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基因工程技术在花卉中的应用 被引量:3
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作者 向建华 陈信波 周小云 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第1期84-88,共5页
近年来花卉产业得到了蓬勃发展,不断成熟的基因工程技术为花卉的品质改良提供了新的思路,也为花卉产业化发展带来了新的机遇。本文综述了影响植物花色、花型、花期等相关基因及转基因的研究,展望了基因工程技术在花卉育种和产业化应用... 近年来花卉产业得到了蓬勃发展,不断成熟的基因工程技术为花卉的品质改良提供了新的思路,也为花卉产业化发展带来了新的机遇。本文综述了影响植物花色、花型、花期等相关基因及转基因的研究,展望了基因工程技术在花卉育种和产业化应用的发展前景。 展开更多
关键词 基因工程 基因克隆 花卉 产业化
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转基因抗虫油菜中Bt杀虫蛋白基因稳定遗传和高效表达及抗虫性研究 被引量:20
2
作者 林良斌 官春云 +2 位作者 周小云 何业华 杨志新 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期175-178,共4页
通过对转 Bt杀虫蛋白基因油菜植株的后代进行卡那霉素抗性分析和 PCR技术检测 ,结果表明 :Bt杀虫蛋白基因是以单拷贝、杂合地整合到转基因植株 (T0 1、T0 2、T0 3、T0 5、T0 6、T0 7、T0 8)的基因组中 ,并稳定地遗传。EL ISA检测表明 :... 通过对转 Bt杀虫蛋白基因油菜植株的后代进行卡那霉素抗性分析和 PCR技术检测 ,结果表明 :Bt杀虫蛋白基因是以单拷贝、杂合地整合到转基因植株 (T0 1、T0 2、T0 3、T0 5、T0 6、T0 7、T0 8)的基因组中 ,并稳定地遗传。EL ISA检测表明 :在第 3~第 9叶期 Bt杀虫蛋白基因在转基因油菜植株中高效地表达 ,Bt杀虫蛋白的表达量为 170~ 2 6 0 ng/ 2 5mg鲜叶 ,占植物可溶性蛋白的 0 .0 6 7%~ 0 .10 5 % ,其抗虫效果高达 72 .0 %~ 94 .4 %。但从第 11叶期后 Bt杀虫蛋白表达量显著地降低 ,只有 7~ 5 0 ng/ 2 5 mg鲜叶 ,占植物可溶性蛋白的 0 .0 0 3%~ 0 .0 2 %。 展开更多
关键词 转基因油菜 Bt杀虫蛋白基因 抗虫性 遗传转化 卡那霉素 PCR技术
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植物GPATs基因研究进展 被引量:17
3
作者 刘聪 肖旦望 +4 位作者 施春霖 胡学芳 邬克彬 官春云 熊兴华 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1352-1359,共8页
甘油-3-磷酸酰基转移酶(Glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT)是三酰甘油(Triacylglycerol,TAG)生物合成的限速酶,催化TAG生物合成的起始步骤。GPATs主要负责将脂肪酰基从酰基-酰基载体蛋白(acyl-ACP)或酰基辅酶A(acyl-CoA)上转... 甘油-3-磷酸酰基转移酶(Glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT)是三酰甘油(Triacylglycerol,TAG)生物合成的限速酶,催化TAG生物合成的起始步骤。GPATs主要负责将脂肪酰基从酰基-酰基载体蛋白(acyl-ACP)或酰基辅酶A(acyl-CoA)上转移到甘油-3-磷酸的(Glycerol-3-phosphate,G3P)sn-1位置上。有些成员还具有sn-2酰基转移活性。目前已经在多种植物中克隆得到了GPAT基因。这些GPAT基因编码的酶主要分为三类,它们在细胞中分别定位于质体、线粒体和内质网上。这些酶参与三酰甘油、几丁质和软木脂等多种脂质的生物合成,在植物的生长发育中发挥着非常重要的作用。文章介绍了植物GPAT基因的染色体定位和基因结构以及GPAT酶的亚细胞定位、sn-2酰基转移特异性、GPAT酶的底物选择性及其生理功能的最新研究进展。 展开更多
关键词 GPAT基因 底物选择性 sn-2特异性 GPAT功能
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甘蓝型油菜fad2基因片段的克隆和反义表达载体的构建 被引量:14
4
作者 熊兴华 官春云 +3 位作者 李栒 王学军 周小云 李家洋 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期1-4,共4页
从甘蓝型油菜湘油 15号基因组中分离总DNA ,以此为模板进行多聚酶链式反应 (PCR)。PCR产物与克隆载体 pGEM -TEasy连接 ,经NotI酶切后插入 pBluescriptIISK +。序列测定表明 ,PCR产物为 6 5 4bp的DNA片段 ,fad2基因片段只朝 pBluescript... 从甘蓝型油菜湘油 15号基因组中分离总DNA ,以此为模板进行多聚酶链式反应 (PCR)。PCR产物与克隆载体 pGEM -TEasy连接 ,经NotI酶切后插入 pBluescriptIISK +。序列测定表明 ,PCR产物为 6 5 4bp的DNA片段 ,fad2基因片段只朝 pBluescriptIISK +的T3-T7方向插入 ,经BamHI和SacI酶切后插入表达载体质粒pBI12 1相同的酶切位点 ,构建反义 fad2表达载体。 展开更多
关键词 FAD2基因 反义表达载体 甘蓝型油菜 PCR 基因克隆
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亚麻4CL基因克隆及RNAi遗传转化 被引量:9
5
作者 龙松华 李翔 +6 位作者 陈信波 乔瑞清 邓欣 邱财生 郭媛 郝冬梅 王玉富 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2405-2411,共7页
该实验以前期克隆的亚麻4CL基因片段为靶序列,利用RACE方法克隆其全长cDNA序列(1 957bp),GenBank登录号为KC832864,该序列含有1 650bp完整的开放阅读框。系统进化树分析表明,亚麻4CL基因与盐芥4CL基因亲缘关系较近,而与禾本科的水稻(Ory... 该实验以前期克隆的亚麻4CL基因片段为靶序列,利用RACE方法克隆其全长cDNA序列(1 957bp),GenBank登录号为KC832864,该序列含有1 650bp完整的开放阅读框。系统进化树分析表明,亚麻4CL基因与盐芥4CL基因亲缘关系较近,而与禾本科的水稻(Oryza sativa)等亲缘关系最远。其编码蛋白预测分析结果显示,亚麻4CL基因由549个氨基酸组成,相对分子量为60kD,等电点为5.3,蛋白质二级结构以无规则卷曲比例最多,其次是α-螺旋。以亚麻4CL基因编码区413bp靶标序列作为干扰区段,扩增其正反向基因片段,构建植物干扰表达载体p1301M-4CL。通过农杆菌介导转入亚麻,DNA及RNA水平上分子检测发现,RNAi结构已经转入亚麻中,并显著降低了其4CL基因的表达量。 展开更多
关键词 亚麻 木质素 4CL基因 序列分析 RNAI载体 遗传转化
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甘蓝型油菜2个GPAT6同源基因的克隆与表达分析 被引量:7
6
作者 刘聪 肖旦望 +3 位作者 胡学芳 邬克彬 官春云 熊兴华 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1304-1310,共7页
甘油-3-磷酸酰基转移酶(sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT)是三酰甘油生物合成的关键酶,催化三酰甘油合成的起始步骤,在植物中参与调节生长发育、脂质的合成和逆境应答等过程。本试验通过RT-PCR从甘蓝型油菜品种湘油15中... 甘油-3-磷酸酰基转移酶(sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase,GPAT)是三酰甘油生物合成的关键酶,催化三酰甘油合成的起始步骤,在植物中参与调节生长发育、脂质的合成和逆境应答等过程。本试验通过RT-PCR从甘蓝型油菜品种湘油15中克隆得到GPAT6基因的2个拷贝,分别命名为BnGPAT6-1(GenBank登录号为KJ000117)和BnGPAT6-2(KC106728)。它们的编码区序列(coding DNA sequence,CDS)均为1506 bp,编码501个氨基酸。预测其蛋白结构N端含有一个类卤酸脱卤酶(haloacid dehalogenase-like hydrolase,HAD-like)活性结构域,C端含有一个溶血磷脂酰基转移酶(lysophospholipid acyltransferase,LPLAT)功能域。蛋白序列比对和进化树分析表明,甘蓝型油菜与白菜(B.rapa)、甘蓝(B.oleracea)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)和琴叶拟南芥(A.lyrata)中的GPAT6序列相似性最高。组织表达结果表明BnGPAT6基因在花中的表达量最高,在未成熟的胚中表达量呈先升高后降低的趋势。BnGPAT6的表达受ABA的抑制;在干旱和6-BA胁迫下几乎同时升高;在盐胁迫下,短时间内升高,达到峰值后降低;在水渍条件下没有明显变化。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 甘油-3-磷酸酰基转移酶 基因克隆 表达分析 逆境胁迫
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甘蓝型油菜油酸脱氢酶基因(fad2)多个拷贝的发现及分析 被引量:22
7
作者 肖钢 张宏军 +1 位作者 彭琪 官春云 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1563-1568,共6页
以甘蓝型油菜湘油15为材料,随机挑选56个来自基因组的fad2基因克隆、47个来自幼苗整株的fad2基因cDNA克隆和9个授粉27d后种子中fad2 cDNA克隆进行双向测序。基因组中56个fad2序列的碱基同源性为91.0%~99.9%,从中得到11个差异序列,即11... 以甘蓝型油菜湘油15为材料,随机挑选56个来自基因组的fad2基因克隆、47个来自幼苗整株的fad2基因cDNA克隆和9个授粉27d后种子中fad2 cDNA克隆进行双向测序。基因组中56个fad2序列的碱基同源性为91.0%~99.9%,从中得到11个差异序列,即11个不同的fad2基因拷贝。将其翻译成氨基酸序列发现,6个拷贝在编码区中出现多个终止密码子,另外5个的同源性为90.60%~99.74%,与47个来自幼苗整株的fad2基因cDNA序列进行比较,发现fad2基因没有内含子。从种子中的9个fad2 cDNA克隆序列中找到2个有差异的cDNA,它们的编码区中没有终止密码子,说明在种子中有多个fad2基因表达。基因组中的11个拷贝根据同源性可分成两组,命名为fad2I和fad2II。RT-PCR分析发现在授粉27d的种子中fad2I有较强表达,fad2II没有表达;但在叶片中两者都有表达。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 油酸脱氢酶基因 基因拷贝数 序列差异引物
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亚麻木质素合成关键酶基因表达分析 被引量:9
8
作者 王进 陈信波 +5 位作者 高原 张彦红 龙松华 邓欣 何东锋 王玉富 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1468-1473,共6页
以亚麻(Linum usitatissimum)栽培品种白花为材料,采用半定量RT-PCR方法对亚麻木质素合成关键酶基因CCoAOMT1、4CL1、4CL2、COMT、F5H1、F5H2和F5H3在不同组织及不同时期木质部、韧皮部的表达规律进行了研究。结果显示,除F5H1在根部未... 以亚麻(Linum usitatissimum)栽培品种白花为材料,采用半定量RT-PCR方法对亚麻木质素合成关键酶基因CCoAOMT1、4CL1、4CL2、COMT、F5H1、F5H2和F5H3在不同组织及不同时期木质部、韧皮部的表达规律进行了研究。结果显示,除F5H1在根部未表达外,其他基因在幼苗、根、花期木质部、花期韧皮部、叶、花和幼果中均有不同程度表达。CCoAOMT1在各部位都有较高的表达。2个4CL之间和3个F5H基因之间的部位表达的差异存在一定互补性。在韧皮部中,各基因均在幼嫩(30d)阶段表达量最低;除4CL2在花期(60d)达到表达高峰外,其他基因均在花后(70d)表达量最高;4CL1在各时期均有较强表达,而F5H3在各时期弱表达。在木质部中,除4CL1在各时期均表达弱和F5H1在花前期为表达高峰外,其余基因均在幼嫩阶段表达量最高;随后逐渐降低,在花期后表达量大幅降低;4CL1的表达量明显区别于其他基因,其各时期韧皮部的表达量明显高于木质部。 展开更多
关键词 亚麻 木质素 表达分析 半定量RT-PCR
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植物非生物逆境相关锌指蛋白基因的研究进展 被引量:24
9
作者 向建华 李灵之 陈信波 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期666-672,716,共8页
植物能够适应多种逆境主要是通过改变其基因表达和代谢途径来实现的,因此研究这些基因表达和功能对提高植物耐逆性具有重要意义。锌指蛋白是一类具有手指状结构域的转录因子,这种结构域由锌离子与多个半胱氨酸和(或)组氨酸组成,锌离子... 植物能够适应多种逆境主要是通过改变其基因表达和代谢途径来实现的,因此研究这些基因表达和功能对提高植物耐逆性具有重要意义。锌指蛋白是一类具有手指状结构域的转录因子,这种结构域由锌离子与多个半胱氨酸和(或)组氨酸组成,锌离子在稳定其结构和发挥调控功能方面具有关键作用。植物锌指蛋白在植物耐逆性方面具有重要作用。本文综述了近几年来从拟南芥(Arabidopsisthaliana)、水稻(Oryza sativa)、小麦(Triticum aestivum)、番茄(Solanum lycopersicum)等植物中克隆的与非生物逆境相关锌指蛋白基因的研究成果,重点阐述了其基因表达部位、受逆境诱导情况及转基因植株的耐逆性等。目前的研究结果表明锌指蛋白能够调控耐逆相关基因的表达,在植物逆境代谢中发挥重要作用,因此可以利用锌指蛋白基因进行作物耐逆性的遗传改良,提高作物的耐逆能力。 展开更多
关键词 逆境 锌指蛋白 基因 耐逆性
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由ACC合成酶反义基因转化所得枣树其RNA表达量的测定 被引量:7
10
作者 何业华 林顺权 +2 位作者 林良斌 熊兴华 今石浩正 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期112-114,共3页
利用real timeRT PCR对转基因枣树中的anti ACSG的RNA表达量进行了定量测定.样品扩增产物荧光量随着扩增循环数的增加而呈现"S"形增加;经熔解曲线分析,其扩增产物中未检出非特异性产物和引物二聚体;扩增产物的CT值和模板cDNA... 利用real timeRT PCR对转基因枣树中的anti ACSG的RNA表达量进行了定量测定.样品扩增产物荧光量随着扩增循环数的增加而呈现"S"形增加;经熔解曲线分析,其扩增产物中未检出非特异性产物和引物二聚体;扩增产物的CT值和模板cDNA起始浓度两者之间呈线性相关(R2=0.9929);转化体中anti ACSGRNA表达量约为4500~10300拷贝/g组织. 展开更多
关键词 REAL-TIMEPCR RT-PCR 反义-ACSG RNA 定量分析 枣树 ACC合成酶 反义基因
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OsWAX2基因的植物表达载体构建及遗传转化 被引量:4
11
作者 向建华 高国赋 +3 位作者 周小云 刘爱玲 邹杰 陈信波 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期639-645,共7页
利用拟南芥的WAX2基因序列,BLAST检索出3个水稻同源基因,分别命名为OsWAX2-1,OsWAX2-2,OsWAX2-3,与拟南芥WAX2基因的同源性分别为56.0%,55.2%,52.0%;其预测的编码蛋白与WAX2蛋白的同源性分别为61.5%,60.5%,64.7%.这3个蛋白都存在4个跨... 利用拟南芥的WAX2基因序列,BLAST检索出3个水稻同源基因,分别命名为OsWAX2-1,OsWAX2-2,OsWAX2-3,与拟南芥WAX2基因的同源性分别为56.0%,55.2%,52.0%;其预测的编码蛋白与WAX2蛋白的同源性分别为61.5%,60.5%,64.7%.这3个蛋白都存在4个跨膜结构和2个固醇去饱和酶的保守区,说明这3个蛋白质都属于跨膜蛋白,并可能与角质层的蜡质合成有关.从全长cDNA数据库检索获得了3个OsWAX2的全长cDNA.以pCAMBIA-1300-multi为载体,构建了CaMV35S启动子驱动的3个OsWAX2的过表达载体pOEOSW2-1,pOEOSW2-2,pOEOSW2-3及3个RNAi表达载体pCROSW2-1,pCROSW2-2,pCROSW2-3,并通过冻融法将6个表达载体转化到根癌农杆菌EHA105,LBA4404和GV3101中,采用农杆菌介导法进行水稻日本晴品种的遗传转化,得到了具有Hyg抗性的水稻转基因苗,PCR检测到阳性植株. 展开更多
关键词 水稻 OsWAX2基因 过表达 RNAI 遗传转化
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转基因抗虫油菜的ELISA分析 被引量:5
12
作者 林良斌 周小云 +1 位作者 官春云 王学军 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期179-181,共3页
为选育高效抗虫油菜新品种 ,采用酶联免疫吸附法检测 Bt杀虫蛋白基因在转基因油菜植株中的表达 .结果表明 ,Bt杀虫蛋白基因在转基因抗虫油菜植株的表达随植株生长时期不同而发生变化 .在第 3~ 9叶期 Bt杀虫蛋白基因稳定、高效地表达 ,B... 为选育高效抗虫油菜新品种 ,采用酶联免疫吸附法检测 Bt杀虫蛋白基因在转基因油菜植株中的表达 .结果表明 ,Bt杀虫蛋白基因在转基因抗虫油菜植株的表达随植株生长时期不同而发生变化 .在第 3~ 9叶期 Bt杀虫蛋白基因稳定、高效地表达 ,Bt杀虫蛋白的表达量为 6 .6 8~ 10 .5 2 ng/ m g(以鲜叶计 ) ,占植物可溶性蛋白的0 .0 6 7%~ 0 .10 5 % .但从第 11叶期后 Bt杀虫蛋白表达量显著地降低 ,只有 0 .2 8~ 2 .0 0 ng/ mg,占植物可溶性蛋白的 0 .0 0 3%~ 0 .0 2 0 % 展开更多
关键词 转基因油菜 Bt杀虫蛋白基因 酶联免疫吸附法 ELISA 基因表达
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用磁珠富集法分离亚麻基因组微卫星分子标记 被引量:16
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作者 邓欣 陈信波 +5 位作者 龙松华 王孝纯 高原 何东锋 王进 王玉富 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2099-2105,共7页
应用Dynal磁珠-生物素标记的微卫星探针(CT)15与亚麻基因组DNA酶切片段杂交,捕获300~1500bp含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD18-T载体中,构建富集微卫星序列的小片段插入文库。利用接头引物和根据微卫星核心序列设计的引物VRV(CT)15... 应用Dynal磁珠-生物素标记的微卫星探针(CT)15与亚麻基因组DNA酶切片段杂交,捕获300~1500bp含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD18-T载体中,构建富集微卫星序列的小片段插入文库。利用接头引物和根据微卫星核心序列设计的引物VRV(CT)15使用PCR方法直接对文库筛选,从422个转化子中获得了104个阳性克隆,对其进行测序分析,获得了97个微卫星序列,微卫星序列的富集效率达到22.99%,PCR扩增筛选效率93.27%。对97个微卫星序列进行比对分析,其中51个重复序列的两端序列高度相似,据其设计的特异引物对阳性克隆进行2次筛选,能淘汰相似度高的同类序列,提高筛选亚麻微卫星标记的效率。 展开更多
关键词 亚麻 微卫星 磁珠富集
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Bt杀虫蛋白基因在转基因油菜中的动态表达与其抗虫性研究 被引量:9
14
作者 林良斌 官春云 +2 位作者 杨焕文 李永忠 杨志新 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第2期100-103,107,共5页
采用ELISA方法检测Bt杀虫基因在转基因油菜植株中的表达。试验结果表明 :在第 3至第 9叶期Bt杀虫蛋白基因在转基因油菜植株中稳定、高效地表达 ,Bt杀虫蛋白的表达量为 170ng/ 2 5mg~ 2 6 0ng/ 2 5mg鲜叶 ,占植物可溶性蛋白的 0 .0 6 7%... 采用ELISA方法检测Bt杀虫基因在转基因油菜植株中的表达。试验结果表明 :在第 3至第 9叶期Bt杀虫蛋白基因在转基因油菜植株中稳定、高效地表达 ,Bt杀虫蛋白的表达量为 170ng/ 2 5mg~ 2 6 0ng/ 2 5mg鲜叶 ,占植物可溶性蛋白的 0 .0 6 7%~ 0 .10 5 % ,其抗虫效果高达 42 .5 %~ 80 .0 %。但从第 11叶期后Bt杀虫蛋白表达量显著地降低 ,只有 7ng/ 2 5mg~ 5 0ng/ 2 5mg鲜叶 ,占植物可溶性蛋白的 0 .0 0 3%~ 0 .0 2 %。 展开更多
关键词 转基因油菜 BT杀虫蛋白 基因表达 抗虫性
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3个水稻WAX2同源基因表达的组织特异性及逆境响应特征 被引量:3
15
作者 高国赋 邹杰 +3 位作者 周小云 刘爱玲 魏宝阳 陈信波 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1336-1341,共6页
利用拟南芥的WAX2基因序列BLAST检索出3个水稻同源基因,命名为OsWAX2-1、OsWAX2-2和OsWAX2-3,与拟南芥WAX2基因的同源性分别为56.0%、55.2%和52.0%;其预测的编码蛋白与WAX2蛋白的同源性分别为61.5%、60.5%和64.7%。这3个蛋白都分别存在... 利用拟南芥的WAX2基因序列BLAST检索出3个水稻同源基因,命名为OsWAX2-1、OsWAX2-2和OsWAX2-3,与拟南芥WAX2基因的同源性分别为56.0%、55.2%和52.0%;其预测的编码蛋白与WAX2蛋白的同源性分别为61.5%、60.5%和64.7%。这3个蛋白都分别存在4个跨膜结构区和1个甾醇去饱和酶的保守区,说明它们都属于跨膜蛋白并可能与角质层的蜡质合成有关。采用半定量RT-PCR方法检测3个OsWAX2基因在水稻不同部位的表达情况,及高温、低温、NaCl、PEG和ABA5种处理对3个OsWAX2基因在转录水平表达的影响。结果表明,3个OsWAX2基因在水稻中的表达存在时空差异,3个基因在水稻萌动的胚中表达量都很高,OsWAX2-3基因在叶中的表达量最高;3个OsWAX2基因对高温、低温、盐、干旱及ABA胁迫响应也存在差别,OsWAX2-1只在ABA处理时增强表达;OsWAX2-2受高温、低温、盐、干旱胁迫及ABA诱导并且响应迅速。这一结果为进一步研究OsWAX2基因在水稻生长发育过程及逆境胁迫下的功能与作用机制提供了参考。 展开更多
关键词 水稻 WAX2同源基因 半定量RT-PCR 表达 逆境响应
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RACE法克隆亚麻COMT基因及生物信息学分析 被引量:3
16
作者 龙松华 乔瑞清 +5 位作者 陈信波 邱财生 邓欣 郭媛 郝冬梅 王玉富 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期78-83,共6页
利用RACE技术克隆得到亚麻木质素合成关键酶基因COMT基因的cDNA全长序列,该基因cDNA全长1 726 bp(GenBank登录号为KC832865)。含有1 104 bp完整的开放阅读框,5'非编码区长423 bp,3'非编码区长199 bp。对序列进行生物信息学分析... 利用RACE技术克隆得到亚麻木质素合成关键酶基因COMT基因的cDNA全长序列,该基因cDNA全长1 726 bp(GenBank登录号为KC832865)。含有1 104 bp完整的开放阅读框,5'非编码区长423 bp,3'非编码区长199 bp。对序列进行生物信息学分析的结果 :编码的蛋白由367个氨基酸组成(其中亮氨酸38个,丙氨酸32个和丝氨酸28个),相对分子量为40 kD,等电点pI为5.7;蛋白质二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主;构建系统进化树表明与赤桉(Eucalyptus camaldulensis)亲缘关系最近。 展开更多
关键词 亚麻 木质素 COMT基因 RACE 生物信息学分析
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基因枪转化甘蓝型油菜小孢子体系的建立 被引量:5
17
作者 林良斌 熊兴华 +3 位作者 祁永琼 董娜 马占强 肖关丽 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第1期5-8,28,共5页
以甘蓝型油菜花油3号、湘油15号为材料,优化了甘蓝型油菜小孢子再生胚状体的条件,建立起甘蓝型油菜小 孢子的高效再生体系。在主花序第1朵花开后第4 d从主花序上取4.0-4.5 mm花蕾,每mL NLN培养基接种1个花 蕾的小孢子,在32℃起始热激培... 以甘蓝型油菜花油3号、湘油15号为材料,优化了甘蓝型油菜小孢子再生胚状体的条件,建立起甘蓝型油菜小 孢子的高效再生体系。在主花序第1朵花开后第4 d从主花序上取4.0-4.5 mm花蕾,每mL NLN培养基接种1个花 蕾的小孢子,在32℃起始热激培养36 h,胚状体产生频率最高,花油3号达24.80个胚状体/花蕾,湘油15号达16.50 个胚状体/花蕾。用基因枪转化甘蓝型油菜花油3号和湘油15号的小孢子,PCR-Southem检测证明获得了转基因植 株。在小孢子培养前进行基因枪轰击及在胚状体诱导培养时进行筛选,转化频率较高,花油3号可达2.1株转基因植 株/花蕾,湘油15号可达1.2株转基因植株/花蕾。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 小孢子 遗传转化 基因枪
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RNAi技术及在植物功能基因组研究中的应用 被引量:4
18
作者 周小云 陈信波 向建华 《生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期38-40,9,共4页
RNAi,即RNA干扰,是通过外源或内源性的双链RNA在细胞内诱导同源序列的基因表达受抑的现象,自RNAi现象在上世纪90年代中期被发现以来,它就被利用到基因组功能的分析研究之中,成为分子生物学研究的热点。本文简要阐述了RNAi的作用机制,并... RNAi,即RNA干扰,是通过外源或内源性的双链RNA在细胞内诱导同源序列的基因表达受抑的现象,自RNAi现象在上世纪90年代中期被发现以来,它就被利用到基因组功能的分析研究之中,成为分子生物学研究的热点。本文简要阐述了RNAi的作用机制,并通过将RNAi方法与其他功能基因组研究方法的对比,阐述了RNAi作为高通量植物功能基因组研究方法的优点,同时综述了利用RNAi技术在植物功能基因组研究中的应用进展。 展开更多
关键词 RNAI 高通量 植物功能基因组
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ACC合成酶基因技术在培育延熟保鲜果品上的应用 被引量:3
19
作者 何业华 官春云 +1 位作者 林良斌 熊兴华 《经济林研究》 2000年第4期26-28,共3页
关键词 ACC合成酶基因技术 果品 延熟保鲜 贮藏
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亚麻纤维素合成酶及其类蛋白基因部分序列的克隆 被引量:5
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作者 高原 陈信波 +4 位作者 龙松华 邓欣 周小云 王进 何东锋 《中国麻业科学》 2008年第6期293-297,310,共6页
分离和克隆了亚麻纤维素合成酶基因(CesA)及其类蛋白D基因家族(CSLD)的部分序列,并对其进行生物信息学分析。纤维素合成酶类蛋白(CSL)作为一种重要的膜蛋白与纤维素合成酶具有相似的蛋白结构,都含有D,D,D,QXXRW保守区。利用其它物种中C... 分离和克隆了亚麻纤维素合成酶基因(CesA)及其类蛋白D基因家族(CSLD)的部分序列,并对其进行生物信息学分析。纤维素合成酶类蛋白(CSL)作为一种重要的膜蛋白与纤维素合成酶具有相似的蛋白结构,都含有D,D,D,QXXRW保守区。利用其它物种中CesA基因的保守序列设计简并引物,采用RT-PCR方法扩增基因片段,经多次重复测序,获得了6个CesA基因片段和5个CSL基因片段。应用ClustalW和NCBI数据库对获得的基因片段进行序列分析,它们分别属于CesA基因家族和CSLD基因家族,6个CesA基因片段之间核酸和蛋白的相似性分别在67%~88%和71%~98%之间,5个CSLD基因片段之间核酸和蛋白的相似性分别在68%~83%和76%~94%之间。推测LusiCesA1与LusiCesA3,LusiCesA4与LusiCesA5及LusiCSLD1与LusiCSLD2的亲缘关系较近。 展开更多
关键词 亚麻(Linum usitatissimumL.) CesA基因 CSLD基因 序列分析
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