胚胎干细胞在动物育种中的应用 被引量：2

1

作者 高悦悦 郭帅 +3 位作者 顾涛涛 毕延震 方桂杰 华再东 《湖北农业科学》 2021年第S02期50-53,57,共5页

胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)是一类具有无限增殖、自我更新和多向分化潜能的细胞。ESCs广泛应用于转基因动物生产、人类疾病模型构建、濒危物种保护、人体器官移植及细胞分化等方面的研究。ESCs结合基因编辑技术生产大型动... 胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)是一类具有无限增殖、自我更新和多向分化潜能的细胞。ESCs广泛应用于转基因动物生产、人类疾病模型构建、濒危物种保护、人体器官移植及细胞分化等方面的研究。ESCs结合基因编辑技术生产大型动物模型在生物医学领域中得到了广泛应用,在动物育种方面不仅改善了动物生产特性和抗病能力,还可生产出具有更高价值和更高品质的产品,展现出良好的社会价值和应用前景。本研究对ESCs的研究现状、动物育种中的应用及前景作简要综述。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 基因编辑 动物育种

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牛支原体湖北株的分离鉴定及其oppF基因的进化分析 被引量：3

2

作者 刘威 袁芳艳 +6 位作者 周丹娜 刘泽文 杨克礼 段正赢 郭锐 吴修竹 田永祥 《湖北畜牧兽医》 2016年第9期5-6,共2页

牛支原体(Mycoplasma bovis)是引起犊牛肺炎、关节炎和成牛乳房炎的主要病原之一。从湖北恩施暴发牛支原体的肉牛场(70头引种肉牛出现20%的死亡)分离得到一株牛支原体,命名为HB2015,并对其进行了保藏(保藏号:CCTCC M 2016559),进化分析... 牛支原体(Mycoplasma bovis)是引起犊牛肺炎、关节炎和成牛乳房炎的主要病原之一。从湖北恩施暴发牛支原体的肉牛场(70头引种肉牛出现20%的死亡)分离得到一株牛支原体,命名为HB2015,并对其进行了保藏(保藏号:CCTCC M 2016559),进化分析结果显示该菌株与M.bovis NM2012内蒙株亲缘关系较近,为牛支原体的防控提供了理论依据。 展开更多

关键词 牛支原体(Mycoplasma bovis) 分离 鉴定 遗传进化分析

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猪体细胞克隆技术研究进展 被引量：4

3

作者 华再东 魏庆信 +2 位作者 郑新民 乔宪凤 许厚强 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第7期1309-1312,共4页

克隆不仅可以保护濒危动物,而且与干细胞工程技术结合应用于克隆性治疗,具有重大的科学意义和应用价值。体细胞克隆猪因其在人类器官移植方面具有巨大的应用潜力,已成为当今研究的热点,但是体细胞核移植技术仍存在许多问题,其中最主要... 克隆不仅可以保护濒危动物,而且与干细胞工程技术结合应用于克隆性治疗,具有重大的科学意义和应用价值。体细胞克隆猪因其在人类器官移植方面具有巨大的应用潜力,已成为当今研究的热点,但是体细胞核移植技术仍存在许多问题,其中最主要的是体细胞核移植的环节多,克隆效率低。对体细胞克隆猪的关键环节,即供核细胞、卵母细胞、显微操作、克隆胚的激活、培养及移植技术进行了简要综述。 展开更多

关键词 猪 克隆 显微操作 激活 重构胚

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成熟液中不同添加物对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响 被引量：2

4

作者 张立苹 王亚刚 +3 位作者 李莉 刘西梅 乔宪凤 许生成 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第10期2502-2505,共4页

试验研究了在成熟液中分别添加0.1%PVA、10%FBS和不同浓度的EGF(20、30、40、50 ng·mL-1)对猪卵母细胞体外成熟的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明,在成熟液中添加0.1%PVA和10%FBS后,对猪卵母细胞的成熟率影响... 试验研究了在成熟液中分别添加0.1%PVA、10%FBS和不同浓度的EGF(20、30、40、50 ng·mL-1)对猪卵母细胞体外成熟的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明,在成熟液中添加0.1%PVA和10%FBS后,对猪卵母细胞的成熟率影响无显著差异(P>0.05),对猪卵母细胞孤雌激活后36 h的卵裂率和第6天的桑葚胚率无显著差异(P>0.05);添加不同浓度的EGF对猪卵母细胞体外成熟率无显著差异(P>0.05);但是添加30和40 ng·mL-1 EGF组在36 h的卵裂率要极显著地高于添加20和50ng·mL-1 EGF的两组(P<0.01);而分别添加30、40和50 ng·mL-1 EGF 3组处理在第6天的桑葚胚率无显著差异,且极显著地高于添加20 ng·mL-1 EGF组的(P<0.01)。所以,在成熟液中添加0.1%PVA可以替代10%FBS,尤以添加30 ng·mL-1 EGF组对猪卵母细胞的体外成熟效果较好。 展开更多

关键词 猪卵母细胞 体外成熟 孤雌胚胎

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用乙醇激活与电激活研究猪卵母细胞孤雌激活

5

作者 肖红卫 郑新民 +6 位作者 刘西梅 乔宪凤 李莉 张立苹 华文君 毕延震 华再东 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第24期5724-5726,共3页

以猪的体外成熟卵母细胞为实验材料,研究了乙醇激活、电激活对猪成熟卵母细胞体外孤雌发育的影响。结果表明,2个1.6 kV/cm的60μs的电激活法卵裂率高(88.68%,94/106);使用8%乙醇处理10 min的卵裂率为84.21%(64/76)。2个1.6 kV/cm的60μ... 以猪的体外成熟卵母细胞为实验材料,研究了乙醇激活、电激活对猪成熟卵母细胞体外孤雌发育的影响。结果表明,2个1.6 kV/cm的60μs的电激活法卵裂率高(88.68%,94/106);使用8%乙醇处理10 min的卵裂率为84.21%(64/76)。2个1.6 kV/cm的60μs的电激活法可以获得更高的卵裂率,为下一步研究奠定基础。 展开更多

关键词 猪 卵母细胞 孤雌激活 乙醇激活 电激活

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LHRH-A3及EGF对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响

6

作者 刘西梅 张立苹 +5 位作者 乔宪凤 李莉 肖红卫 华文君 魏庆信 程妮 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第11期2851-2853,共3页

试验研究了在成熟培养液中添加促黄体素释放激素A3(Luteinizing hormone releasing hormoneA3,LHRH-A3)与表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)联合作用对猪卵母细胞体外成熟及孤雌发育的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条... 试验研究了在成熟培养液中添加促黄体素释放激素A3(Luteinizing hormone releasing hormoneA3,LHRH-A3)与表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)联合作用对猪卵母细胞体外成熟及孤雌发育的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明,在猪卵母细胞体外成熟培养中,LHRH-A3可以代替孕马血清促性腺激素(Pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(Human chorionic gonadotrophin,hCG);在孤雌发育中,LHRH-A3作用的效果明显高于添加PMSG和hCG组合;在联合应用处理中,剂量为1.5μg/mL LHRH-A3和40ng/mL EGF的组合对猪卵母细胞体外培养和孤雌发育的效果比较好。 展开更多

关键词 促黄体素释放激素A3 表皮生长因子 猪卵母细胞 体外成熟 孤雌胚胎

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鸡无抗养殖研究进展 被引量：5

7

作者 沈涛涛 张佳兰 +4 位作者 吴艳 皮劲松 张昊 程诗彬 李先强 《湖北畜牧兽医》 2021年第3期10-12,29,共4页

随着国家的快速发展,人们更加注重食品的安全问题。在鸡养殖过程中抗生素起到了重要作用。但随着抗生素的滥用、过度使用,鸡产品中的抗生素残留等问题对人类健康的影响引起了人们的重视。主要介绍了在鸡的生长过程中多种抗生素的主要功... 随着国家的快速发展,人们更加注重食品的安全问题。在鸡养殖过程中抗生素起到了重要作用。但随着抗生素的滥用、过度使用,鸡产品中的抗生素残留等问题对人类健康的影响引起了人们的重视。主要介绍了在鸡的生长过程中多种抗生素的主要功能及一些抗生素替代物的主要作用,综述了鸡养殖过程中的无抗饲养技术,为实现鸡的无抗养殖提供理论上的参考。 展开更多

关键词 鸡 无抗养殖 抗生素

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猪OLR1基因克隆及其与生产性状的关联、表达分析 被引量：8

8

作者 郭咪咪 乔木 +3 位作者 吴俊静 李良华 梅书棋 李助南 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期82-88,共7页

为鉴定对猪生产性状有重要影响的新分子标记,采用电子克隆技术结合PCR方法获得了猪氧化型低密度脂蛋白受体1（oxidized low-density lipoprotein receptor 1,OLR1）基因编码区序列,在OLR1基因第4内含子246bp处发现了1个新SNP位点A246G,... 为鉴定对猪生产性状有重要影响的新分子标记,采用电子克隆技术结合PCR方法获得了猪氧化型低密度脂蛋白受体1（oxidized low-density lipoprotein receptor 1,OLR1）基因编码区序列,在OLR1基因第4内含子246bp处发现了1个新SNP位点A246G,并建立了PCR-Pag1-RFLP基因分型方法,分析了4个不同品种猪群中该等位基因频率,发现国外品种大白、长白猪群G等位基因频率高于A等位基因频率,而国内品种梅山、大梅群体A等位基因频率高于G等位基因频率。在大梅猪群体中的关联分析结果发现,A246G位点与胸腰椎间膘厚、平均背膘、背最长肌含水量、背最长肌肌内脂肪含量、屠宰率、板油质量、6-7腰椎间膘厚、背最长肌大理石纹、股二头肌大理石纹显著或极显著相关。通过RT-PCR分析发现,OLR1在恩施黑猪和大白猪群中心脏表达量最高,其次是背脂,同品种不同组织间表达量差异大,表明OLR1基因是脂肪相关的候选基因。 展开更多

关键词 猪 OLR1 PCR-RFLP 关联分析 表达谱

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肉质相关基因TCAP启动子与转录因子MyoD结合的ChIP分析 被引量：4

9

作者 吴俊静 梅书棋 +3 位作者 彭先文 乔木 武华玉 刘贵生 《湖北农业科学》 北大核心 2013年第22期5612-5614,5617,共4页

为了检测肉质相关基因TCAP(Titin-cap,Telethonin)启动子与转录因子MyoD(Myogenic differentiation antigen)的体内结合情况,采用染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)结合PCR技术分析TCAP启动子与转录因子MyoD的结合... 为了检测肉质相关基因TCAP(Titin-cap,Telethonin)启动子与转录因子MyoD(Myogenic differentiation antigen)的体内结合情况,采用染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP)结合PCR技术分析TCAP启动子与转录因子MyoD的结合。结果表明,以MyoD抗体免疫沉淀的DNA片段为模板,PCR扩增获得了TCAP基因启动区121 bp的片段,实现了转录因子MyoD与TCAP启动子DNA序列结合。试验证实TCAP基因是MyoD调控的下游基因,在肌肉发育过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 染色质免疫共沉淀 TCAP基因 MyoD转录因子

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不同激素处理对猪排卵效果的影响 被引量：4

10

作者 刘西梅 乔宪凤 +5 位作者 李莉 肖红卫 王亚刚 华文君 魏庆信 程妮 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第10期2505-2506,共2页

试验采用孕马血清促性腺激素(PMSG)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)、前列腺烯醇(PG)3种不同的激素,处理后备母猪并进行配种、手术取卵,观测卵巢,收集胚胎并进行胚胎计数。结果表明,孕马血清促性腺激素与人绒毛膜促性腺激素的组合能显著提高... 试验采用孕马血清促性腺激素(PMSG)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)、前列腺烯醇(PG)3种不同的激素,处理后备母猪并进行配种、手术取卵,观测卵巢,收集胚胎并进行胚胎计数。结果表明,孕马血清促性腺激素与人绒毛膜促性腺激素的组合能显著提高母猪胚胎的数量(P<0.05);而前列腺烯醇处理只表现出诱导发情并能正常排卵的效果,但没有提高胚胎数量的作用(P>0.05)。 展开更多

关键词 猪 超数排卵 激素

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群养系统对妊娠母猪繁殖性能的影响 被引量：7

11

作者 孙华 宋忠旭 +3 位作者 董斌科 雷彬 彭先文 梅书棋 《湖北农业科学》 2016年第24期6507-6509,共3页

随着中国养猪业设施化、自动化和智能化的高速发展和动物福利观念的普及,母猪群养成为一种新的饲养模式。以BigFarmNet母猪智能化群养饲喂系统为平台,对母猪群养模式进行了初步研究,分析了在群养模式下妊娠母猪的繁殖性能,并探讨了合适... 随着中国养猪业设施化、自动化和智能化的高速发展和动物福利观念的普及,母猪群养成为一种新的饲养模式。以BigFarmNet母猪智能化群养饲喂系统为平台,对母猪群养模式进行了初步研究,分析了在群养模式下妊娠母猪的繁殖性能,并探讨了合适的管理模式,以期为母猪智能化、精细化饲养提供参考。结果表明,群养模式下母猪总产仔数和产活仔数分别为11.52头/窝和10.74头/窝,与平养+限位模式(分别为12.81头/窝和12.12头/窝)无显著性差异,群养模式初生窝重和个体重明显低于平养+限位模式,但21日龄窝重较高。群养系统转栏模式和饲喂曲线仍需要进一步的研究。 展开更多

关键词 母猪群养系统 BigFarmNet 繁殖性能

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猪卵母细胞体外成熟的影响因素 被引量：2

12

作者 华再东 郑新民 +3 位作者 魏庆信 许厚强 刘西梅 李莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期280-284,共5页

通过采集屠宰场废弃猪卵巢，体外分离和培养猪卵母细胞，探讨基础培养基、激素、卵泡直径大小及卵丘细胞层数对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明：改良TCM199（mTCM199）较NCSU-23培养猪卵母细胞成熟率显著提高（P〈0．05）；基础培... 通过采集屠宰场废弃猪卵巢，体外分离和培养猪卵母细胞，探讨基础培养基、激素、卵泡直径大小及卵丘细胞层数对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明：改良TCM199（mTCM199）较NCSU-23培养猪卵母细胞成熟率显著提高（P〈0．05）；基础培养基中添加PMSG、hcG和pFF，卵母细胞体外成熟率（80．63％）显著高于仅添加其中一种；从卵泡直径3～6mm和大于6mm卵泡获得的卵丘卵母细胞复合体（COCs），其体外培养成熟率（83．33％和76．43％）极显著高于卵泡直径在3mm以下获得的COCs成熟率（30．94％）；根据卵丘细胞层数把COCs分为A、B、C3级，其中A级和B级卵母细胞成熟率差异不显著，但都极显著高于C级卵母细胞的成熟率。 展开更多

关键词 猪 卵母细胞 体外成熟 卵丘卵母细胞复合体

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猪肺炎支原体脂蛋白LppT的多克隆抗体制备及鉴定 被引量：2

13

作者 刘威 袁芳艳 +7 位作者 周丹娜 刘泽文 杨克礼 段正赢 郭锐 蔡行 肖少波 田永祥 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第19期220-223,共4页

试验构建猪肺炎支原体重组表达质粒pET30a-LppT,通过快速定点突变试剂盒将LppT基因中513、945、1 860、2 547 bp处的A突变为G,使改造后的LppT基因能在大肠杆菌系统中正确表达,IPTG诱导重组蛋白的表达并进行了蛋白纯化,纯化的目的蛋白与... 试验构建猪肺炎支原体重组表达质粒pET30a-LppT,通过快速定点突变试剂盒将LppT基因中513、945、1 860、2 547 bp处的A突变为G,使改造后的LppT基因能在大肠杆菌系统中正确表达,IPTG诱导重组蛋白的表达并进行了蛋白纯化,纯化的目的蛋白与佐剂混合、乳化制备免疫原,免疫新西兰大白兔制备LppT蛋白多克隆抗体。SDS-PAGE分析结果显示,IPTG诱导表达后获得1条特异性蛋白条带,分子质量约为110 ku,与预期蛋白大小一致。可溶性分析结果表明目的蛋白以可溶形式表达于上清中,纯化的蛋白经SDS-PAGE分离后,用制备的LppT多克隆抗体进行Western Blot检测,结果表明制备的LppT多克隆抗体具有较强的特异性。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 脂蛋白 LppT 多克隆抗体

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采用真空泵法快速获取猪卵母细胞 被引量：2

14

作者 肖红卫 郑新民 +7 位作者 刘西梅 乔宪凤 李莉 张立苹 华文君 毕延震 华再东 周荆荣 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第21期4438-4440,共3页

试验比较了真空泵法与传统的手动抽吸法对猪卵母细胞成熟效果的影响,结果表明,真空泵法在平均使用时间、卵母细胞的收集效率及A、B级卵母细胞所占的比例方面均优于手动抽吸法,在卵母细胞的成熟率方面稍低于手动抽吸法。表明真空泵法是... 试验比较了真空泵法与传统的手动抽吸法对猪卵母细胞成熟效果的影响,结果表明,真空泵法在平均使用时间、卵母细胞的收集效率及A、B级卵母细胞所占的比例方面均优于手动抽吸法,在卵母细胞的成熟率方面稍低于手动抽吸法。表明真空泵法是一种有效的猪卵母细胞采集方法。 展开更多

关键词 猪卵母细胞 体外成熟 真空泵法 手动抽吸法

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影响大白猪繁殖性能的季节性因素分析 被引量：3

15

作者 孙华 宋忠旭 +3 位作者 李良华 彭先文 董斌科 梅书棋 《湖北农业科学》 2017年第24期4836-4838,共3页

为降低环境因素影响,充分发挥母猪的遗传潜力,利用原种猪育种场2013-2016年度的繁殖性能数据,分析了不同配种季节和分娩季节对大白母猪繁殖性能的影响。结果表明,春季配种母猪分娩率最高(92.60%),冬季配种母猪窝产仔数和产活仔数最高,... 为降低环境因素影响,充分发挥母猪的遗传潜力,利用原种猪育种场2013-2016年度的繁殖性能数据,分析了不同配种季节和分娩季节对大白母猪繁殖性能的影响。结果表明,春季配种母猪分娩率最高(92.60%),冬季配种母猪窝产仔数和产活仔数最高,分别为11.78和10.40头/窝。冬、春季配种效果较好。春季分娩母猪窝产仔数和产活仔数最高,分别为11.89和10.58头/窝,秋季最低,分别为11.29和10.00头/窝。配种季节和分娩季节对大白母猪繁殖性能影响均不显著(P>0.05)。 展开更多

关键词 大白猪 繁殖性能 季节 配种 分娩

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高繁大白猪新品系选育进展报告 被引量：1

16

作者 孙华 宋忠旭 +3 位作者 李良华 赵海忠 梅书棋 彭先文 《湖北农业科学》 2019年第S02期365-368,共4页

通过对国外不同来源大白猪种的特性及其在国内的繁殖性能表现进行全面调研和资料分析,湖北省农业科学院畜牧兽医研究所引进了具有生长速度快、繁殖性能好、饲料利用率高等特点的法系大白猪,经过适应性观察后组建基础群,开展了高繁大白... 通过对国外不同来源大白猪种的特性及其在国内的繁殖性能表现进行全面调研和资料分析,湖北省农业科学院畜牧兽医研究所引进了具有生长速度快、繁殖性能好、饲料利用率高等特点的法系大白猪,经过适应性观察后组建基础群,开展了高繁大白猪新品种(系)选育,经过6个世代的连续选育,新品系初产母猪产仔数达到12.61头/窝,产活仔数11.35头/窝;经产母猪产仔数达到14.86头/窝,产活仔数12.70头/窝;肥育期日增重为841.52 g/d,达100 kg体重日龄163.28 d,料肉比2.62∶1;胴体瘦肉率65.30%,肌内脂肪含量2.18%。 展开更多

关键词 高繁大白猪新品系 选育进展 繁殖性能 生长性能 标记辅助选择

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牛支原体蛋白-蛋白相互作用网络的构建

17

作者 刘威 袁芳艳 +6 位作者 周丹娜 刘泽文 杨克礼 段正赢 郭锐 肖少波 田永祥 《动物医学进展》 北大核心 2015年第11期20-24,共5页

病原菌的相互作用组学研究是揭示潜在信号转导通路和新型药物靶标的有力工具。通过同源蛋白映射的方法构建了牛支原体的蛋白-蛋白相互作用网络,所构建的互作网络包含138个蛋白和693个相互作用关系。通过蛋白的互作频率分析,确定了在牛... 病原菌的相互作用组学研究是揭示潜在信号转导通路和新型药物靶标的有力工具。通过同源蛋白映射的方法构建了牛支原体的蛋白-蛋白相互作用网络,所构建的互作网络包含138个蛋白和693个相互作用关系。通过蛋白的互作频率分析,确定了在牛支原体中互作频率最高的20个蛋白,这些蛋白主要与转录、翻译、分子伴侣等功能相关。进一步分析发现,伴侣蛋白DnaK和ClpB发生互作的频率较高,能与核糖体蛋白、代谢相关蛋白等多种功能蛋白发生相互作用。结果提示,若DnaK和ClpB的功能受到抑制,将会对牛支原体的正常生命活动造成较大的影响。 展开更多

关键词 牛支原体 蛋白相互作用 互作网络

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