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铁死亡在霉菌毒素毒性作用中的研究进展 被引量：1
1
作者 宋晨晨 王威 +2 位作者 尧青 莫启贵 刘爱梅 《动物医学进展》 北大核心 2025年第4期114-119,共6页
霉菌毒素污染已成为饲料和食品安全的最大隐患之一,严重威胁着动物和人类健康。了解霉菌毒素诱发毒性的机制是解毒的关键。铁死亡(ferroptosis)是一种以铁过载、脂质活性氧(ROS)积累和谷胱甘肽(GSH)消耗为特征的细胞死亡方式。越来越多... 霉菌毒素污染已成为饲料和食品安全的最大隐患之一,严重威胁着动物和人类健康。了解霉菌毒素诱发毒性的机制是解毒的关键。铁死亡(ferroptosis)是一种以铁过载、脂质活性氧(ROS)积累和谷胱甘肽(GSH)消耗为特征的细胞死亡方式。越来越多的研究表明,铁死亡参与了霉菌毒素暴露引起的器官损伤,而天然抗氧化剂、铁死亡抑制剂以及添加剂可以有效抑制铁死亡,从而减轻霉菌毒素的毒性作用。该综述通过概括铁死亡在霉菌毒素毒性中的作用及机制,以及比较分析靶向铁死亡拮抗霉菌毒素毒性的保护剂及其机制,可为今后防治霉菌毒素毒性提供新策略。 展开更多
关键词 霉菌毒素 毒性 铁死亡 脂质过氧化
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松萝酸调节PD-1/PD-L1信号通路对肺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响
2
作者 陈莉 卢红 汪甜 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2024年第11期1142-1147,共6页
目的 研究松萝酸通过调节程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡配体1(PD-L1)信号通路影响肺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸。方法 分离培养人CD8~+T淋巴细胞,1∶1比例与人肺癌细胞A549共培养,并将其进行分组:对照组,低浓度松萝酸组、中浓度松... 目的 研究松萝酸通过调节程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡配体1(PD-L1)信号通路影响肺癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸。方法 分离培养人CD8~+T淋巴细胞,1∶1比例与人肺癌细胞A549共培养,并将其进行分组:对照组,低浓度松萝酸组、中浓度松萝酸组、高浓度松萝酸组,松萝酸+空载组,松萝酸+过表达PD-L1组;CCK8法测定A549细胞增殖;ELISA测定细胞上清液INF-γ和TNF-α水平;流式细胞术测定A549细胞凋亡;RT-PCR检测A549细胞TNF-α、INF-γ、PD-L1、CD8~+T细胞PD-1 mRNA水平;Western blot检测CD8~+T细胞PD-1、A549细胞PD-L1、cleaved-caspase 3、ki67蛋白水平。结果 与对照组相比,低、中、高浓度松萝酸组A549细胞A_(450)值、上清液TNF-α水平、A549细胞TNF-α、PD-L1、CD8~+T细胞PD-1 mRNA水平、CD8~+T细胞PD-1、A549细胞PD-L1、ki67蛋白水平均显著性降低,A549细胞凋亡率、上清液INF-γ水平、A549细胞INF-γ mRNA水平以及cleaved-caspase 3蛋白水平升高(P<0.05)。与松萝酸+空载组相比,松萝酸+过表达PD-L1组A549细胞A_(450)值、上清液TNF-α水平、A549细胞TNF-α、PD-L1、CD8~+T细胞PD-1 mRNA水平、CD8~+T细胞PD-1、A549细胞PD-L1、ki67蛋白水平均显著性升高,A549细胞凋亡率、上清液INF-γ水平、A549细胞INF-γ mRNA水平以及cleaved-caspase 3蛋白水平均显著性降低(P<0.05)。结论 松萝酸可能通过阻滞PD-1/PD-L1信号通路诱导A549细胞凋亡,并抑制免疫逃逸和增殖。 展开更多
关键词 松萝酸 PD-1/PD-L1 肺癌细胞 增殖凋亡 免疫逃逸
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miR-27a靶向调控SFRP1对结直肠癌生物学行为的影响
3
作者 司马学琴 苏延停 曾智 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期418-423,共6页
目的探讨miR-27a在结直肠癌中的表达,并分析其靶向调控分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)对人结直肠癌细胞HCT116生物学行为的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中miR-27a和SFRP1 mRNA的表达情况;Western blo... 目的探讨miR-27a在结直肠癌中的表达,并分析其靶向调控分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)对人结直肠癌细胞HCT116生物学行为的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中miR-27a和SFRP1 mRNA的表达情况;Western blot检测结直肠癌组织及癌旁正常组织中SFRP1蛋白表达水平;运用TargetScan预测软件及双荧光素酶报告基因实验检测miR-27a对SFRP1的靶向调控作用;将miR27a模拟物(miR-27a mimic)、miR-27a抑制物(miR-27a inhibitor)及阴性对照(NC)转染至HCT116细胞中;采用qRT-PCR测定各组细胞中miR-27a和SFRP1 mRNA的表达水平;运用四唑盐(MTT)比色法检测各组细胞增殖情况;Transwell实验评估各组细胞侵袭和迁移能力;Western blot检测各组细胞中SFRP1、Wnt/β-catenin信号通路中的关键因子Wnt4和β-catenin的蛋白表达水平。结果与癌旁正常组织相比,miR-27a在结直肠癌组织中高表达,而SFRP1在结直肠癌组织中低表达(P<0.05);TargetScan预测软件和双荧光素酶报告基因实验表明miR-27a靶向调控SFRP1;与NC组相比,miR-27a mimic组miR-27a表达水平升高,细胞增殖、侵袭和迁移能力增强,SFRP1蛋白表达降低,Wnt4和β-catenin蛋白表达增加(P<0.05);与miR-27a mimic组相比,miR-27a inhibitor组细胞内miR-27a表达下降,细胞增殖、侵袭和迁移能力降低,SFRP1蛋白表达增加,Wnt4和β-catenin蛋白表达降低(P<0.05)。结论miR-27a能够靶向调控SFRP1,通过上调SFRP1,阻断下游的Wnt/β-catenin信号通路,抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移等生物学过程,从而发挥抑癌作用。为临床治疗提供了新方向。 展开更多
关键词 miR-27a SFRP1 结直肠癌 Wnt4 Β-CATENIN
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常春藤皂苷元抑制胶质母细胞瘤细胞的增殖和迁移并诱导其凋亡 被引量：1
4
作者 樊庆葵 余南琼 +1 位作者 胡美纯 佘同辉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第5期852-863,共12页
目的探讨常春藤皂苷元(HDG)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖、迁移和凋亡的影响及机制。方法人GBM细胞株U87、U251和人脑胶质细胞株(HEB)为研究对象,以HDG 0μmol/L(或0 mg/kg)为对照组,实验组分别给予不同浓度HDG;噻唑蓝法(MTT)、EdU染色... 目的探讨常春藤皂苷元(HDG)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖、迁移和凋亡的影响及机制。方法人GBM细胞株U87、U251和人脑胶质细胞株(HEB)为研究对象,以HDG 0μmol/L(或0 mg/kg)为对照组,实验组分别给予不同浓度HDG;噻唑蓝法(MTT)、EdU染色及细胞平板克隆检测HDG对GBM细胞增殖的影响;锥虫蓝染色检测HDG对GBM细胞死亡的影响;细胞划痕、Transwell实验检测HDG对GBM细胞迁移和侵袭的影响;Annexin V-FITC、JC-10染色及Western blot检测细胞凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2-Associated X的蛋白质Bax、肿瘤蛋白p53、胱天蛋白酶3(cleaved-caspase-3),分析HDG对GBM细胞凋亡的影响;BALB/C小鼠肿瘤异种移植实验分析HDG对GBM体内荷瘤的影响。结果与对照组(HDG 0μmol/L)比较,HDG对U87、U251细胞的增殖、迁移和侵袭有显著抑制作用,且与HDG剂量呈依赖关系;锥虫蓝染色结果显示HDG导致GBM细胞的死亡数量明显增多;HDG明显诱导U87、U251细胞的线粒体膜电位下降、凋亡细胞数量增加以及凋亡相关蛋白Bax、p53、cleaved-caspase3的表达上调和Bcl-2的表达下调;HDG显著抑制BALB/C小鼠皮下GBM的大小、GBM细胞Ki67的阳性率并导致GBM细胞大量死亡;HDG对人HEB细胞以及荷瘤小鼠肝脏无明显毒性作用。结论HDG对GBM细胞的增殖、迁移和侵袭有显著抑制作用且诱导其凋亡,HDG诱导GBM细胞凋亡的机制可能通过介导线粒体损伤及调控p53、Bcl-2/Bax表达。 展开更多
关键词 常春藤皂苷元 胶质母细胞瘤 增殖 迁移 凋亡
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不同湿度条件下甲醛暴露致大鼠认知功能损伤及毒理学机制研究 被引量：1
5
作者 徐淼 王碧红 +5 位作者 昌德炜 周晶 苏甜甜 朱雨豪 孙燕玲 吕建国 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期221-229,共9页
探讨不同湿度条件下甲醛暴露对大鼠认知功能的影响及毒理学机制。取SPF级6~8周龄雌性SD大鼠48只,随机分为6组:对照组(Control组)、甲醛组(FA组)、低湿度组(60%Hum组)、中湿度组(75%Hum组)、高湿度组(90%Hum组)和高湿度联合甲醛组(90%Hum... 探讨不同湿度条件下甲醛暴露对大鼠认知功能的影响及毒理学机制。取SPF级6~8周龄雌性SD大鼠48只,随机分为6组:对照组(Control组)、甲醛组(FA组)、低湿度组(60%Hum组)、中湿度组(75%Hum组)、高湿度组(90%Hum组)和高湿度联合甲醛组(90%Hum+FA组)。不同湿度组分别置于(60%/75%/90%)环境仓中暴露,FA组采用职业气态方式暴露(3 mg·m^(-3),8 h·d^(-1),5 d·周^(-1)),连续21 d后观察Morris水迷宫和旷场实验结果,苏木精-伊红染色法(HE)、尼氏染色观察各组大鼠海马神经元的形态学变化,免疫荧光法和免疫印迹实验(Western Blot)检测瞬时受体电位香草素受体4(TRPV4)、闭合蛋白(Occludin)和紧密连接蛋白5(Claudin-5)的蛋白表达水平。与Control组相比,不同湿度组和FA组大鼠的认知功能下降,海马神经元数量减少,且随湿度升高而加剧(P<0.05);与FA组、90%Hum组分别比较,90%Hum+FA组认知功能和海马神经元损伤加剧,且TRPV4表达升高,Occludin和Claudin-5表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。高湿度和甲醛联合暴露可能通过激活TRPV4离子通道,下调Occludin和Claudin-5表达,加剧大鼠海马神经元的损伤,使认知功能进一步下降。 展开更多
关键词 湿度 甲醛 瞬时受体电位香草素受体4 认知功能 海马
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人G6PD在大肠埃希菌中的表达及体外抑制剂筛选模型的建立
6
作者 金科华 游云悠 +4 位作者 魏友煜 左越 柯志强 尧青 刘洁 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第8期1289-1293,共5页
目的表达人6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)并建立其体外抑制剂筛选模型。方法设计一对5′端分别带NdeⅠ、XhoⅠ位点的引物,PCR扩增G6PD cDNA。将cDNA和质粒pET-28a经NdeⅠ+XhoⅠ酶切后连接,连接产物转化大肠杆菌Top10。将鉴定的重组质粒转化... 目的表达人6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)并建立其体外抑制剂筛选模型。方法设计一对5′端分别带NdeⅠ、XhoⅠ位点的引物,PCR扩增G6PD cDNA。将cDNA和质粒pET-28a经NdeⅠ+XhoⅠ酶切后连接,连接产物转化大肠杆菌Top10。将鉴定的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用0.4 mmol/L IPTG诱导G6PD表达,镍离子亲和层析柱纯化G6PD。以6-磷酸葡萄糖(G6P)和烟酰胺腺嘌呤核苷二磷酸(NADP+)为G6PD的底物和辅因子,检测340 nm波长处光吸收值(A_(340))的变化,确定G6PD及其抑制剂脱氢表雄酮(DHEA)的最佳浓度,计算模型的可靠性指数—Z′因子。结果构建了重组质粒pET-28a-G6PD,重组菌BL21(DE3)-pET-28a-G6PD经IPTG诱导后,可溶性G6PD表达量为2.5 mg/L,G6PD、DHEA的最适浓度分别为900μg/L、20μmol/L,筛选模型的Z′因子为0.88。结论在大肠杆菌中表达了有活性的G6PD,建立了可靠的体外抑制剂筛选模型。 展开更多
关键词 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 抑制剂 筛选模型
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阿司匹林诱发GSDME依赖性细胞焦亡对结肠癌细胞增殖的影响
7
作者 司马学琴 苏延停 李成武 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第12期2019-2023,共5页
目的探讨阿司匹林诱发焦孔素E(GSDME)依赖性细胞焦亡对结肠癌细胞增殖的影响及其相关机制。方法体外培养人结肠癌细胞Caco-2;运用MTT法检测不同浓度(1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0 mmol/L)阿司匹林干预对结肠癌细胞增殖活性的影响;... 目的探讨阿司匹林诱发焦孔素E(GSDME)依赖性细胞焦亡对结肠癌细胞增殖的影响及其相关机制。方法体外培养人结肠癌细胞Caco-2;运用MTT法检测不同浓度(1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0 mmol/L)阿司匹林干预对结肠癌细胞增殖活性的影响;显微镜下观察阿司匹林干预对结肠癌细胞形态学的影响;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验观察阿司匹林干预对结肠癌细胞膜完整性的影响;Western blot实验检测阿司匹林对结肠癌细胞中焦亡相关通路基因NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、焦孔素E-N(GSDME-N)的蛋白表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)测定Caco-2细胞上清中白介素-1β(IL-1β)和白介素-18(IL-18)的水平;沉默GSDME后在显微镜下观察细胞形态学变化情况;LDH释放实验观察细胞细胞膜完整性情况;ELISA法测定GSDME沉默后细胞上清中IL-1β和IL-18的水平。结果MTT结果显示,阿司匹林能够降低结肠癌细胞Caco-2的增殖活性,且呈浓度依赖性(P<0.01);形态学观察结果与LDH实验显示阿司匹林能够促进细胞焦亡的发生(P<0.01);Western blot结果显示阿司匹林能够升高焦亡相关通路基因NLRP3、Caspase-1、GSDME-N的蛋白表达(P<0.05);ELISA检测显示阿司匹林能够提高细胞上清中IL-1β和IL-18的含量(P<0.01);结肠癌细胞Caco-2细胞在沉默GSDME后,细胞焦亡受到抑制(P<0.05),IL-1β和IL-18表达下降(P<0.01)。结论阿司匹林能够诱发GSDME依赖性细胞焦亡,抑制结肠癌细胞Caco-2的增殖,从而发挥抑癌作用。 展开更多
关键词 阿司匹林 焦孔素E 结肠癌 CACO-2细胞 细胞焦亡
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一种多吡啶双核单功能铂配合物的合成、晶体结构及抗癌活性 被引量：1
8
作者 李训一 王宇静 +5 位作者 周子默 方霄 汪清清 胡美纯 杨晓松 王小波 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第1期141-149,共9页
合成了一种含有多吡啶基配体2,6-双((双(吡啶-2-基甲基)氨基)甲基)吡啶(BPA-TPA)的双核单功能铂(Ⅱ)配合物[Pt_(2)(BPA-TPA)Cl_(2)]Cl_(2)(Pt_(2)-BPA-TPA),以核磁共振波谱和高分辨质谱进行表征,并通过X射线单晶衍射确定了Pt_(2)-BPA-TP... 合成了一种含有多吡啶基配体2,6-双((双(吡啶-2-基甲基)氨基)甲基)吡啶(BPA-TPA)的双核单功能铂(Ⅱ)配合物[Pt_(2)(BPA-TPA)Cl_(2)]Cl_(2)(Pt_(2)-BPA-TPA),以核磁共振波谱和高分辨质谱进行表征,并通过X射线单晶衍射确定了Pt_(2)-BPA-TPA的结构。琼脂凝胶电泳实验表明Pt_(2)-BPA-TPA在10μmol·L^(-1)的低浓度下可有效切割pBR322 DNA。通过CCK-8(cell counting kit-8)实验检测了Pt_(2)-BPA-TPA对人肺癌细胞系A549的细胞毒性,结果显示Pt_(2)-BPA-TPA表现出比顺铂更好的抗癌活性,其主要通过触发DNA损伤和上调下游凋亡相关细胞信号通路蛋白(p21蛋白和cleaved-caspase-3)诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 单功能铂 抗癌活性 DNA切割 双核配合物 晶体结构
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重组茶树菇凝集素6二聚体的原核表达、纯化及糖结合活性鉴定 被引量：1
9
作者 刘行辉 刘若兰 +6 位作者 龙云峰 陈邦航 张峥嵘 敖欣 樊洁柔 李准洁 苏延停 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1436-1444,共9页
N-连接糖基化的N-乙酰葡萄糖胺(N-acetylglucosamine,GlcNAc)末端修饰是一种缩短的糖基化修饰,与多种疾病密切相关,例如自身免疫性疾病、癌症和神经退行性疾病等。然而,因为缺乏有效的识别工具导致对这种修饰的功能研究仍然是一个挑战... N-连接糖基化的N-乙酰葡萄糖胺(N-acetylglucosamine,GlcNAc)末端修饰是一种缩短的糖基化修饰,与多种疾病密切相关,例如自身免疫性疾病、癌症和神经退行性疾病等。然而,因为缺乏有效的识别工具导致对这种修饰的功能研究仍然是一个挑战。之前的研究已经表明,一种识别GlcNAc的茶树菇凝集素6(Agrocybe aegerita lectin recognizing GlcNAc,AANL6)对末端的GlcNAc糖结构特异性识别,但是亲和力较低。为了改造更高效的末端GlcNAc糖识别工具,AANL6通过二聚化来提高单体的亲和力。将AANL6单体通过中间的接头序列(linker)进行分子水平的二聚化,然后克隆到pET-30a质粒上,转化至大肠杆菌表达菌BL21中。确立最优的表达条件,并大量表达纯化AANL6二聚体蛋白(根据linker命名为PA6和EAA6)。随后对AANL6二聚体进行纯度、分子量和糖结合活性研究。SDS-PAGE结果显示,AANL6二聚体纯度较高(92.5%),分子量介于66.2~116 kD之间,符合预期值88 kD的大小。等温滴定热量法(isothermal titration calorimetry,ITC)检测结果显示,二聚化的AANL6显著提高了对GlcNAc的结合能力(P<0.01)。糖结合活性检测显示,AANL6二聚体对末端的GlcNAc糖基化修饰与单体相比有着更高的特异性。这些结果显示,AANL6二聚体通过二聚化显著提高了对末端GlcNAc糖基化的亲和力和特异性,这不仅为未来的末端GlcNAc糖基化修饰的功能提供有效的识别工具,而且提供了一种新的改造凝集素的策略。 展开更多
关键词 N-乙酰葡萄糖胺 糖基化修饰 二聚化 糖识别工具
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