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mPD-1/mPD-L1体外分子结合模型的建立
被引量：
2
1
作者
覃晓琳
刘朝奇
+1 位作者
杨凡
郑兰英
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期385-389,共5页
目的建立小鼠PD-1/PD-L1(mPD-1/mPD-L1)体外分子结合模型,为研究PD-1/PD-L1生物学活性及建立高通量药物筛选分子模型奠定基础。方法重组质粒在原核细胞表达mPD-1和mPD-L1蛋白,利用亲和层析及切胶方法纯化相应蛋白;应用ELISA和GSTPull-d...
目的建立小鼠PD-1/PD-L1(mPD-1/mPD-L1)体外分子结合模型,为研究PD-1/PD-L1生物学活性及建立高通量药物筛选分子模型奠定基础。方法重组质粒在原核细胞表达mPD-1和mPD-L1蛋白,利用亲和层析及切胶方法纯化相应蛋白;应用ELISA和GSTPull-down方法验证mPD-1与其配体mPD-L1蛋白的结合活性;以Alamar blue法检测纯化mPD-1和mPD-L1蛋白混合物对混合淋巴细胞增殖的影响。结果SDS-PAGE和Western印迹结果显示原核表达的重组蛋白与预期基本一致,经过亲和层析和切胶、复性等方式获得了纯化的mPD-1和mPD-L1蛋白。ELISA和GSTpull-down结果表明,mPD-1和mPD-L1蛋白具有体外结合的活性。淋巴细胞增殖试验进一步说明两蛋白的结合可一定程度上降低单独蛋白对淋巴细胞增殖的影响(P<0.05)。结论利用原核细胞高效表达并纯化的mPD-1、mPD-L1蛋白成功建立体外mPD-1/mPD-L1分子结合模型,为高通量药物初筛奠定了基础。
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关键词
mPD-1
mPD-L1
分子模型
淋巴细胞增殖
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职称材料
题名
mPD-1/mPD-L1体外分子结合模型的建立
被引量：
2
1
作者
覃晓琳
刘朝奇
杨凡
郑兰英
机构
三峡大学分子生物学研究所
湖北省
宜昌市第二
人民医院
放化疗科
湖北省长阳土家族自治县人民医院护理部
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第4期385-389,共5页
基金
湖北省自然科学基金(2008CDB118)
三峡大学研究生科研创新基金(2009-36)~~
文摘
目的建立小鼠PD-1/PD-L1(mPD-1/mPD-L1)体外分子结合模型,为研究PD-1/PD-L1生物学活性及建立高通量药物筛选分子模型奠定基础。方法重组质粒在原核细胞表达mPD-1和mPD-L1蛋白,利用亲和层析及切胶方法纯化相应蛋白;应用ELISA和GSTPull-down方法验证mPD-1与其配体mPD-L1蛋白的结合活性;以Alamar blue法检测纯化mPD-1和mPD-L1蛋白混合物对混合淋巴细胞增殖的影响。结果SDS-PAGE和Western印迹结果显示原核表达的重组蛋白与预期基本一致,经过亲和层析和切胶、复性等方式获得了纯化的mPD-1和mPD-L1蛋白。ELISA和GSTpull-down结果表明,mPD-1和mPD-L1蛋白具有体外结合的活性。淋巴细胞增殖试验进一步说明两蛋白的结合可一定程度上降低单独蛋白对淋巴细胞增殖的影响(P<0.05)。结论利用原核细胞高效表达并纯化的mPD-1、mPD-L1蛋白成功建立体外mPD-1/mPD-L1分子结合模型,为高通量药物初筛奠定了基础。
关键词
mPD-1
mPD-L1
分子模型
淋巴细胞增殖
Keywords
mPD-1
mPD-L1
molecular models
lymphocyte proliferation
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
mPD-1/mPD-L1体外分子结合模型的建立
覃晓琳
刘朝奇
杨凡
郑兰英
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
2
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