亚麻木质素合成途径中关键酶基因片段的克隆与序列分析 被引量：6

1

作者 高原 陈信波 +3 位作者 龙松华 邓欣 邹杰 刘爱玲 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期337-340,共4页

亚麻是一种重要的韧皮纤维作物,木质素对亚麻纤维的性能和品质具有较大影响。以亚麻(Linum usitatis simum L.)茎秆表皮细胞的mRNA为模板,利用木质素合成途径中关键酶基因的同源基因保守序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增,电泳获得13个... 亚麻是一种重要的韧皮纤维作物,木质素对亚麻纤维的性能和品质具有较大影响。以亚麻(Linum usitatis simum L.)茎秆表皮细胞的mRNA为模板,利用木质素合成途径中关键酶基因的同源基因保守序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增,电泳获得13个特异带。分别将这些DNA片段连接到T载体后转化大肠杆菌,从重组质粒转化菌分别挑取5～8个单菌落测定插入片段序列,得到关键酶基因新的片段序列8个。生物信息学分析结果表明,这些新片段分别属于3个基因家族。其中,2个CCoAOMT基因片段(GenBank登录号为EF214740,EF214741),3个4CL基因片段(GenBank登录号为EF214737,EF214738,EF214739),3个F5H基因片段(GenBank登录号为EF214745,EF214746,EF214747),推测亚麻中这几个木质素代谢关键调控酶基因存在多基因家族。新获得的基因片段序列为进一步克隆全序列和了解调控亚麻木质素的生物合成奠定了基础。 展开更多

关键词 亚麻(Linum usitatissimumL.) CCoAOMT基因 4CL基因 F5H基因 序列分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

甘蓝型油菜Fad2与Fae1基因双干扰RNAi载体的构建 被引量：4

2

作者 彭琦 张源 +5 位作者 双桑 魏然 伍林涛 丁昕 阮颖 刘春林 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第5期163-166,共4页

将来源于甘蓝型油菜XY15的Fad2与Fae1基因编码区,长度分别为349bp和426bp的两个保守序列片段连接成807bp的大片段。然后分别以正反向插入到pFGC5941干扰载体查耳酮合成酶内含子的两端,构建成RNAi载体。以期在菜籽中转录后能有效抑制Fad2... 将来源于甘蓝型油菜XY15的Fad2与Fae1基因编码区,长度分别为349bp和426bp的两个保守序列片段连接成807bp的大片段。然后分别以正反向插入到pFGC5941干扰载体查耳酮合成酶内含子的两端,构建成RNAi载体。以期在菜籽中转录后能有效抑制Fad2与Fae1两个基因的表达。所构建的RNAi载体最终序列全长3kb,经限制性内切酶消化、PCR扩增验证和序列测定,证明目标序列与GenBank数据库中的碱基序列一致,并且为正反向插入到pFGC5941载体上。通过农杆菌介导的油菜转化,已获得油菜抗性再生植株144个。 展开更多

关键词 油菜 油酸脱氢酶 脂肪酸延长酶 RNAI

在线阅读 下载PDF 职称材料

拟南芥保卫细胞中特异性表达基因启动子片段基序分析 被引量：3

3

作者 邓荟芬 刘春林 +2 位作者 李进 范亚丽 阮颖 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第3期145-148,151,共5页

将16个在拟南芥保卫细胞中进行特异性表达和8个非特异表达基因的转录起始密码子ATG上游-500bp的启动子序列在PLACE上进行分析,认为AAAAG基序和TAAAG基序控制某些基因在保卫细胞中进行特异性表达,但分析结果显示有的保卫细胞特异表达启... 将16个在拟南芥保卫细胞中进行特异性表达和8个非特异表达基因的转录起始密码子ATG上游-500bp的启动子序列在PLACE上进行分析,认为AAAAG基序和TAAAG基序控制某些基因在保卫细胞中进行特异性表达,但分析结果显示有的保卫细胞特异表达启动子的序列中却不含有这两个基序,说明还要其它类型的未知基序控制着保卫细胞中的特异表达,这一理论分析为进一步的实验研究提供了理论依据。 展开更多

关键词 保卫细胞 启动子 特异 基序

在线阅读 下载PDF 职称材料

转基因油菜研究进展 被引量：16

4

作者 孙万仓 《西北农业学报》 CSCD 2000年第3期117-121,共5页

转基因油菜是近年来转基因研究最为活跃的作物之一 ,而且取得了重要进展 ,本文就其进展情况进行了概述 ,并着重对转基因油菜在杂种优势利用 ,品质改良 ,抗除草剂 。

关键词 油菜 转基因技术 研究进展

在线阅读 下载PDF 职称材料

甘蓝型油菜LPAT4基因克隆及其生物信息学分析 被引量：2

5

作者 肖旦望 刘聪 +3 位作者 胡学芳 邬克彬 官春云 熊兴华 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第3期52-58,共7页

为进一步研究油菜LPAT4基因,通过检索与拟南芥LPAT4序列相似度较高的油菜EST序列,拼接后与白菜和甘蓝的LPAT4序列进行同源比对,设计一对引物,从甘蓝型油菜湘油15中扩增全长LPAT4 CDs序列。共获得2条CDs序列,它们的长度分别为1 143,1 140... 为进一步研究油菜LPAT4基因,通过检索与拟南芥LPAT4序列相似度较高的油菜EST序列,拼接后与白菜和甘蓝的LPAT4序列进行同源比对,设计一对引物,从甘蓝型油菜湘油15中扩增全长LPAT4 CDs序列。共获得2条CDs序列,它们的长度分别为1 143,1 140 bp,分别命名为BnLPAT4-1和BnLPAT4-2。BnLPAT4-1编码380个氨基酸,所得蛋白质的相对分子质量和等电点分别为43.29 kDa和8.74;BnLPAT4-2编码379个氨基酸,所得蛋白质的相对分子质量和等电点分别为43.16 kDa和8.93。他们均具有LPLAT_LCLAT1样结构域,同属于LPLAT超基因家族。比较所用油菜序列SNP分析显示,LPAT4共存在41个多态性位点,其中单变异位点7个,简约信息位点34个。这41个多态性位点中,引起同义变异的位点为23个,引起取代变异的位点18个,共导致16个氨基酸发生改变。分析表明,BnLPAT4-1和BnLPAT4-2为甘蓝型油菜湘油15号LPAT4基因的2个拷贝,从序列组成、理化性质、保守结构域以及同源建模4个方面来看,它们均具备LPLAT超基因家族的特征,为该基因家族的2个成员。 展开更多

关键词 LPAT4 甘蓝型油菜 同源建模分析 保守结构域 SNP

在线阅读 下载PDF 职称材料

亚麻遗传多样性的RAPD分析 被引量：6

6

作者 何东锋 陈信波 +4 位作者 邓欣 龙松华 高原 王进 王玉富 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第5期126-129,144,共5页

从600个随机引物筛选出28个扩增稳定性较好的引物,对18份来自不同国家和地区的亚麻资源遗传多态性进行RAPD分析。结果表明:共扩增出条带529,其中多态性条带201,总的多态性百分率(PPB)为38.0%。用NTSYSpc(2.10)软件进行UPGMA聚类分析,18... 从600个随机引物筛选出28个扩增稳定性较好的引物,对18份来自不同国家和地区的亚麻资源遗传多态性进行RAPD分析。结果表明:共扩增出条带529,其中多态性条带201,总的多态性百分率(PPB)为38.0%。用NTSYSpc(2.10)软件进行UPGMA聚类分析,18个亚麻品种遗传距离为0.0469～0.1332之间,可分3大类,其中红木5号与匈牙利5号亲缘关系最近,ABYSSINIA(BROWN)和匈牙利5号遗传距离相差最显著,达到0.1332。 展开更多

关键词 RAPD分析 亚麻 亲缘关系 遗传距离

在线阅读 下载PDF 职称材料

油菜分子标记研究进展 被引量：8

7

作者 刘忠松 官春云 +1 位作者 孟金陵 危文亮 《生物技术通报》 CAS CSCD 1997年第5期14-16,共3页

以DNA为基础的分子标记具有数量多、中性的特点,因此自分子标记方法发明以来,已迅速应用到许多生物学研究之中。就油菜而言,RFLP,RAPD,SSR和AFLP已先后用于亲缘关系和遗传距离分析、品种鉴别、遗传图谱构建和基因定位等方面。

关键词 油菜 分子标记 研究进展

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同浓度激素对野生细叶结缕草愈伤组织的诱导与分化的影响 被引量：4

8

作者 张瑜 杨知建 +1 位作者 张志扬 张志飞 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第2期143-146,共4页

以野生的细叶结缕草的匍匐茎为外植体,MS为基本培养基,研究2,4-D和BA及2,4-D和IAA不同浓度组合对其愈伤组织诱导与分化的影响。研究表明:(1)5.0mg/L的2,4-D对愈伤组织诱导有很大的促进作用;(2)匍匐茎诱导愈伤组织宜采用MS+2.0mg/L 2,4-D... 以野生的细叶结缕草的匍匐茎为外植体,MS为基本培养基,研究2,4-D和BA及2,4-D和IAA不同浓度组合对其愈伤组织诱导与分化的影响。研究表明:(1)5.0mg/L的2,4-D对愈伤组织诱导有很大的促进作用;(2)匍匐茎诱导愈伤组织宜采用MS+2.0mg/L 2,4-D+4.0mg/L IAA,产生的愈伤组织分化情况也较好。 展开更多

关键词 野生 细叶结缕草 组织培养 愈伤组织 分化

在线阅读 下载PDF 职称材料

RNA干扰载体构建方法的研究进展 被引量：11

9

作者 粟挺 刘爱玲 陈信波 《湖南农业科学》 2011年第10期1-4,共4页

RNA干扰是通过外源或内源的双链RNA在细胞内诱导同源序列的基因表达沉默的现象。目前RNA干扰技术不但被广泛地应用于各种基因的功能研究,而且在农作物抗逆品种的选育方面起重要的作用。RNA干扰技术的关键是构建能在受体中稳定表达的干... RNA干扰是通过外源或内源的双链RNA在细胞内诱导同源序列的基因表达沉默的现象。目前RNA干扰技术不但被广泛地应用于各种基因的功能研究,而且在农作物抗逆品种的选育方面起重要的作用。RNA干扰技术的关键是构建能在受体中稳定表达的干扰载体。阐述了近几年发展起来的3种简单、快捷、稳定的构建RNA干扰载体的方法。 展开更多

关键词 RNA干扰 载体构建 基因 综述

在线阅读 下载PDF 职称材料

亚麻分子标记应用研究进展 被引量：5

10

作者 何东锋 陈信波 +2 位作者 高国赋 王进 王玉富 《湖南农业科学》 2009年第5期21-23,共3页

分子标记是继形态学标记、细胞学标记和生化标记之后迅速发展起来的一种新标记。分子标记技术应用于亚麻的研究,对亚麻亲缘关系与遗传多样性、及遗传图谱构建及资源保护利用等提供了极大的便利。主要叙述了亚麻遗传多态性及亲缘关系、... 分子标记是继形态学标记、细胞学标记和生化标记之后迅速发展起来的一种新标记。分子标记技术应用于亚麻的研究,对亚麻亲缘关系与遗传多样性、及遗传图谱构建及资源保护利用等提供了极大的便利。主要叙述了亚麻遗传多态性及亲缘关系、系普分析、种质鉴定、基因定位、遗传图谱构建和分子标记辅助选择育种等的研究进展,探讨了分子标记在亚麻研究中尚需解决的问题。 展开更多

关键词 亚麻 分子标记 研究进展

在线阅读 下载PDF 职称材料

用于PCR分析的芥菜型油菜总DNA的快速提取 被引量：3

11

作者 严明理 刘忠松 +1 位作者 官春云 刘丽莉 《现代农业科技》 2008年第16期172-173,共2页

通过对所提DNA质量、效率和PCR检测,建立和优化了可用于PCR分析的芥菜型油菜总DNA的提取方法,这一方法快速,所提的DNA质量好,可在芥菜型油菜生长发育早期进行。

关键词 芥菜型油菜 快速提取DNA PCR分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

亚麻RAPD反应体系的优化和品种间多态性标记的筛选 被引量：2

12

作者 梁毅莉 陈信波 陈婕妤 《湖南农业科学》 2009年第2期7-10,14,共5页

用600个随机引物对白花和山西大同两个亚麻品种进行RAPD分析,筛选出31条两品种间具多态性的RAPD特异引物,为利用以上两品种构建我国的亚麻遗传图谱奠定了基础。

关键词 亚麻 DNA分子标记 RAPD

在线阅读 下载PDF 职称材料

光叶楮试管苗生根技术

13

作者 时群 韦大器 +1 位作者 何贵整 陈乃明 《林业科技开发》 2010年第2期113-114,共2页

以光叶楮无根试管苗为材料,进行瓶外和瓶内生根试验。结果表明:随着继代次数的增加,瓶内生根率不断提高。在生根培养基1/2MS+ABT 0.7 mg/L+IBA 0.3 mg/L上,生根率达98.2%;瓶外生根以无根苗基部速蘸500 mg/L的IBA溶液30 s生根效果较好,... 以光叶楮无根试管苗为材料,进行瓶外和瓶内生根试验。结果表明:随着继代次数的增加,瓶内生根率不断提高。在生根培养基1/2MS+ABT 0.7 mg/L+IBA 0.3 mg/L上,生根率达98.2%;瓶外生根以无根苗基部速蘸500 mg/L的IBA溶液30 s生根效果较好,生根成活率可达88.9%,试管苗的质量及移栽环境均能影响试管苗的瓶外生根效果。 展开更多

关键词 光叶楮 瓶内生根 瓶外生根

在线阅读 下载PDF 职称材料