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罗伊氏乳杆菌对轮状病毒体内外复制的抑制作用及其对免疫因子表达的影响
1
作者 李小凤 程美慧 +4 位作者 刘洋 刘长城 贾雪娇 刘梦琦 赵微 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1597-1605,共9页
目的:探讨罗伊氏乳杆菌对轮状病毒(RV)SA11株体内外复制的抑制作用,并阐明其对相关免疫因子表达的影响。方法:体外实验,培养并鉴定罗伊氏乳杆菌,绘制罗伊氏乳杆菌标准曲线和生长曲线,筛选罗伊氏乳杆菌培养最佳时间和最适浓度。采用5... 目的:探讨罗伊氏乳杆菌对轮状病毒(RV)SA11株体内外复制的抑制作用,并阐明其对相关免疫因子表达的影响。方法:体外实验,培养并鉴定罗伊氏乳杆菌,绘制罗伊氏乳杆菌标准曲线和生长曲线,筛选罗伊氏乳杆菌培养最佳时间和最适浓度。采用5×10^(8)、10×10^(8)、50×10^(8)、100×10^(8)、200×10^(8)和500×10^(8)CFU·mL^(-1)罗伊氏乳杆菌感染细胞,台盼蓝染色法检测Caco-2细胞存活率。将不同浓度罗伊氏乳杆菌与RV体外共孵育并作用于Caco-2细胞,Caco-2细胞分为阴性对照组(NC组)、阳性对照组(PC组)和10~7、10^(8)、10~9及1010CFU·mL^(-1)罗伊氏乳杆菌组,免疫荧光灶法检测罗伊氏乳杆菌作用后Caco-2细胞中病毒滴度,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测不同浓度罗伊氏乳杆菌作用后Caco-2细胞中RV VP6基因拷贝数。体内实验,将25窝SPF级乳鼠分为对照组、RV组(感染SA11毒株)、Ab-NC组(抗生素处理耗竭肠道菌群)、Ab-RV组(耗竭肠道菌群后感染SA11毒株)和Ab-Lac-RV组(耗竭肠道菌群,并感染罗伊氏乳杆菌后感染SA11毒株)。收取各组乳鼠灌胃第2、4、6、8和10天的粪便样本和灌胃第4天结肠组织样本,RT-qPCR法检测各组乳鼠粪便中RV VP6基因拷贝数和结肠组织中白细胞介素(IL)-1β、IL-8、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子(TNF)-αmRNA表达水平。结果:罗伊氏乳杆菌生长良好,形态圆润,呈圆形、光滑和乳白色的凸起样菌落,且边缘较整齐;革兰染色后菌体呈紫色、不规则和方形杆状;经16SrDNA测序后序列同源性为99%,提示罗伊氏乳杆菌活化成功;罗伊氏乳杆菌活菌数与吸光度(A)值呈线性关系,回归分析标准曲线为Y=0.4375X+0.0006,R2=0.9994。培养0~2 h,细菌处于对数生长期,细菌生长迟缓;培养2~14 h,细菌快速生长,并于培养14~16 h时细菌生长趋于稳定,培养16 h时达到细菌生长速率顶峰,随后进入衰亡期。5×10^(8)、10×10^(8)、50×10^(8)、100×10^(8)和200×10^(8)CFU·mL^(-1)罗氏乳杆菌感染后,Caco-2细胞存活率均>90%,因此选用上述浓度罗氏乳杆菌感染细胞。与PC组比较,5×10^(8)、10×10^(8)、50×10^(8)、100×10^(8)和200×10^(8)CFU·mL^(-1)罗氏乳杆菌组Caco-2细胞中RV VP6基因拷贝数均明显降低(P<0.01)。与PC组比较,10~7、10^(8)、10~9和1010CFU·mL^(-1)罗伊氏乳杆菌组Caco-2细胞中病毒滴度均明显降低(P<0.01)。与对照组比较,Ab-NC组、Ab-RV组和Ab-Lac-RV组乳鼠肠道菌群菌落数量均明显减少,乳鼠肠道菌群耗竭成功。灌胃第2和4天,与RV组比较,Ab-RV组乳鼠粪便中RV VP6基因拷贝数明显降低(P<0.05);灌胃第4、6、8和10天,与Ab-RV组比较,Ab-Lac-RV组乳鼠粪便中RV VP6基因拷贝数明显降低(P<0.05)。与对照组比较,Ab-RV组和Ab-Lac-RV组乳鼠结肠组织中IL-1β、IL-10、IFN-γ及TNF-αmRNA表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),IL-8 mRNA表达水平均明显降低(P<0.05),Ab-Lac-RV组乳鼠结肠组织中IL-10 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。结论:罗伊氏乳杆菌可能通过上调IL-1β、IL-10、IFN-γ和TNF-αmRNA表达及下调IL-8 mRNA表达,抑制RV复制。 展开更多
关键词 罗伊氏乳杆菌 轮状病毒 乳鼠 免疫因子 标准曲线
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脑梗死患者血小板四项参数的变化及其意义 被引量：6
2
作者 龚永启 胡芳 +1 位作者 骆明波 黄光辉 《实用医学杂志》 CAS 2007年第21期3467-3468,共2页
脑组织因血管阻塞而引起缺血性坏死或软化即为脑梗死．引起脑梗死的原凶有血管阻塞及脑部血液循环障碍两大类。血小板具黏附、聚集特性．在止血和血栓形成过程中占有相当重要的地位，血小板参数的变化亦是血液凝固的重要凶素之一。为探... 脑组织因血管阻塞而引起缺血性坏死或软化即为脑梗死．引起脑梗死的原凶有血管阻塞及脑部血液循环障碍两大类。血小板具黏附、聚集特性．在止血和血栓形成过程中占有相当重要的地位，血小板参数的变化亦是血液凝固的重要凶素之一。为探讨血小板计数（PLT）、平均血小板体积（MPV）、血小板分布宽度（PDW）、大血小板比率（P-LCR）四项参数在脑梗死患者中的变化及临床意义．本研究测定了脑梗死、短暂性脑缺血发作患者血小板四项指标，并与正常组进行比较、分析．现报告如下。 展开更多
关键词 血小板四项参数 脑梗死患者 短暂性脑缺血发作 平均血小板体积 血小板分布宽度 血小板四项指标 血液循环障碍 血栓形成过程
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CRP联合CA125、CEA对卵巢癌诊断价值的比较 被引量：2
3
作者 朱中梁 汪宏良 马娟 《海南医学院学报》 CAS 2013年第2期239-240,243,共3页
目的:探讨血清CRP联合CA125,CEA对卵巢癌的诊断价值。方法:收集女性卵巢癌术前患者血清119例、女性健康人血清标本108例及女性盆腔良性疾病患者血清标本44例测定CRP、CA125、CEA浓度。结果:卵巢癌组血清CRP、CA125、CEA浓度高于健康对照... 目的:探讨血清CRP联合CA125,CEA对卵巢癌的诊断价值。方法:收集女性卵巢癌术前患者血清119例、女性健康人血清标本108例及女性盆腔良性疾病患者血清标本44例测定CRP、CA125、CEA浓度。结果:卵巢癌组血清CRP、CA125、CEA浓度高于健康对照组(P<0.05)。相对于独立诊断以及传统的CA12-5和CEA联合诊断,CRP联合CA125、CEA为较佳的组合模式,其敏感性和特异性提高至95.3%和75.5%。结论:CRP联合CA125、CEA能够很好的提高卵巢癌的诊断能力,能更好的从良性盆腔疾病以及健康对照者中区分出卵巢癌。 展开更多
关键词 CRP CA125 CEA 卵巢癌
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