蜡粉绿菜薹1号在长沙生态条件下的生育进程、产量和菜薹品质。结果表明,绿菜薹1号菜薹平均单产为14360.36kg/hm^2,菜薹干物质、VC含量、总氨基酸和粗蛋白的含量比红菜薹高,分别为10.75mg/100g、33.26mg/100g、2.64%、3.94%;可溶性糖、纤维素含量与红菜薹相当,分别为1.35%和11.00%。 展开更多

关键词 绿菜薹1号 无蜡粉油菜菜薹 产量 营养品质

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