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GBA敲减通过调控EGFR信号通路抑制DDP耐药卵巢癌细胞恶性进展
1
作者
代小燕
罗芳
+1 位作者
谢茂华
靖芳
《中国比较医学杂志》
北大核心
2025年第9期60-71,共12页
目的本文旨在探究β-葡萄糖苷酶(GBA)敲减对顺铂(DDP)耐药卵巢癌(OC)细胞恶性进展的影响,并探讨其调控表皮生长因子受体(EGFR)信号通路的机制。方法将A2780/DDP细胞分成4组,对照(Con)组(空白对照)、si⁃NC组(转染阴性对照si⁃NC)、si⁃GBA...
目的本文旨在探究β-葡萄糖苷酶(GBA)敲减对顺铂(DDP)耐药卵巢癌(OC)细胞恶性进展的影响,并探讨其调控表皮生长因子受体(EGFR)信号通路的机制。方法将A2780/DDP细胞分成4组,对照(Con)组(空白对照)、si⁃NC组(转染阴性对照si⁃NC)、si⁃GBA组(转染si⁃GBA)和NSC 228155组(转染si⁃GBA并用2μmol/L的NSC 228155处理)。蛋白免疫印迹检测GBA、E⁃cadherin、N⁃cadherin、Vimentin、EGFR、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(p⁃p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p⁃ERK的蛋白表达水平。逆转录定量聚合酶链式反应(RT⁃qPCR)检测GBA的相对表达量。细胞计数试剂盒-8(CCK⁃8)检测法、平板克隆形成实验、细胞划痕愈合实验以及Transwell迁移实验对细胞的增殖活性、迁移及侵袭潜能进行了评估。将36只裸鼠分成6组,每组6只:空白对照组(注射生理盐水)、空白对照+DDP组(进行DDP给药处理)、阴性对照组(注射转染si⁃NC的A2780/DDP细胞悬液)、阴性对照+DDP组(注射转染si⁃NC的A2780/DDP细胞悬液并进行DDP给药处理)、敲低组(注射转染si⁃GBA的A2780/DDP细胞悬液)和敲低+DDP组(注射转染si⁃GBA的A2780/DDP细胞悬液并进行DDP给药处理)。观察各组裸鼠肿瘤体积与质量。结果与A2780组相比,A2780/DDP组的GBA蛋白表达水平以及mRNA相对表达量均显著上调(P<0.05)。与Con组和si⁃NC组相比,si⁃GBA组的增殖活性、克隆细胞数、划痕修复率和穿膜细胞数显著降低(P<0.05);E⁃cadherin的表达水平显著增加(P<0.05),Vimentin、N⁃cadherin、EGFR的表达水平,p⁃p38 MAPK/p38 MAPK比值以及p⁃ERK/ERK比值显著降低(P<0.05)。与si⁃GBA组相比,NSC 228155组的增殖活性、克隆细胞数、划痕修复率和穿膜细胞数显著增加(P<0.05);E⁃cadherin的表达水平显著降低(P<0.05),Vimentin、N⁃cadherinh和EGFR的表达水平,p⁃p38 MAPK/p38 MAPK比值以及p⁃ERK/ERK比值显著增加(P<0.05)。裸鼠移植瘤实验中,与空白对照组相比,空白对照+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与阴性对照组相比,阴性对照+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与敲低组相比,敲低+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组相比,敲低组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与空白对照+DDP组和阴性对照+DDP组相比,敲低+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。结论敲低GBA可显著抑制DDP耐药OC细胞的增殖、迁移和侵袭等恶性行为,并对裸鼠A2780/DDP细胞皮下移植瘤的生长发挥抑制作用,其机制可能通过抑制EGFR/MAPK/ERK信号通路来实现。
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关键词
GBA
EGFR信号通路
顺铂
耐药
卵巢癌
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职称材料
题名
GBA敲减通过调控EGFR信号通路抑制DDP耐药卵巢癌细胞恶性进展
1
作者
代小燕
罗芳
谢茂华
靖芳
机构
湖北省
武汉市
第三
医院
(
武汉大学
附属
同仁医院
)
妇科
出处
《中国比较医学杂志》
北大核心
2025年第9期60-71,共12页
基金
武汉市医学科学研究项目(WX23Z14)。
文摘
目的本文旨在探究β-葡萄糖苷酶(GBA)敲减对顺铂(DDP)耐药卵巢癌(OC)细胞恶性进展的影响,并探讨其调控表皮生长因子受体(EGFR)信号通路的机制。方法将A2780/DDP细胞分成4组,对照(Con)组(空白对照)、si⁃NC组(转染阴性对照si⁃NC)、si⁃GBA组(转染si⁃GBA)和NSC 228155组(转染si⁃GBA并用2μmol/L的NSC 228155处理)。蛋白免疫印迹检测GBA、E⁃cadherin、N⁃cadherin、Vimentin、EGFR、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化p38 MAPK(p⁃p38 MAPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、p⁃ERK的蛋白表达水平。逆转录定量聚合酶链式反应(RT⁃qPCR)检测GBA的相对表达量。细胞计数试剂盒-8(CCK⁃8)检测法、平板克隆形成实验、细胞划痕愈合实验以及Transwell迁移实验对细胞的增殖活性、迁移及侵袭潜能进行了评估。将36只裸鼠分成6组,每组6只:空白对照组(注射生理盐水)、空白对照+DDP组(进行DDP给药处理)、阴性对照组(注射转染si⁃NC的A2780/DDP细胞悬液)、阴性对照+DDP组(注射转染si⁃NC的A2780/DDP细胞悬液并进行DDP给药处理)、敲低组(注射转染si⁃GBA的A2780/DDP细胞悬液)和敲低+DDP组(注射转染si⁃GBA的A2780/DDP细胞悬液并进行DDP给药处理)。观察各组裸鼠肿瘤体积与质量。结果与A2780组相比,A2780/DDP组的GBA蛋白表达水平以及mRNA相对表达量均显著上调(P<0.05)。与Con组和si⁃NC组相比,si⁃GBA组的增殖活性、克隆细胞数、划痕修复率和穿膜细胞数显著降低(P<0.05);E⁃cadherin的表达水平显著增加(P<0.05),Vimentin、N⁃cadherin、EGFR的表达水平,p⁃p38 MAPK/p38 MAPK比值以及p⁃ERK/ERK比值显著降低(P<0.05)。与si⁃GBA组相比,NSC 228155组的增殖活性、克隆细胞数、划痕修复率和穿膜细胞数显著增加(P<0.05);E⁃cadherin的表达水平显著降低(P<0.05),Vimentin、N⁃cadherinh和EGFR的表达水平,p⁃p38 MAPK/p38 MAPK比值以及p⁃ERK/ERK比值显著增加(P<0.05)。裸鼠移植瘤实验中,与空白对照组相比,空白对照+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与阴性对照组相比,阴性对照+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与敲低组相比,敲低+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组相比,敲低组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。与空白对照+DDP组和阴性对照+DDP组相比,敲低+DDP组的瘤体积和质量显著降低(P<0.05)。结论敲低GBA可显著抑制DDP耐药OC细胞的增殖、迁移和侵袭等恶性行为,并对裸鼠A2780/DDP细胞皮下移植瘤的生长发挥抑制作用,其机制可能通过抑制EGFR/MAPK/ERK信号通路来实现。
关键词
GBA
EGFR信号通路
顺铂
耐药
卵巢癌
Keywords
GBA
EGFR signaling pathway
cisplatin
drug resistance
ovarian cancer
分类号
R737.31 [医药卫生—肿瘤]
R730.5 [医药卫生—肿瘤]
R-33 [医药卫生]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GBA敲减通过调控EGFR信号通路抑制DDP耐药卵巢癌细胞恶性进展
代小燕
罗芳
谢茂华
靖芳
《中国比较医学杂志》
北大核心
2025
0
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