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大肠癌相关抗原CA-Hb3的提取、亲和层析纯化及其生物学特性 被引量:3
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作者 胡志伟 李小玲 +2 位作者 周国华 朱建高 孙去病 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期363-367,共5页
方法:应用TritonX100和正丁醇分别提取了大肠癌组织粗提抗原和大肠癌细胞株HRT-18的CBE(正丁醇提取物),二者均有抗原活性。抗原经抗大肠癌单抗Hb3-亲和层析进一步纯化,获得纯大肠癌相关抗原CA-Hb3... 方法:应用TritonX100和正丁醇分别提取了大肠癌组织粗提抗原和大肠癌细胞株HRT-18的CBE(正丁醇提取物),二者均有抗原活性。抗原经抗大肠癌单抗Hb3-亲和层析进一步纯化,获得纯大肠癌相关抗原CA-Hb3。结果:经鉴定,CA-Hb3为糖蛋白,其抗原活性与糖链有关。其分子量随变性程度而异,变性完全(100℃巯基乙醇作用5min)时为50kD,而变性不完全(100℃3min)约27kD,故推测该抗原是由两个亚基(约27kD)组成的同源二聚体。结论:在SDS-PAGE鉴定蛋白质分子量时。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 抗原 CA-Hb3 亲和层析纯化
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从人源单链抗体库中筛出具有抗原结合活性的重链可变区和更小抗体片段 被引量:3
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作者 胡志伟 段招军 +3 位作者 朱建高 周国华 胡锦跃 孙去病 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期148-150,共3页
目的:用噬菌体呈现技术结合体外致敏法构建了人源单链抗体库,并用大肠癌相关抗原CAHb3筛选出抗大肠癌噬菌体抗体克隆EL5D、EL6D和Ca12,测定3个克隆的核苷酸序列,并研究其免疫活性。方法:采用抗体克隆扩增、测... 目的:用噬菌体呈现技术结合体外致敏法构建了人源单链抗体库,并用大肠癌相关抗原CAHb3筛选出抗大肠癌噬菌体抗体克隆EL5D、EL6D和Ca12,测定3个克隆的核苷酸序列,并研究其免疫活性。方法:采用抗体克隆扩增、测序分析、免疫组化法测定活性。结果:抗体基因插入片段分别为220、500、500bp。测序结果表明,EL6D和Ca12属VH5DJH4,仅为VH结构亚单位,而EL5D属Vκ的Jκ1,仅为FR3CDR3FR4结构。三者均能与人结直肠癌细胞和组织反应,与其亲本鼠源单抗Hb3的结合特性一致。3个抗体克隆已列入国际基因库,序号为AF051165AF051167。结论:短的人源抗体片段具有潜在临床应用价值。 展开更多
关键词 免疫球蛋白基因 单链抗体库 大肠癌靶向
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抗体的产生及改进的启示
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作者 蔡小红 孙去病 卢德怀 《医学与哲学》 1997年第3期122-124,共3页
应用噬菌体呈现技术建立抗黑色素瘤全套抗体文库,发现黑色素瘤特异性较高的单链抗体V86克隆实际是一个重链抗体。进一步证实,重链抗体文库比单链抗体文库较易得到肿瘤特异性抗体。研究过程中体现了意外发现的意义和认识是螺旋式上... 应用噬菌体呈现技术建立抗黑色素瘤全套抗体文库,发现黑色素瘤特异性较高的单链抗体V86克隆实际是一个重链抗体。进一步证实,重链抗体文库比单链抗体文库较易得到肿瘤特异性抗体。研究过程中体现了意外发现的意义和认识是螺旋式上升的辩证思想。 展开更多
关键词 抗体 全套缺本文库 重链抗体
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