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血红素氧合酶-1提高无氧无血清条件下骨髓间充质干细胞的生存 被引量:1
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作者 楚生辉 曾彬 +1 位作者 张艳 李杨林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1206-1209,共4页
目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)是否提高骨髓间充质干细胞(MSCs)在无氧无血清条件下的存活率。方法:取大鼠骨髓,体外分离扩增培养MSCs;HO-1腺病毒转染MSCs,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达;DAPI染色观察无氧无血清条件下HO-1-M... 目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)是否提高骨髓间充质干细胞(MSCs)在无氧无血清条件下的存活率。方法:取大鼠骨髓,体外分离扩增培养MSCs;HO-1腺病毒转染MSCs,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达;DAPI染色观察无氧无血清条件下HO-1-MSCs、MSCs细胞核变化;流式细胞仪检测无氧无血清条件下HO-1-MSCs、MSCs的凋亡率;ELISA检测无氧无血清条件下HO-1-MSCs、MSCs细胞因子的分泌。用无氧无血清条件下HO-1-MSCs、MSCs的培养上清液对无氧无血清条件下的心肌细胞进行培养,Western blot-ting检测凋亡蛋白caspase-3的变化,分光光度计检测caspase-3酶活性。结果:HO-1转染的MSCs可稳定高效地表达GFP;DAPI染色后,MSCs细胞核为典型的凋亡形态,HO-1-MSCs为较均匀蓝色荧光;HO-1-MSCs在无氧无血清条件下的凋亡率显著低于MSCs(P<0.01),且在无氧无血清条件下分泌肝细胞生长因子(HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)水平显著增高(P<0.01);HO-1-MSCs、MSCs培养上清液在无氧无血清条件下分别培养心肌细胞,HO-1-MSCs组caspase-3蛋白和caspase-3活性都显著降低(P<0.01)。结论:无氧无血清条件下,HO-1提高MSCs的存活率;HO-1-MSCs分泌更多的细胞因子,且对无氧无血清条件下的心肌细胞有保护作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 血红素氧化酶1 细胞凋亡
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