-
题名辣椒CaFD1基因克隆、表达特征及功能验证
- 1
-
-
作者
彭绍智
王登科
张祥
戴雄泽
徐昊
邹学校
-
机构
湖南农业大学园艺作物种质创新与分子育种教育部国际合作联合实验室
-
出处
《生物技术通报》
北大核心
2025年第5期153-164,共12页
-
基金
国家自然科学基金项目(32372735)。
-
文摘
【目的】探究CaFD1调控辣椒开花时间的分子机制,以及其在应对非生物胁迫反应中的作用,为辣椒的分子育种提供可用的基因资源。【方法】利用RT-PCR技术,从一年生辣椒(CapsicumannuumL.)‘遵辣1号’茎器官的cDNA中克隆出AtFD同源基因CaFD1。借助生物信息学手段,对该基因的理化性质、蛋白结构以及系统进化关系展开分析。利用RT-qPCR技术研究基因在辣椒不同组织以及不同胁迫处理下的表达特征。构建基因沉默载体TRV-CaFD1、过表达载体TRV-CaFD1-OE和亚细胞定位35S∶CaFD1载体,再通过农杆菌侵染法分别转化辣椒和烟草。【结果】CaFD1的ORF长度为711bp,所含氨基酸数量达236个,预估的分子量约为22.34 kD,理论上的等电点值为7.71。该蛋白属于亲水性蛋白,脂肪族氨基酸指数为70.85,热稳定性较高。CaFD1蛋白中包含2个保守结构域,碱性氨基酸区域N-x9-R和亮氨酸拉链区x6-L-x6-L-x6-L。其二级结构以无规则卷曲为主要特征,还包含少量的α-螺旋。启动子预测分析表明,CaFD1启动子上存在多种激素和胁迫相关的顺式作用元件。RT-qPCR证实CaFD1主要在茎中表达,其次是花,在根中几乎不表达。亚细胞定位实验说明CaFD1蛋白定位在细胞核中。在病毒诱导的基因沉默植株中,沉默CaFD1基因植株出现现蕾天数和开花天数延长的表型,而过表达植株的表型则得到互补。【结论】CaFD1在茎中优势表达,能够促进植物开花,并且对干旱、高盐、ABA与弱光胁迫做出响应。
-
关键词
辣椒
CaFD1
开花时间调控
基因表达
功能验证
非生物胁迫
-
Keywords
pepper
CaFD1
flowering time regulation
gene expression
functional verification
abiotic stress
-
分类号
S641.3
[农业科学—蔬菜学]
-
