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猪胸膜炎放线杆菌重组外膜蛋白LOLA诱导小鼠产生免疫保护力的研究 被引量:4
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作者 张宇航 张雨龙 +1 位作者 杨婷婷 黄复深 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期607-611,共5页
为筛选出具有广谱抗猪传染性胸膜肺炎作用的疫苗候选分子,本研究利用PCR技术从血清1型猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(App)基因组克隆外膜蛋白(Omp)lola基因。经生物信息学分析显示,App lola基因由633 bp组成,编码210个氨基酸,不同的血清型... 为筛选出具有广谱抗猪传染性胸膜肺炎作用的疫苗候选分子,本研究利用PCR技术从血清1型猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(App)基因组克隆外膜蛋白(Omp)lola基因。经生物信息学分析显示,App lola基因由633 bp组成,编码210个氨基酸,不同的血清型之间具有很高的同源性。将App lola克隆至pET-32a(+),转化大肠杆菌,表达重组蛋白rLOLA。取4周龄小鼠60只,随机分为6组,分别于0、2、4周经皮下免疫:弗氏不完全佐剂(IFA)+10μg rLOLA(低剂量组)、IFA+30μg rLOLA(中剂量组)、IFA+50μg rLOLA(高剂量组)、30μg rLOLA(rLOLA组)、IFA(对照组)和生理盐水(对照组)。ELISA检测结果显示,第3次免疫接种后相较于对照组(IFA组和生理盐水组),实验组小鼠血清IgG水平均明显升高,尤以高剂量组小鼠(IFA+50μg rLOLA)更显著(p<0.01)。于第3次免疫后2周,利用10×LD50 App对小鼠腹腔注射攻毒,5 d后对照组小鼠全部死亡,30μg rLOLA、IFA+50μg rLOLA、IFA+30μg rLOLA、IFA+10μg rLOLA免疫组小鼠存活率分别为20%、40%、20%和10%。上述结果表明,IFA+rLOLA可以诱导部分抗App攻击感染的免疫保护作用。本研究为进一步研究广谱抗猪传染性胸膜肺炎疫苗积累了基础资料。 展开更多
关键词 猪胸膜炎放线杆菌 重组LOLA蛋白 小鼠 免疫保护效果
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高效液相法检测鸡盲肠中的沙咪珠利 被引量:1
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作者 易远胜 郭春娜 +4 位作者 王霄旸 张可煜 杨帆帆 孙志良 薛飞群 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第2期80-84,共5页
为研究抗球虫新化合物沙咪珠利在鸡盲肠中的药物代谢和消除情况,建立检测鸡盲肠中沙咪珠利的高效液相色谱法。检测方法以妥曲珠利亚砜为内标,X TERRA MS C18 5μm(Waters,4.6×250 mm)柱为分析柱,乙腈∶0.2%磷酸水溶液(v/v,35∶65)... 为研究抗球虫新化合物沙咪珠利在鸡盲肠中的药物代谢和消除情况,建立检测鸡盲肠中沙咪珠利的高效液相色谱法。检测方法以妥曲珠利亚砜为内标,X TERRA MS C18 5μm(Waters,4.6×250 mm)柱为分析柱,乙腈∶0.2%磷酸水溶液(v/v,35∶65)为流动相等度洗脱,C18柱分离后,在251 nm波长紫外检测器检测,内标法定量。鸡盲肠样品经匀浆化后,乙腈提取、己烷除脂。结果表明,该方法在0.2~40 mg/kg添加浓度范围内检测鸡盲肠中沙咪珠利具有很好的线性关系(r2=0.994);平均相对回收率为90%~107%,日内变异系数2.37%~8.72%;日间变异系数4.09%~6.80%,具有特异性好、灵敏度高、准确性和重现性良好、操作简单等优点,能满足鸡盲肠中沙咪珠利的检测需求。 展开更多
关键词 抗球虫药 沙咪珠利 高效液相色谱 鸡盲肠
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