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超声心动图评估低氧性肺动脉高压小鼠模型右心室收缩压 被引量:1
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作者 周灵灵 王飞英 +6 位作者 易健 曹闲雅 谭骏岚 谢思琳 张超 宋岚 戴爱国 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2024年第6期825-831,共7页
目的以超声心动图监测单纯低氧及低氧联合血管内皮生长因子受体抑制剂SU5416诱导低氧性肺动脉高压(PH)小鼠模型心脏相关参数,据此建立预测右心室收缩压(RVSP)方程。方法将24只C57BL/6J雄性小鼠随机分为单纯低氧组(A组)、低氧联合SU5416... 目的以超声心动图监测单纯低氧及低氧联合血管内皮生长因子受体抑制剂SU5416诱导低氧性肺动脉高压(PH)小鼠模型心脏相关参数,据此建立预测右心室收缩压(RVSP)方程。方法将24只C57BL/6J雄性小鼠随机分为单纯低氧组(A组)、低氧联合SU5416组(B组)及对照组(C组),每组8只。对A、B组分别以单纯低氧法及低氧联合SU5416构建低氧性PH模型。于造模前及后(开始干预后2、3、4周)行超声心动图检查,获得相关参数;于末次超声检查后以心导管法测量RVSP。观察各组超声参数变化,以及造模后4周超声参数与RVSP的相关性,建立直线方程预测RVSP。结果开始干预后,随时间延长,A、B组肺动脉内径(PAD)、PAD/主动脉内径(AOD)及右心室前壁厚度(RVAWT)均增大,心率、肺动脉射血加速时间(PAAT)、PAAT/肺动脉射血时间(PAET)及三尖瓣环收缩期位移(TAPSE)均下降(P均<0.05)。开始干预后3、4周,B组PAET、PAAT/PAET、TAPSE均低于A组(P<0.05)。开始干预后4周,A、B组RVSP均与PAD/AOD、RVAWT、PAAT、PAAT/PAET及TAPSE呈高度相关(P均<0.05)。以PAAT/PAET、TAPSE预测单纯低氧PH小鼠模型RVSP的直线回归方程为RVSP=-161.7×(PAAT/PAET)+63.85、RVSP=-36.53×TAPSE+71.55,预测低氧联合SU5416 PH小鼠模型RVSP的直线回归方程为RVSP=-266.4×(PAAT/PAET)+91.59、RVSP=-69.14×TAPSE+116.5。结论开始干预后4周,以单纯低氧及低氧联合SU5416构建的PH小鼠表型更为明显;根据超声心动图所获PAAT/PAET及TAPSE构建的预测PH模型小鼠RVSP方程可为相关研究提供参考。 展开更多
关键词 高血压 肺性 超声心动描记术 小鼠
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结肠细胞Retnlb基因敲除小鼠的构建及初步表型分析
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作者 王飞英 周灵灵 +5 位作者 程贝贝 万佳婧 张超 易健 宋岚 戴爱国 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1788-1796,共9页
目的:基于CRISPR/Cas9技术构建Retnlb基因的floxp敲入小鼠Retnlbflox/+,进一步根据Cre-LoxP重组酶系统,构建肠道上皮Retnlb基因敲除小鼠(Retnlb-CKO),为后续探究Retnlb基因在炎性肠病中的发病机制提供动物模型。方法:选取8周龄基因型均... 目的:基于CRISPR/Cas9技术构建Retnlb基因的floxp敲入小鼠Retnlbflox/+,进一步根据Cre-LoxP重组酶系统,构建肠道上皮Retnlb基因敲除小鼠(Retnlb-CKO),为后续探究Retnlb基因在炎性肠病中的发病机制提供动物模型。方法:选取8周龄基因型均为Retnlbflox/+的雌、雄C57BL/6N小鼠合笼杂交,筛选出基因型为Retnlb^(flox/flox)的小鼠,将该基因型的小鼠与肠道上皮细胞特异性表达Cre重组酶(Vil1-Cre)工具鼠进行杂交繁育,筛选获得基因型为Retnlb^(flox/+,Cre+)小鼠;再将Retnlb^(flox/+,Cre+)小鼠与Retnlb^(flox/flox)小鼠杂交获得Retnlb^(flox/flox),Cre+目的小鼠(Retnlb-CKO)。选取8周龄Retnlb^(flox/flox),Cre+小鼠与同窝Retnlb^(flox/flox)小鼠各6只进行后续实验。采用RT-qPCR和免疫组化分别检测结肠上皮Retnlb mRNA和蛋白水平。观察每组小鼠的身长、体重、饮食和生殖能力等表型,计算其各组织重量与体重的比值以分析小鼠的生长发育情况。检测小鼠的肠道屏障完整性和结肠免疫炎症因子的表达情况。结果:通过基因鉴定、mRNA及蛋白水平证实肠道上皮细胞特异性条件敲除小鼠构建成功。与对照组小鼠相比,Retnlb-CKO小鼠的身长、体重、饮食和生殖能力均未发生明显的变化,心、肝、脾、肺、肾和结肠的重量与体重之比无差异,各组织无形态学差异。检测Retnlb-CKO小鼠结肠组织的紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin3的mRNA表达显著降低(P<0.01),PAS染色和免疫组化结果分别显示Retnlb-CKO小鼠结肠组织的杯状细胞数量和溶菌酶阳性细胞数量均显著减少(P<0.01)。HE染色观察Retnlb-CKO小鼠的结肠组织显示没有明显的炎症细胞浸润,RT-qPCR进一步显示结肠组织的促炎因子NLRP3、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达显著下调(P<0.01),同时,炎症信号通路蛋白TLR4、MyD88和NF-κB表达也显著下调(P<0.01)。结论:成功构建并验证了条件性结肠细胞Retnlb基因敲除小鼠模型。结肠细胞缺失Retnlb会导致肠道屏障受损,结肠组织促炎因子mRNA表达显著降低,炎症通路蛋白TLR4、MyD88和NF-κB的mRNA表达显著下调。 展开更多
关键词 炎性肠病 Retnlb基因 Cre-LoxP系统 条件性敲除 促炎因子
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抑制miR-155的表达对COPD患者气道平滑肌细胞增殖和迁移的影响 被引量:1
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作者 王伟 赵四林 +7 位作者 范伏元 金朝晖 李妲 符艳 孙爽 肖雪飞 张慧卿 胡立 《海南医学院学报》 CAS 2021年第10期763-767,共5页
目的:探讨抑制miR-155表达对慢性阻塞性肺病(COPD)患者气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和迁移的影响。方法:分离培养来自8例COPD患者(观察组)和3例无COPD病史肺部良性肿瘤患者(对照组)的ASMCs。将miR-155抑制表达质粒(anti-miR-155)和阴性对... 目的:探讨抑制miR-155表达对慢性阻塞性肺病(COPD)患者气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和迁移的影响。方法:分离培养来自8例COPD患者(观察组)和3例无COPD病史肺部良性肿瘤患者(对照组)的ASMCs。将miR-155抑制表达质粒(anti-miR-155)和阴性对照质粒(anti-miR-NC)转染至ASMCs,同时设置空白组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-155表达水平;流式细胞仪检测细胞周期;克隆形成实验检测细胞克隆形成数;Transwell检测细胞迁移和侵袭;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果:观察组ASMCs中miR-155表达水平明显高于对照组(P<0.05)。抑制miR-155表达组miR-155表达水平明显低于阴性对照组和空白组(P<0.05)。抑制miR-155表达组,G0-G1期细胞所占比例升高,S期细胞比例而降低,细胞克隆数及迁移、侵袭细胞数降低,TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05)。结论:抑制miR-155的表达可抑制COPD患者气道平滑肌细胞增殖、迁移,抑制促炎因子的释放。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺病 MIR-155 气道平滑肌细胞 增殖 迁移
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小陷胸汤对肺癌A549细胞生物学行为的影响 被引量:2
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作者 丁蓉珍 谢海平 +2 位作者 桑舒柳 毕凌 戴爱国 《海南医学院学报》 CAS 2023年第6期438-443,共6页
目的:探讨研究中药小陷胸汤对非小细胞肺癌A549细胞侵袭、增殖、凋亡等细胞生物学行为的影响。方法:对人肺腺癌A549细胞进行体外培养,采用CCK‑8实验筛选小陷胸汤给药的IC50浓度及有效时间,检测药物小陷胸汤对A549细胞增殖抑制作用;采用... 目的:探讨研究中药小陷胸汤对非小细胞肺癌A549细胞侵袭、增殖、凋亡等细胞生物学行为的影响。方法:对人肺腺癌A549细胞进行体外培养,采用CCK‑8实验筛选小陷胸汤给药的IC50浓度及有效时间,检测药物小陷胸汤对A549细胞增殖抑制作用;采用平板克隆实验检测小陷胸汤对A549细胞增殖能力的影响;采用Transwell小室实验检测小陷胸汤对A549细胞侵袭能力的影响;利用流式细胞术测定小陷胸汤对A549细胞凋亡的影响;运用Western blot实验检测凋亡相关蛋白;运用RT‑PCR实验进行转移相关蛋白mRNA检测。结果:与对照组比较,小陷胸汤明显抑制A549细胞的增殖(P<0.001)。与对照组比较,小陷胸汤明显抑制A549细胞克隆形成能力(P<0.001)。与对照组比较,小陷胸汤明显抑制A549细胞侵袭能力(P<0.001)。与对照组比较,小陷胸汤明显促进A549细胞凋亡(P<0.001)。与对照组比较,小陷胸汤明显上调A549细胞Bax和下调Bcl2表达(P<0.01)。与对照组比较,小陷胸汤明显下调MMP2和MMP9的mRNA表达(P<0.05)。结论:中药小陷胸汤在调控A549细胞生物学行为上具有明显的作用,能显著抑制肺癌A549细胞的增殖、集落形成和侵袭能力。 展开更多
关键词 小陷胸汤 肺癌 A549细胞 生物学行为
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