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多重PCR快速检测恶性疟和间日疟的研究
被引量：
10
1
作者
李欢
孙菲
+1 位作者
文岚
王晓春
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期288-291,共4页
目的建立一种简便快速、能同时检测恶性疟和间日疟的核酸检测方法。方法针对两种疟原虫18SrRNA基因设计2对(3条引物),优化引物浓度与退火温度,建立可扩增出两种疟原虫基因片段的多重PCR。并进行最低检测限确定和临床标本检测,以镜检法...
目的建立一种简便快速、能同时检测恶性疟和间日疟的核酸检测方法。方法针对两种疟原虫18SrRNA基因设计2对(3条引物),优化引物浓度与退火温度,建立可扩增出两种疟原虫基因片段的多重PCR。并进行最低检测限确定和临床标本检测,以镜检法为金标准分析灵敏度和特异度等指标。结果该方法可扩增出431bp(恶性疟原虫)和341bp(间日疟原虫)基因片段,最低检测限为102copies/反应,检测临床标本的结果与镜检法无差别(P>0.05),敏感度为93.55%,特异度为70.83%,阳性预测值为89.23%,阴性预测值为80.95%。结论所建立的多重PCR方法可快速检测疟疾感染并鉴别分型,灵敏度高,值得推广。
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关键词
疟疾
恶性疟原虫
间日疟原虫
多重PCR
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职称材料
SYBR GreenⅠ实时PCR检测甲型H1N1与季节性流感病毒方法的建立
被引量：
2
2
作者
李文悌
孙菲
王晓春
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期59-63,共5页
目的建立一种检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。方法设计针对甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒HA基因的引物,分别进行SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应,同时进行熔解曲线和Tm值分...
目的建立一种检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。方法设计针对甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒HA基因的引物,分别进行SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应,同时进行熔解曲线和Tm值分析,并作灵敏度和重复性试验。结果该方法与H5、H7、H9亚型流感病毒及副流感病毒1、2、3型均无交叉反应。构建的荧光定量标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为:95.588%,检测灵敏度为101copies/反应体系,结果重现性好。成功地验证性检验了32份盲样标本。结论本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法敏感、不需荧光标记探针、成本低及高通量,能用于人类流感病毒的分型检测。
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关键词
甲型H1N1
实时荧光定量PCR
SYBR
GreenⅠ
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职称材料
题名
多重PCR快速检测恶性疟和间日疟的研究
被引量：
10
1
作者
李欢
孙菲
文岚
王晓春
机构
中南大学湘雅医学院医学检验系
湖南国际旅行卫生保健中心
综合实验室
湖南
省长沙市疾病预防控制
中心
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第3期288-291,共4页
基金
中南大学中央高校基本科研业务费专项资金资助(No.2013zzts299)
长沙市科技计划项目(No.K1205032-31)
+1 种基金
湖南省科技计划项目(No.2012SK3301)
国家质检总局科技计划项目(No.2013IK224)~~
文摘
目的建立一种简便快速、能同时检测恶性疟和间日疟的核酸检测方法。方法针对两种疟原虫18SrRNA基因设计2对(3条引物),优化引物浓度与退火温度,建立可扩增出两种疟原虫基因片段的多重PCR。并进行最低检测限确定和临床标本检测,以镜检法为金标准分析灵敏度和特异度等指标。结果该方法可扩增出431bp(恶性疟原虫)和341bp(间日疟原虫)基因片段,最低检测限为102copies/反应,检测临床标本的结果与镜检法无差别(P>0.05),敏感度为93.55%,特异度为70.83%,阳性预测值为89.23%,阴性预测值为80.95%。结论所建立的多重PCR方法可快速检测疟疾感染并鉴别分型,灵敏度高,值得推广。
关键词
疟疾
恶性疟原虫
间日疟原虫
多重PCR
Keywords
malaria
Plasmodium falciparum
Plasmodium vivax
multiplex PCR
分类号
R382.3 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
SYBR GreenⅠ实时PCR检测甲型H1N1与季节性流感病毒方法的建立
被引量：
2
2
作者
李文悌
孙菲
王晓春
机构
中南大学湘雅医学院医学检验系
湖南国际旅行卫生保健中心
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期59-63,共5页
基金
湖南省科技厅项目(2011sk3260)
湖南省出入境检验检疫局科技项目(2009hnk001)
+1 种基金
长沙市科技局科技项目(K0904150-11)
中南大学研究生学位论文创新基金(2011ssxt253)~~
文摘
目的建立一种检测甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法。方法设计针对甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2与乙型流感病毒HA基因的引物,分别进行SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR反应,同时进行熔解曲线和Tm值分析,并作灵敏度和重复性试验。结果该方法与H5、H7、H9亚型流感病毒及副流感病毒1、2、3型均无交叉反应。构建的荧光定量标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率为:95.588%,检测灵敏度为101copies/反应体系,结果重现性好。成功地验证性检验了32份盲样标本。结论本研究建立的SYBR GreenⅠ实时荧光PCR方法敏感、不需荧光标记探针、成本低及高通量,能用于人类流感病毒的分型检测。
关键词
甲型H1N1
实时荧光定量PCR
SYBR
GreenⅠ
Keywords
novel influenza A H1N1
real-time fluorescence quantitative PCR
SYBR GreenⅠ
分类号
R373.1 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
多重PCR快速检测恶性疟和间日疟的研究
李欢
孙菲
文岚
王晓春
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
10
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
SYBR GreenⅠ实时PCR检测甲型H1N1与季节性流感病毒方法的建立
李文悌
孙菲
王晓春
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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职称材料
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