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桂花OfSAUR21基因的克隆及功能验证
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作者 郭罕年 熊欣 +2 位作者 胡飞杨 邹晶晶 蔡璇 《浙江农林大学学报》 北大核心 2025年第5期1059-1067,共9页
【目的】桂花Osmanthus fragrans花期短、花瓣易衰老褐化,制约了桂花经济价值的开发利用。探究桂花Of SAUR21基因对衰老的调控功能,可为桂花花瓣衰老调控的分子机制研究提供理论依据。【方法】以桂花‘柳叶金桂’O. fragrans‘Liuye Jin... 【目的】桂花Osmanthus fragrans花期短、花瓣易衰老褐化,制约了桂花经济价值的开发利用。探究桂花Of SAUR21基因对衰老的调控功能,可为桂花花瓣衰老调控的分子机制研究提供理论依据。【方法】以桂花‘柳叶金桂’O. fragrans‘Liuye Jingui’为材料进行OfSAUR21基因的克隆,利用生物信息学分析OfSAUR21蛋白的理化性质和系统进化关系,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析OfSAUR21基因在不同花期的表达模式,并通过瞬时转化桂花花瓣进行基因功能的鉴定。【结果】克隆得到1个长度为294 bp的OfSAUR21基因cDNA序列,可编码产生97个氨基酸,无信号肽与跨膜结构域,亚细胞定位预测在叶绿体,含有Auxin_inducible superfamily保守结构域。同源性比对及进化树分析发现:OfSAUR21基因与野生油橄榄Olea europaea var. sylvestris亲缘关系最近。RT-qPCR分析显示:Of SAUR21基因在花瓣衰老期表达最高。经RT-qPCR与乙烯分析发现:将OfSAUR21基因通过瞬时转化侵染到桂花花瓣中,花瓣的褐化率提高,乙烯的释放量增加。【结论】OfSAUR21基因包含完整的Auxin_inducible superfamily保守结构域,是生长素早期响应基因家族成员,在盛花末期表达量最高,对促进乙烯生成及调控桂花衰老具有正调节功能。 展开更多
关键词 桂花 SAUR基因 乙烯 基因克隆 功能验证
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基于全局精准非靶向代谢组检测技术分析南派和北派大清香型白酒非挥发性物质的差异
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作者 史玉敏 董孝元 +3 位作者 张仕伟 李俊薇 李良 陈洪国 《中南农业科技》 2023年第12期61-65,共5页
运用全局精准非靶向代谢组检测技术对比南派大清香型和北派大清香型白酒之间的非挥发性物质,并找出南派大清香型白酒中特有且显著的非挥发性物质。结果表明,南派大清香型白酒中非挥发性物质为82种,而南派大清香型白酒中特有且含量较多的... 运用全局精准非靶向代谢组检测技术对比南派大清香型和北派大清香型白酒之间的非挥发性物质,并找出南派大清香型白酒中特有且显著的非挥发性物质。结果表明,南派大清香型白酒中非挥发性物质为82种,而南派大清香型白酒中特有且含量较多的9种物质为氧戊二酸、(S)-2-丙基哌啶、鞘氨醇、羧甲司坦、高丝氨酸、半乳糖醇、四氢二膦酸盐、拉贝洛尔和吡咯烷酮羧酸,南派和北派大清香型白酒之间代谢通路差异性较大且南派比北派多的物质为琥珀酸、乙酰磷酸、5-氨基戊酸和L-脯氨酸。 展开更多
关键词 全局精准非靶向代谢组检测技术 南派大清香型白酒 北派大清香型白酒 非挥发性物质 富集代谢通路
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桂花OfACOs基因家族鉴定及表达分析 被引量:3
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作者 张耀 王家璇 +4 位作者 蔡璇 曾祥玲 杨洁 陈洪国 邹晶晶 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期492-501,共10页
【目的】对桂花Osmanthus fragrans乙烯合成路径氨基环丙烷羧酸氧化酶(1-aminocyclopropane-1-carbox-ylate oxidase, ACO)基因家族进行了全基因组鉴定及表达分析,以探索参与桂花花瓣乙烯合成的关键ACO家族成员。【方法】以桂花品种‘... 【目的】对桂花Osmanthus fragrans乙烯合成路径氨基环丙烷羧酸氧化酶(1-aminocyclopropane-1-carbox-ylate oxidase, ACO)基因家族进行了全基因组鉴定及表达分析,以探索参与桂花花瓣乙烯合成的关键ACO家族成员。【方法】以桂花品种‘柳叶金桂’O. fragrans‘Liuye Jingui’为参考基因组,对桂花OfACOs家族进行鉴定、进化分析、基因结构分析以及根、茎、叶、芽和不同开花阶段的表达模式分析。【结果】通过蛋白保守结构域(protein families,pfam)分析,从桂花基因组中共鉴定出了122个OfACOs成员,分布于22条染色体上;保守基序分析表明:大多数OfACOs基因同时包含Motif 1、 Motif 2、Motif 3、Motif 4和Motif 7这5个保守基序,它们共同组成OfACOs保守结构域;共线性分析结果表明:与拟南芥Arabidopsis thaliana基因为共线性对的基因可能具有相似的功能。结合swiss-prot同源序列对比分析,筛选出27个成员作为候选研究对象,进行不同组织部位根、茎、叶、芽和不同开花阶段的转录组测序分析,结果发现:12个成员在花瓣中显著表达,其中LYG006223、LYG007706、LYG007045、LYG035696等4个成员在开花后期极显著差异上调表达。进一步对该4个成员进行荧光定量PCR验证分析,结果与转录组测序结果一致。【结论】通过OfACOs基因家族的全基因组鉴定及基因克隆分析,筛选到在开花后期显著差异上调的4个ACO家族成员可能参与桂花花瓣衰老的调控。图6参34。 展开更多
关键词 桂花 OfACOs 乙烯 衰老 基因家族
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‘潢川金桂’花瓣衰老过程中细胞程序性死亡的生理机制 被引量:3
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作者 贺贝 蔡璇 +3 位作者 曾祥玲 王彩云 周媛 邹晶晶 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期475-480,共6页
【目的】探索了结实型桂花Osmanthus fragrans花瓣衰老过程中,生理生化变化,为提高桂花园林赏花价值与经济用花价值提供理论依据。【方法】以‘潢川金桂’O.fragrans‘Huangchuan Jingui’为材料,采用蛋白质印迹法测定细胞质中细胞色素... 【目的】探索了结实型桂花Osmanthus fragrans花瓣衰老过程中,生理生化变化,为提高桂花园林赏花价值与经济用花价值提供理论依据。【方法】以‘潢川金桂’O.fragrans‘Huangchuan Jingui’为材料,采用蛋白质印迹法测定细胞质中细胞色素c的释放,高效液相色谱法检测腺嘌呤核苷三磷酸(ATP),气相色谱法测定内源乙烯释放,流式细胞法检测核DNA变化,以及检测桂花开放及衰老过程中超氧自由基等生理指标变化。【结果】①桂花花瓣中超氧阴离子和过氧化氢质量摩尔浓度在初花期达到最高值,随后逐渐下降。②细胞色素c的含量在初花期开始积累至盛花期最高,在盛花末期开始减少至消失,而ATP质量分数一直呈下降趋势。③乙烯释放量从盛花末期开始逐渐上升至萎蔫期达到最大值,此时花瓣中的核物质也基本消失。④桂花花瓣中活性氧的激发、细胞色素c释放和ATP持续下降明显发生于初花期,为早期细胞程序性死亡(PCD)事件;乙烯跃变、DNA降解发生在盛花末期之后,为晚期PCD事件。【结论】线粒体功能活性下降可能是桂花花瓣早期PCD信号,内源乙烯跃变引起花瓣萎蔫失水和DNA降解可能是PCD执行的结果。图5参31。 展开更多
关键词 桂花 细胞程序性死亡 花瓣衰老 细胞色素C 腺嘌呤核苷三磷酸(ATP) 乙烯
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清香型白酒对小鼠酒精性组织病理损伤及肠道菌群的影响
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作者 董孝元 周磊 +3 位作者 史玉敏 李俊薇 李良 陈洪国 《中南农业科技》 2023年第12期66-72,共7页
为了研究清香型白酒对脏器功能和肠道菌群的影响,设计了不同饮酒剂量小鼠组,研究了清香型白酒对肝脏、肾脏和肠道菌群的影响。将70只C57BL/6J小鼠随机均分为生理盐水处理(对照)、食用酒精处理(低剂量LEA、中剂量CEA和高剂量HEA)、清香... 为了研究清香型白酒对脏器功能和肠道菌群的影响,设计了不同饮酒剂量小鼠组,研究了清香型白酒对肝脏、肾脏和肠道菌群的影响。将70只C57BL/6J小鼠随机均分为生理盐水处理(对照)、食用酒精处理(低剂量LEA、中剂量CEA和高剂量HEA)、清香型白酒处理(低剂量LOX、中剂量COX和高剂量HOX),分别灌胃生理盐水、52°食用酒精、52°清香型白酒。结果表明,与食用酒精相比,清香型白酒处理对小鼠肝肾胶原沉积和肝肾损害降低。对照Bacteroidia纲平均相对丰度高于食用酒精和清香型酒处理,而Clostridia纲平均相对丰度低于食用酒精和清香型酒处理。从肠道菌群组成成分来看,生理盐水处理与清香型白酒LQX和食用酒精LEA处理的肠道菌群群落组成成分一致,而且对照与LQX处理的肠道菌群群落组成成分更接近。 展开更多
关键词 清香型白酒 小鼠 酒精性组织 病理损伤 肠道菌群 食用酒精
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基于全局精准非靶向代谢组学测定的南派清香型白酒中非挥发性物质解析
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作者 李俊薇 周磊 +4 位作者 夏威汉 董孝元 史玉敏 邹晶晶 李良 《中南农业科技》 2023年第12期55-60,共6页
利用全局精准非靶向代谢组学分析南派清香型白酒中的非挥发性物质,以揭示其特点。通过样品质检、质谱分析和统计检验等方法处理试验数据,对代谢物进行分类和分析。结果表明,南派清香型白酒中含有2885种代谢物,其中富含脂肪酸、氨基酸、... 利用全局精准非靶向代谢组学分析南派清香型白酒中的非挥发性物质,以揭示其特点。通过样品质检、质谱分析和统计检验等方法处理试验数据,对代谢物进行分类和分析。结果表明,南派清香型白酒中含有2885种代谢物,其中富含脂肪酸、氨基酸、肽及其类似物等,还包括嘧啶衍生物和季铵盐等特定化合物。经过进一步分析筛选,发现了152种显著差异性代谢物,包括胺类化合物、氨基酸、肽及其类似物、苯二酚、有机磷酸等。在基酒与成品酒的对比分析中发现25种显著差异性代谢物,其中11种在基酒中的含量高于成品酒,13种在成品酒中的含量高于基酒。进一步的KEGG通路分析揭示了南派清香型白酒与人体的能量供应、代谢调节、蛋白质合成和修复、抗氧化、免疫、抗炎、神经保护和调节、皮肤健康、心血管功能改善、抗菌抗肿瘤、精神状态调节有密不可分的联系。 展开更多
关键词 南派清香型白酒 非挥发性物质 全局精准非靶向代谢组(LC-MS)法 KEGG通路分析
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